第章肠杆菌科专家讲座.pptx

第第1010章章肠杆菌科肠杆菌科（Enterobacteriaceae）第章肠杆菌科第1页肠杆菌科肠杆菌科（Enterobacteriaceae）细菌细菌概念：概念：是指一大群生物学性状相同革兰阴性杆菌。是指一大群生物学性状相同革兰阴性杆菌。分布：分布：常借居在人和动物肠道内，常借居在人和动物肠道内，亦存在于土壤、水和腐物中亦存在于土壤、水和腐物中。种类：种类：当前已经有当前已经有4444个属个属，170170多个种多个种，其中大多数是肠道正常菌群，其中大多数是肠道正常菌群，能引发人类能引发人类感染菌种感染菌种不足不足2020个个。第一节：概第一节：概 述述第章肠杆菌科第3页医学上三种表现：医学上三种表现：致病菌致病菌：少数少数，有致病性，有致病性 如如 伤寒沙门菌、志贺菌、鼠疫耶尔森菌等；伤寒沙门菌、志贺菌、鼠疫耶尔森菌等；机会致病菌机会致病菌：正常菌群，宿主免疫力降低正常菌群，宿主免疫力降低、细菌移位至肠道以外部位时，、细菌移位至肠道以外部位时，即可引即可引起机会性感染，起机会性感染，如如 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌等大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌等 由正常菌群转变而来致病菌由正常菌群转变而来致病菌：是因为取得位于质粒、噬菌体或毒力岛毒力因子基因后而是因为取得位于质粒、噬菌体或毒力岛毒力因子基因后而 成为致病菌成为致病菌。如如 引发胃肠炎大肠埃希菌，引发胃肠炎大肠埃希菌，肠杆菌科细菌感染可累及身体任何部位。肠杆菌科细菌感染可累及身体任何部位。传染源：动物宿主（如大多数沙门菌感染，耶尔森菌感染等）；传染源：动物宿主（如大多数沙门菌感染，耶尔森菌感染等）；带菌者（志贺菌感染、伤寒沙门菌等）；带菌者（志贺菌感染、伤寒沙门菌等）；内源性播散（如大肠埃希菌机会性感染）。内源性播散（如大肠埃希菌机会性感染）。第章肠杆菌科第4页共同生物学特征共同生物学特征1 1.形态与结构形态与结构 n中等大小中等大小G G杆菌。杆菌。大多有菌毛，大多有菌毛，多数有周鞭毛，多数有周鞭毛，（志贺菌除外）（志贺菌除外）少数有荚膜少数有荚膜 沙门菌（革兰染色）沙门菌（革兰染色）福氏福氏志贺菌（革兰染色）志贺菌（革兰染色）埃希菌属（革兰染色）埃希菌属（革兰染色）第章肠杆菌科第5页2 2.培养培养 兼性厌氧或需氧。兼性厌氧或需氧。营养要求普通营养要求普通肉汤培养基肉汤培养基均匀混浊均匀混浊普通琼脂平板普通琼脂平板血平板血平板 有可产生溶血环有可产生溶血环 SSSS琼脂平板琼脂平板致病菌：致病菌：不分解乳糖不分解乳糖无色小菌落无色小菌落非致病菌：非致病菌：分解乳糖分解乳糖红色菌落红色菌落第章肠杆菌科第6页3 3.生化反应生化反应活泼活泼 区分不一样菌属和菌种主要依据之一区分不一样菌属和菌种主要依据之一 乳糖发酵试验乳糖发酵试验 是主要判别试验是主要判别试验 初步判别肠道致病菌和肠道非致病菌初步判别肠道致病菌和肠道非致病菌n肠道致病菌多数不发酵乳糖，如志贺菌和沙门菌肠道致病菌多数不发酵乳糖，如志贺菌和沙门菌n肠道非致病菌多数发酵乳糖，如埃希菌肠道非致病菌多数发酵乳糖，如埃希菌 触酶阳性、硝酸盐还原试验阳性、氧化酶阴性触酶阳性、硝酸盐还原试验阳性、氧化酶阴性 4.4.抵抗力抵抗力 对理化原因抵抗力不强。对理化原因抵抗力不强。胆盐、煌绿等染料对肠道非致病菌有选择抑制作用，胆盐、煌绿等染料对肠道非致病菌有选择抑制作用，藉以制备选择培养基来分离相关病原菌。藉以制备选择培养基来分离相关病原菌。第章肠杆菌科第7页4 4.抗原结构抗原结构复杂复杂 区分不一样菌属、菌种和菌型主要依据区分不一样菌属、菌种和菌型主要依据 主要有菌体主要有菌体O抗原、鞭毛抗原、鞭毛H抗原抗原、荚膜抗原、菌毛抗原、荚膜抗原、菌毛抗原6 6.变异变异 易出现变异菌株，其中最常见是易出现变异菌株，其中最常见是耐药性变异耐药性变异。含有属、种特异性。含有属、种特异性。多糖性质，多糖性质，能阻止能阻止O凝集现象。凝集现象。具型特异性具型特异性 第章肠杆菌科第8页第一节第一节 埃希菌属埃希菌属（Escherichia）第章肠杆菌科第9页第一节第一节 埃希菌属埃希菌属 埃希菌属埃希菌属（Escherichia）有有6 6个种，个种，其中大肠埃希菌其中大肠埃希菌（E.coli）在临床最常见、最主要。在临床最常见、最主要。其主要表现在：其主要表现在：肠道中主要正常菌群肠道中主要正常菌群，能为宿主提供维生素和抑制致病菌生长；能为宿主提供维生素和抑制致病菌生长；成为机会致病菌，引发肠道外感染；成为机会致病菌，引发肠道外感染；一些血清型含有致病性，能造成人类胃肠炎；一些血清型含有致病性，能造成人类胃肠炎；作为粪便污染环境和食品卫生学检测指标；作为粪便污染环境和食品卫生学检测指标；是分子生物学和基因工程研究主要试验材料。是分子生物学和基因工程研究主要试验材料。第章肠杆菌科第10页MM G杆菌杆菌M 多数菌株有周身鞭毛，多数菌株有周身鞭毛，M 有菌毛有菌毛，个别有微荚膜，个别有微荚膜M 兼性厌氧兼性厌氧M 判别培养基中分解乳糖形成判别培养基中分解乳糖形成 有色菌落有色菌落M有些菌株在血琼脂平板上有些菌株在血琼脂平板上 呈呈溶血。溶血。一、生物学性状一、生物学性状第章肠杆菌科第11页M能发酵葡萄糖等各种糖类，能发酵葡萄糖等各种糖类，产酸产气产酸产气M 绝大多数菌株发酵乳糖。绝大多数菌株发酵乳糖。M IMViC试验结果为试验结果为“”M 有有O、H和和K三种抗原三种抗原M 能产生大肠菌素能产生大肠菌素（colicine）。一、生物学性状一、生物学性状+产酸产气产酸产气不产酸产气（-）第章肠杆菌科第12页（一）致病物质（一）致病物质 1 1.黏附素黏附素（adhesine）：）：紧密粘着在泌尿道和肠道细胞上紧密粘着在泌尿道和肠道细胞上 特点：特异性高特点：特异性高 包含：定植因子抗原包含：定植因子抗原，（CFA/、CFA/、CFA/）集聚黏附菌毛集聚黏附菌毛和和（AAF/、AAF/）束形成菌毛束形成菌毛（bundle forming pili,Bfp）紧密粘附素紧密粘附素（intimin）尿路致病性大肠埃希菌尿路致病性大肠埃希菌 P菌毛菌毛和和Dr菌毛：菌毛：（uropathogenic E coli,UPEC）（能与（能与P或或Dr血型抗原结合）血型抗原结合）I型菌毛型菌毛：（其受体含有：（其受体含有D-甘露糖）甘露糖）侵袭质粒抗原侵袭质粒抗原（invasion plasmid antigen,Ipa）蛋白蛋白 二二、致病性与免疫性、致病性与免疫性第章肠杆菌科第13页2 2.外毒素外毒素 包含：包含：志贺毒素志贺毒素（Stx）耐热肠毒素耐热肠毒素（ST）：不耐热肠毒素不耐热肠毒素（LT）：）：溶血素溶血素A（HlyA）：）：尿路致病性大肠埃希菌毒力因子尿路致病性大肠埃希菌毒力因子 能溶解红细胞和一些类型细胞，能溶解红细胞和一些类型细胞，造成细胞因子释放和炎症反应。造成细胞因子释放和炎症反应。3.3.内毒素内毒素4.4.荚膜荚膜5.5.载铁蛋白载铁蛋白：从宿主获取铁离子：从宿主获取铁离子6.6.型分泌系统型分泌系统（type secretion systems）:如同分子注射器如同分子注射器 作用：是指细菌接触宿主细胞后，能向宿主细胞内输送作用：是指细菌接触宿主细胞后，能向宿主细胞内输送 毒性基因产物细菌效应系统，约由毒性基因产物细菌效应系统，约由2020余种蛋白余种蛋白 组成。组成。第章肠杆菌科第14页1 1.肠道外感染肠道外感染 内源性感染、医源性感染内源性感染、医源性感染 最常见：最常见：（1 1）化脓性感染：）化脓性感染：如腹膜炎、阑尾炎、手术创口感染如腹膜炎、阑尾炎、手术创口感染 （2 2）泌尿道感染：）泌尿道感染：尿路致病性大肠埃希菌引发常见。尿路致病性大肠埃希菌引发常见。（3 3）败血症：婴儿、老年人或免疫功效低下者，死亡率高）败血症：婴儿、老年人或免疫功效低下者，死亡率高 （4 4）新生儿脑膜炎）新生儿脑膜炎2 2.胃肠炎胃肠炎 为外源性感染。为外源性感染。一些血清型可引发人类胃肠炎，与食入污染食品和饮水相关，一些血清型可引发人类胃肠炎，与食入污染食品和饮水相关，（二）所致疾病（二）所致疾病第章肠杆菌科第15页引发胃肠炎大肠埃希菌引发胃肠炎大肠埃希菌 菌株菌株作用部位作用部位疾病与症状疾病与症状致病机制致病机制产毒型产毒型ETEC小肠小肠旅旅行行者者腹腹泻泻；婴婴幼幼儿儿腹腹泻泻；水水样样便便，恶心，呕吐，腹痛，低热恶心，呕吐，腹痛，低热质质粒粒介介导导LT和和ST肠肠毒毒素素，大大量量分分泌泌液液体和电解质；黏附素体和电解质；黏附素侵袭型侵袭型 EIEC大肠大肠n水样便，继以少许血便，腹痛，发烧质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞致病型致病型 EPEC小肠小肠n婴儿腹泻；水样便，恶心，呕吐，发烧n质粒介导A/E组织病理改变，伴上皮细胞绒毛结构破坏，造成吸收受损和腹泻出血型出血型 EHEC大肠大肠n水样便，继以大量出血，猛烈腹痛，低热或无，可并发HUS、血小板降低性紫癜n溶原性噬菌体编码Stx-I或Stx-II，中止蛋白质合成;A/E损伤，伴小肠绒毛结构破坏，造成吸收受损集聚型集聚型 EAEC小肠小肠n婴儿腹泻；连续性水样便，呕吐，脱水，低热质质粒粒介介导导集集聚聚性性粘粘附附上上皮皮细细胞胞，伴伴绒绒毛毛变变短短，单单核核细细胞胞浸浸润润和和出出血血，液液体体吸吸收收下降下降第章肠杆菌科第16页（一）（一）标本标本 肠外感染：采取中段尿、血液、脓液、脑脊液等；肠外感染：采取中段尿、血液、脓液、脑脊液等；胃肠炎：取粪便。胃肠炎：取粪便。三三、微生物学检验法、微生物学检验法（三）（三）卫生细菌学检验卫生细菌学检验 大肠菌群数大肠菌群数 （二）分离培养与判定（二）分离培养与判定（1 1）肠外感染。）肠外感染。涂片染色检验：革兰染色阴性短杆菌。涂片染色检验：革兰染色阴性短杆菌。分离培养：分离培养：标本标本血琼脂平板血琼脂平板菌落特征菌落特征判定判定 IMViC（+-+-）试验和试验和 系列生化反应系列生化反应 血液血液肉汤增菌肉汤增菌 离心沉淀物离心沉淀物体液体液 尿路感染尚需记数菌落量，每毫升尿路感染尚需记数菌落量，每毫升1010万才有诊疗价值。万才有诊疗价值。（2 2）肠内感染）肠内感染 粪便粪便判别培养基判别培养基可疑菌落可疑菌落判定为大肠杆菌后判定为大肠杆菌后 肠毒素、毒力因子和血清型肠毒素、毒力因子和血清型 方法：方法：ELISA、核酸杂交、核酸杂交、PCR我国卫生标准要求，大肠菌群在每升饮水中不得超出我国卫生标准要求，大肠菌群在每升饮水中不得超出3 3个；个；每每100ml100ml瓶装汽水、果汁中不得超出瓶装汽水、果汁中不得超出5 5个。个。第章肠杆菌科第17页预防预防疫苗正在研制中疫苗正在研制中加强水和食品、环境卫生细菌学监测，注意饮食卫生加强水和食品、环境卫生细菌学监测，注意饮食卫生进行诊疗技术时应进行诊疗技术时应严格无菌操作严格无菌操作，降低医院感染，降低医院感染 隔离治疗腹泻病人隔离治疗腹泻病人，切断传染源，切断传染源治疗治疗耐药性菌株普遍（一个或各种抗生素）耐药性菌株普遍（一个或各种抗生素）抗生素治疗应在药品敏感试验指导下进行抗生素治疗应在药品敏感试验指导下进行四四、防治标准、防治标准第章肠杆菌科第18页第二节第二节 志贺菌属志贺菌属（Shigella）俗称痢疾杆菌俗称痢疾杆菌（dysentery bacterium）第章肠杆菌科第19页1 1、形态结构、形态结构 G短小杆菌、有菌毛短小杆菌、有菌毛2 2、培养特征、培养特征 营养要求不高营养要求不高 S.S S.S等选择培养基上，呈无色半透明菌落等选择培养基上，呈无色半透明菌落一、生物学性状一、生物学性状3 3、生化反应、生化反应 分解葡萄糖，产酸不产气。分解葡萄糖，产酸不产气。除宋内志贺菌个别菌株迟缓发酵乳糖除宋内志贺菌个别菌株迟缓发酵乳糖 （普通需（普通需3434天）外，均不分解乳糖天）外，均不分解乳糖 动力阴性，硫化氢阴性。动力阴性，硫化氢阴性。第章肠杆菌科第20页菌种菌种 群群 型型 亚型亚型 甘露醇甘露醇 鸟氨酸脱羧酶鸟氨酸脱羧酶痢疾志贺菌痢疾志贺菌 A A 1-10 8a 1-10 8a，8b8b，8c -8c -（S.dysenteriaeS.dysenteriae）福氏志贺菌福氏志贺菌 B B 1-6 1-6，1a1a，1b1b，2a2a，2b2b，（S.S.flexneriflexneri）x x，y y变型变型 3a3a，3b3b，3c3c，4a4a，4b +-4b +-鲍氏志贺菌鲍氏志贺菌 C C 1-18 +-1-18 +-（S.boydiiS.boydii）宋内志贺菌宋内志贺菌 D D 1 +1 +（S.sonneiS.sonnei）5 5、抵抗力、抵抗力 弱，对酸非常敏感，弱，对酸非常敏感，故粪便标本应快速送检故粪便标本应快速送检。4 4、分类、分类 志贺菌属细菌有志贺菌属细菌有O和和K两种抗原。两种抗原。依据依据O抗原将志贺菌属分为抗原将志贺菌属分为4 4群群和和4040余血清型余血清型（包含亚型）（包含亚型）第章肠杆菌科第21页（一）致病物质（一）致病物质 1 1、侵袭力、侵袭力 2 2、内毒素、内毒素 3 3、外毒素、外毒素二二、致病性与免疫性、致病性与免疫性（1 1）菌毛）菌毛（2 2）侵袭质粒抗原）侵袭质粒抗原（Ipa）第章肠杆菌科第22页 是志贺菌主要致病原因是志贺菌主要致病原因是志贺菌主要致病原因是志贺菌主要致病原因 侵袭和生长繁殖靶细胞是回肠末端和结肠部位粘膜上皮细胞侵袭和生长繁殖靶细胞是回肠末端和结肠部位粘膜上皮细胞致病机制：致病机制：致病机制：致病机制：M 菌毛菌毛粘附于回肠末端和结肠粘膜上皮内粘附于回肠末端和结肠粘膜上皮内M细胞表面细胞表面M 型分泌系统分泌侵袭质粒抗原，诱导型分泌系统分泌侵袭质粒抗原，诱导上皮细胞和巨噬细胞上皮细胞和巨噬细胞内吞内吞 （IpaAIpaA、IpaBIpaB、IpaCIpaC、IpaDIpaD）M 进入细胞浆内生长进入细胞浆内生长繁殖并扩散至毗邻细胞及上皮下层繁殖并扩散至毗邻细胞及上皮下层M 经过两种方式致局部上皮细胞和肠壁组织损伤经过两种方式致局部上皮细胞和肠壁组织损伤 诱导细胞程序性死亡在吞噬细胞中存活诱导细胞程序性死亡在吞噬细胞中存活 促进促进IL-1释放，多形核细胞浸润，肠壁组织损伤，释放，多形核细胞浸润，肠壁组织损伤，加速了细菌扩散。坏死粘膜、死亡白细胞、细胞碎片、加速了细菌扩散。坏死粘膜、死亡白细胞、细胞碎片、纤维蛋白和血液组成脓血粘液便纤维蛋白和血液组成脓血粘液便1 1、侵袭力、侵袭力第章肠杆菌科第23页 除引发全身中毒症状外，可致局部肠壁损伤除引发全身中毒症状外，可致局部肠壁损伤致病机制：致病机制：作用于肠黏膜，使其通透性增高，促进机体对内毒作用于肠黏膜，使其通透性增高，促进机体对内毒 素吸收，引发发烧、神志障碍，甚至中毒性休克素吸收，引发发烧、神志障碍，甚至中毒性休克 等一系列症状等一系列症状 破坏肠黏膜，促进炎症、溃疡、坏死和出血破坏肠黏膜，促进炎症、溃疡、坏死和出血 作用于肠壁植物神经系统，使肠功效发生紊乱，肠作用于肠壁植物神经系统，使肠功效发生紊乱，肠 蠕动失调和痉挛，尤以直肠括约肌痉挛显著，出现蠕动失调和痉挛，尤以直肠括约肌痉挛显著，出现 腹痛、里急后重等症状腹痛、里急后重等症状 2 2、内毒素、内毒素 全部菌株都有强烈内毒素全部菌株都有强烈内毒素第章肠杆菌科第24页StxStx含有含有3 3种生物学活性：种生物学活性：肠毒素性肠毒素性:有类似大肠杆菌、霍乱弧菌肠毒素作用有类似大肠杆菌、霍乱弧菌肠毒素作用 疾病早期出现水样腹泻；疾病早期出现水样腹泻；细胞毒性细胞毒性:对人肝细胞、对人肝细胞、HeLa细胞、绿猴细胞、绿猴vero细胞都有细胞都有 毒性，以毒性，以HeLa细胞最为敏感；细胞最为敏感；神经毒性神经毒性:注射于家兔或小鼠，引发动物麻痹、死亡。注射于家兔或小鼠，引发动物麻痹、死亡。3 3、外毒素、外毒素A群志贺菌群志贺菌型和型和型产生，称志贺毒素型产生，称志贺毒素（shiga toxin,Stx）第章肠杆菌科第25页 ST由位于染色体上由位于染色体上stxA和和stxB基因编码。基因编码。结构与功效：结构与功效：1 1个个A亚单位亚单位进入细胞后，阻断蛋白质合成。进入细胞后，阻断蛋白质合成。5 5个个B亚单位亚单位与宿主细胞糖脂受体结合，与宿主细胞糖脂受体结合，介导介导A亚单位入细胞亚单位入细胞 A亚单位裂解亚单位裂解60S60S核糖体亚单位核糖体亚单位28S 28S rRNA，阻止其与氨酰阻止其与氨酰tRNA结合，致使蛋白质合成中止。结合，致使蛋白质合成中止。毒素作用基本表现：毒素作用基本表现：上皮细胞损伤上皮细胞损伤 小部分病人可表现为小部分病人可表现为肾小球内皮细胞损伤，肾小球内皮细胞损伤，造成溶血性尿毒综合征造成溶血性尿毒综合征第章肠杆菌科第26页 细菌性痢疾细菌性痢疾（菌痢）（菌痢）细菌性痢疾是一个常见病，主要流行于发展中国家，全细菌性痢疾是一个常见病，主要流行于发展中国家，全细菌性痢疾是一个常见病，主要流行于发展中国家，全细菌性痢疾是一个常见病，主要流行于发展中国家，全世界年病例数超出世界年病例数超出世界年病例数超出世界年病例数超出2 2 2 2亿，其中亿，其中亿，其中亿，其中500500500500万例需住院治疗，年死亡病万例需住院治疗，年死亡病万例需住院治疗，年死亡病万例需住院治疗，年死亡病例达例达例达例达65656565万。万。万。万。自自自自年以来，依据我国卫生部公布法定汇报传染病年以来，依据我国卫生部公布法定汇报传染病年以来，依据我国卫生部公布法定汇报传染病年以来，依据我国卫生部公布法定汇报传染病发病率数和死亡数排序，其发病数总在前五位，死亡数在前发病率数和死亡数排序，其发病数总在前五位，死亡数在前发病率数和死亡数排序，其发病数总在前五位，死亡数在前发病率数和死亡数排序，其发病数总在前五位，死亡数在前十位。十位。十位。十位。我国常见流行型别主要为我国常见流行型别主要为我国常见流行型别主要为我国常见流行型别主要为B B群群群群和和和和D D群群群群 （二）所致疾病（二）所致疾病第章肠杆菌科第27页临床类型：临床类型：急性细菌性痢疾急性细菌性痢疾 急性中毒性痢疾急性中毒性痢疾 慢性细菌性痢疾慢性细菌性痢疾传染源：传染源：病人和带菌者病人和带菌者 急性期患者传染性最强急性期患者传染性最强 慢性病例可长久储存病原体慢性病例可长久储存病原体 恢复期病人带菌达恢复期病人带菌达2-32-3周至数月周至数月传输路径：传输路径：粪粪-口路径口路径，随饮食进入肠道，随饮食进入肠道 感染局限于肠道，普通不侵入血液。感染局限于肠道，普通不侵入血液。第章肠杆菌科第28页 1 1、经典急性细菌性痢疾：、经典急性细菌性痢疾：潜伏期潜伏期1 13 3天天，症状：症状：突然发病，突然发病，常有发烧、腹痛、脓血黏液便常有发烧、腹痛、脓血黏液便，伴有里急后重伴有里急后重（tenesmus）。）。2 2、急性中毒性痢疾、急性中毒性痢疾 多见于小儿，多见于小儿，病死率高病死率高症状：症状：主要表现为主要表现为内毒素全身中毒症状内毒素全身中毒症状。消化道症状不显著。消化道症状不显著。3 3、慢性细菌性痢疾、慢性细菌性痢疾 急性细菌性痢疾迁延不愈，病程在急性细菌性痢疾迁延不愈，病程在两个月以两个月以 上者上者。有。有10102020病人可转为慢性。病人可转为慢性。症状：不经典，易误诊，影响治疗症状：不经典，易误诊，影响治疗 指出：个他人成为带菌者，是主要传染源。指出：个他人成为带菌者，是主要传染源。细菌定植部位是结肠。细菌定植部位是结肠。第章肠杆菌科第29页1、粘膜局部抗感染免疫、粘膜局部抗感染免疫 主要是消化道粘膜表面分泌主要是消化道粘膜表面分泌型型IgA（sIgA）；2、病后免疫期短暂，也不巩固。、病后免疫期短暂，也不巩固。原因：原因：细菌仅侵入肠壁组织，不入血细菌仅侵入肠壁组织，不入血 菌属内型别多菌属内型别多3、感染恢复后，血清中可产生循环抗体，但无保护作用。、感染恢复后，血清中可产生循环抗体，但无保护作用。（三）免疫性（三）免疫性第章肠杆菌科第30页（一）标本（一）标本采集注意事项：采集注意事项：取粪便脓血或黏液部分，防止与尿混合；取粪便脓血或黏液部分，防止与尿混合；在使用抗生素前采样在使用抗生素前采样；标本应新鲜标本应新鲜；标本若不能及时送检，宜将标本保留于标本若不能及时送检，宜将标本保留于 3030甘油缓冲盐水或专门送检培养基内。甘油缓冲盐水或专门送检培养基内。中毒性痢疾者可取肛拭。中毒性痢疾者可取肛拭。三三、微生物学检验法、微生物学检验法第章肠杆菌科第31页（四）快速诊疗法（四）快速诊疗法 1 1、免疫学方法：志贺菌抗原、免疫学方法：志贺菌抗原 免疫染色法；免疫染色法；免疫荧光菌球法免疫荧光菌球法；协同凝集试验协同凝集试验；胶乳凝集试验胶乳凝集试验；2 2、分子生物学方法、分子生物学方法 PCR技术、基因探针检测技术、基因探针检测140MD大质粒大质粒（二）分离培养与判定（二）分离培养与判定 标本标本肠道判别或选择培养基肠道判别或选择培养基 无色半透明可疑菌落无色半透明可疑菌落 生化反应和血清学试验生化反应和血清学试验以确定其菌群（种）和菌型。以确定其菌群（种）和菌型。（三）毒力试验（三）毒力试验：1.1.侵袭力测定侵袭力测定Senery试验：试验：方法：将受试菌固体培养物方法：将受试菌固体培养物以生理盐水制成以生理盐水制成9 9亿亿/ml/ml菌悬液菌悬液豚鼠豚鼠 眼结膜囊内眼结膜囊内发生角膜结膜炎为阳性，表明受试菌有侵袭力。发生角膜结膜炎为阳性，表明受试菌有侵袭力。2.2.ST测定：测定：方法：方法：HeLa细胞或细胞或vero细胞细胞 PCR技术直接检测其产毒基因技术直接检测其产毒基因stxA、stxB。第章肠杆菌科第32页四四、防治标准、防治标准非特异性预防：非特异性预防：水、食物和牛奶卫生学监测，水、食物和牛奶卫生学监测，垃圾处理和灭蝇；垃圾处理和灭蝇；隔离病人和消毒排泄物；隔离病人和消毒排泄物；发觉亚临床病例和带菌者；发觉亚临床病例和带菌者；特异性预防：特异性预防：致力于致力于活疫苗活疫苗研究。研究。主要分为主要分为3 3类：类：减毒突变株减毒突变株 链霉素依赖株链霉素依赖株 （streptomycin dependent strain,Sd）杂交株：杂交株：用不一样载体菌构建而成用不一样载体菌构建而成 营养缺点减毒株营养缺点减毒株治疗：治疗：抗生素抗生素 此菌很易出现多重耐药此菌很易出现多重耐药（multiple drug resistance）菌株菌株第章肠杆菌科第33页第三节第三节 沙门菌属沙门菌属（Salmonella）第章肠杆菌科第34页沙门菌属沙门菌属（Salmonella）是一群寄生在人类和动物肠道中，是一群寄生在人类和动物肠道中，生化反应和抗原结构相同革兰生化反应和抗原结构相同革兰 阴性菌。阴性菌。血清型现已达血清型现已达25002500各种各种，约约14001400各种能感染人类各种能感染人类分两个种分两个种：肠道沙门菌（肠道沙门菌（S.S.entericaenterica）：包含包含6 6个亚种，感染人类沙门菌都个亚种，感染人类沙门菌都在第一亚种在第一亚种 邦戈沙门菌邦戈沙门菌(S.S.bongoribongori)。第章肠杆菌科第35页 对人致病血清型对人致病血清型 伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、肖氏沙门菌、肖氏沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌希氏沙门菌希氏沙门菌希氏沙门菌 引发肠热症（伤寒或副伤寒）引发肠热症（伤寒或副伤寒）引发肠热症（伤寒或副伤寒）引发肠热症（伤寒或副伤寒）人畜共患病人畜共患病血清型血清型 鼠伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、猪霍乱沙门菌、猪霍乱沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌等肠炎沙门菌等肠炎沙门菌等肠炎沙门菌等 可引发人类食物中毒或败血症可引发人类食物中毒或败血症可引发人类食物中毒或败血症可引发人类食物中毒或败血症第章肠杆菌科第36页一、生物学性状一、生物学性状 n形态染色形态染色u G-杆菌杆菌 u 0.6-1.0 0.6-1.0m 2-4 2-4mu 多数有周身鞭毛多数有周身鞭毛u 有菌毛有菌毛 第章肠杆菌科第37页一、生物学性状一、生物学性状 n n培养和生化反应培养和生化反应培养和生化反应培养和生化反应uu兼性厌氧兼性厌氧兼性厌氧兼性厌氧uu营养要求不高营养要求不高营养要求不高营养要求不高uu伤寒沙门菌分解葡萄伤寒沙门菌分解葡萄伤寒沙门菌分解葡萄伤寒沙门菌分解葡萄糖产酸不产气糖产酸不产气糖产酸不产气糖产酸不产气uu其它菌都产酸产气其它菌都产酸产气其它菌都产酸产气其它菌都产酸产气uu不分解乳糖不分解乳糖不分解乳糖不分解乳糖uu多数产生多数产生多数产生多数产生H H H H2 2 2 2S S S SS.SS.SS.SS.S选择培养基选择培养基选择培养基选择培养基分解葡萄分解葡萄糖产酸不糖产酸不产气产气产生产生H2S第章肠杆菌科第38页主要沙门菌生化特征主要沙门菌生化特征菌名菌名葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖乳糖乳糖乳糖乳糖甘露醇甘露醇甘露醇甘露醇硫化氢硫化氢硫化氢硫化氢动力动力动力动力甲型副伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌肖氏沙门菌肖氏沙门菌肖氏沙门菌肖氏沙门菌鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌希氏沙门菌希氏沙门菌希氏沙门菌希氏沙门菌猪霍乱沙门菌猪霍乱沙门菌猪霍乱沙门菌猪霍乱沙门菌伤寒沙门菌伤寒沙门菌伤寒沙门菌伤寒沙门菌肠炎沙门菌肠炎沙门菌肠炎沙门菌肠炎沙门菌+/+/+/+/+/+/+/+/+/+/+/+第章肠杆菌科第39页3 3、抗原结构、抗原结构 主要有主要有O和和H两种抗原，少数菌中还有两种抗原，少数菌中还有Vi抗原抗原。组组 别别 菌菌 种种 O O抗原抗原 H H 抗抗 原原（group）第第1 1相相 第第2 2相相A A组（组（O2O2）甲型副伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌 1.2.12 1.2.12 a a B B组（组（O4O4）肖氏沙门菌肖氏沙门菌 4.5.12 4.5.12 b b 1.21.2 鼠伤寒沙门菌鼠伤寒沙门菌 1.4.5.12 1.4.5.12 i i 1.21.2C C组（组（O6O6）希氏沙门菌希氏沙门菌 6.7.6.7.Vi c Vi c 1.51.5 猪霍乱沙门菌猪霍乱沙门菌 6.7 c 6.7 c 1.51.5D D组（组（O9O9）伤寒沙门菌伤寒沙门菌 9.12.9.12.Vi d Vi d -肠炎沙门菌肠炎沙门菌 1.9.12 g.m 1.9.12 g.m E E组组(O3(O310)10)鸭沙门菌鸭沙门菌 3.10 3.10 e.h e.h 1.61.6 纽因顿沙门菌纽因顿沙门菌 3.15 3.15 e.h e.h 1.71.7常见沙门菌抗原组成常见沙门菌抗原组成常见沙门菌抗原组成常见沙门菌抗原组成4 4、沙门菌对理化原因抵抗力较差。、沙门菌对理化原因抵抗力较差。但对胆盐、煌绿耐受性较强但对胆盐、煌绿耐受性较强第章肠杆菌科第40页（一）致病物质（一）致病物质 1 1、侵袭力、侵袭力 有毒株能侵袭小肠粘膜有毒株能侵袭小肠粘膜致病作用：致病作用：（1 1）耐酸应答基因抗酸性保护作用：（胃和吞噬体酸性环境生存）耐酸应答基因抗酸性保护作用：（胃和吞噬体酸性环境生存）（2 2）种特异性菌毛黏附、侵入）种特异性菌毛黏附、侵入M细胞细胞内生长繁殖内生长繁殖 （3）SPI-I（沙门菌致病性岛沙门菌致病性岛）分泌侵袭蛋白：分泌侵袭蛋白：细菌内吞，细菌内吞，细菌扩散并进入毗邻细胞淋巴组织。细菌扩散并进入毗邻细胞淋巴组织。（4 4）氧化酶、超氧化物歧化酶等：）氧化酶、超氧化物歧化酶等：保护细菌在细胞内抗杀菌原因杀伤保护细菌在细胞内抗杀菌原因杀伤 （5）Vi抗原：抗吞噬、抗有害物质破坏菌体抗原：抗吞噬、抗有害物质破坏菌体 2 2、内毒素：、内毒素：3 3、肠毒素、肠毒素 如鼠伤寒沙门菌可产生肠毒素如鼠伤寒沙门菌可产生肠毒素，致胃肠炎。，致胃肠炎。二二、致病性与免疫性、致病性与免疫性第章肠杆菌科第41页传染源：传染源：病人和带菌者（健康带菌者更主要）病人和带菌者（健康带菌者更主要）其次为其次为带菌动物及其动物产品。带菌动物及其动物产品。传输路径：传输路径：粪粪-口路径口路径 食入感染动物或被污染或消毒不妥食入感染动物或被污染或消毒不妥水、贝壳类生物、水、贝壳类生物、奶和奶制品、肉和肉类制品、冷藏蛋类和蛋粉奶和奶制品、肉和肉类制品、冷藏蛋类和蛋粉 人类沙门菌感染有人类沙门菌感染有4 4种类型：种类型：1 1.肠热症肠热症(enteric fever,(enteric fever,typhoid fever)typhoid fever)包含包含 伤寒沙门菌伤寒沙门菌引发伤寒引发伤寒，甲型副伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌（原称乙型副伤寒沙门菌）肖氏沙门菌（原称乙型副伤寒沙门菌）引发副伤寒引发副伤寒 希氏沙门菌（希氏沙门菌（原称原称丙型副伤寒沙门菌丙型副伤寒沙门菌 ）（二）所致疾病（二）所致疾病（二）所致疾病（二）所致疾病第章肠杆菌科第42页菌毛菌毛穿入淋巴液穿入淋巴液穿入淋巴液穿入淋巴液胸导管胸导管第二次菌血症第二次菌血症第二次菌血症第二次菌血症迟发型变迟发型变迟发型变迟发型变态反应态反应态反应态反应肠壁坏死、肠壁坏死、肠壁坏死、肠壁坏死、溃疡溃疡溃疡溃疡经典症状：高热、肝脾肿大、玫瑰疹、经典症状：高热、肝脾肿大、玫瑰疹、白细胞下降等全身中毒症状白细胞下降等全身中毒症状肝肝肝肝 脾脾脾脾 肾肾肾肾 淋巴结淋巴结淋巴结淋巴结 胆囊胆囊胆囊胆囊尿排菌尿排菌尿排菌尿排菌 粪便排菌粪便排菌粪便排菌粪便排菌发病期发病期发病期发病期（1-41-41-41-4W W W W）潜伏期潜伏期2 2W W致病过程致病过程致病过程致病过程伤寒沙门菌等伤寒沙门菌等伤寒沙门菌等伤寒沙门菌等经口经口经口经口经过胃经过胃经过胃经过胃进入小肠进入小肠进入小肠进入小肠吸附、穿入小肠黏膜吸附、穿入小肠黏膜吸附、穿入小肠黏膜吸附、穿入小肠黏膜M M M M细胞，被巨噬细胞吞噬细胞，被巨噬细胞吞噬细胞，被巨噬细胞吞噬细胞，被巨噬细胞吞噬在肠壁、肠系膜淋巴在肠壁、肠系膜淋巴在肠壁、肠系膜淋巴在肠壁、肠系膜淋巴组织中繁殖（致敏）组织中繁殖（致敏）组织中繁殖（致敏）组织中繁殖（致敏）血流（第一次菌血症）血流（第一次菌血症）血流（第一次菌血症）血流（第一次菌血症）肠出血、肠出血、肠出血、肠出血、肠穿孔肠穿孔肠穿孔肠穿孔前驱症状：发烧、前驱症状：发烧、不适、全身疼痛等不适、全身疼痛等第章肠杆菌科第43页2 2 2 2.胃肠炎（食物中毒）胃肠炎（食物中毒）胃肠炎（食物中毒）胃肠炎（食物中毒）是最常见沙门菌感染，约占是最常见沙门菌感染，约占是最常见沙门菌感染，约占是最常见沙门菌感染，约占70%70%70%70%。由摄入大量（由摄入大量（由摄入大量（由摄入大量（101010108 8 8 8）被鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、）被鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、）被鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、）被鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌等污染食物引发肠炎沙门菌等污染食物引发肠炎沙门菌等污染食物引发肠炎沙门菌等污染食物引发常见食物：主要为肉类食品、常见食物：主要为肉类食品、常见食物：主要为肉类食品、常见食物：主要为肉类食品、蛋类、奶和奶制品，蛋类、奶和奶制品，蛋类、奶和奶制品，蛋类、奶和奶制品，系动物生前感染或加工处理过程污染所致。系动物生前感染或加工处理过程污染所致。系动物生前感染或加工处理过程污染所致。系动物生前感染或加工处理过程污染所致。多见于老人、婴儿和体弱者多见于老人、婴儿和体弱者多见于老人、婴儿和体弱者多见于老人、婴儿和体弱者。致病机制：细菌对肠黏膜致病机制：细菌对肠黏膜致病机制：细菌对肠黏膜致病机制：细菌对肠黏膜侵袭侵袭侵袭侵袭以及细菌释放以及细菌释放以及细菌释放以及细菌释放内毒素内毒素内毒素内毒素临床表现临床表现临床表现临床表现 潜伏期潜伏期潜伏期潜伏期 6-246-246-246-24小时小时小时小时 症症症症 状状状状 起病急，发烧、恶寒、呕吐、腹痛、水样便，起病急，发烧、恶寒、呕吐、腹痛、水样便，起病急，发烧、恶寒、呕吐、腹痛、水样便，起病急，发烧、恶寒、呕吐、腹痛、水样便，偶有粘液或脓性腹泻。偶有粘液或脓性腹泻。偶有粘液或脓性腹泻。偶有粘液或脓性腹泻。多在多在多在多在2-32-32-32-3天自愈。天自愈。天自愈。天自愈。（二）所致疾病（二）所致疾病（二）所致疾病（二）所致疾病第章肠杆菌科第44页 3 3 3 3.败血症败血症败血症败血症 多见于儿童和免疫力低下成人。多见于儿童和免疫力低下成人。多见于儿童和免疫力低下成人。多见于儿童和免疫力低下成人。由猪霍乱沙门菌、希氏沙门菌、由猪霍乱沙门菌、希氏沙门菌、由猪霍乱沙门菌、希氏沙门菌、由猪霍乱沙门菌、希氏沙门菌、鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌引发鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌引发鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌引发鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌引发 经口感染后，病菌即侵入血循环。经口感染后，病菌即侵入血循环。经口感染后，病菌即侵入血循环。经口感染后，病菌即侵入血循环。败血症症状严重，但肠道症状较少见。败血症症状严重，但肠道症状较少见。败血症症状严重，但肠道症状较少见。败血症症状严重，但肠道症状较少见。4 4 4 4.无症状带菌者无症状带菌者无症状带菌者无症状带菌者 约约约约1 1 1 15 5 5 5伤寒或副伤寒患者，伤寒或副伤寒患者，伤寒或副伤寒患者，伤寒或副伤寒患者，在症状消失后在症状消失后在症状消失后在症状消失后一一一一年仍年仍年仍年仍可可可可在其粪便中检出沙门菌，在其粪便中检出沙门菌，在其粪便中检出沙门菌，在其粪便中检出沙门菌，转变为无症状（健康）带菌者。转变为无症状（健康）带菌者。转变为无症状（健康）带菌者。转变为无症状（健康）带菌者。病菌病菌病菌病菌储存场所储存场所储存场所储存场所主要在主要在主要在主要在胆囊胆囊胆囊胆囊（三）免疫性（三）免疫性 特异性细胞免疫是主要防御机制。特异性细胞免疫是主要防御机制。特异性细胞免疫是主要防御机制。特异性细胞免疫是主要防御机制。胃肠炎恢复与肠道局部生成胃肠炎恢复与肠道局部生成胃肠炎恢复与肠道局部生成胃肠炎恢复与肠道局部生成sIgAsIgAsIgAsIgA相关。相关。相关。相关。第章肠杆菌科第45页 （一）标本（一）标本 （二）分离培养和判定（二）分离培养和判定 （三）血清学诊疗（三）血清学诊疗（三）血清学诊疗（三）血清学诊疗 （四）伤寒带菌者检出（四）伤寒带菌者检出（四）伤寒带菌者检出（四）伤寒带菌者检出三三、微生物学检验法、微生物学检验法第章肠杆菌科第46页（一）标本（一）标本（一）标本（一）标本 肠热症肠热症肠热症肠热症 第第第第1 1 1 1周周周周 取外周血，取外周血，取外周血，取外周血，第第第第2 2 2 2周起周起周起周起 取粪便，取粪便，取粪便，取粪便，第第第第3 3 3 3周起周起周起周起 还可取尿液，还可取尿液，还可取尿液，还可取尿液，从第从第从第从第1 1 1 1周至第周至第周至第周至第3 3 3 3周周周周 均可取骨髓液；均可取骨髓液；均可取骨髓液；均可取骨髓液；胃肠炎胃肠炎胃肠炎胃肠炎 取粪便和可疑食物。取粪便和可疑食物。取粪便和可疑食物。取粪便和可疑食物。败血症败血症败血症败血症 取血液。取血液。取血液。取血液。胆道带菌者胆道带菌者胆道带菌者胆道带菌者 可取十二指肠引流液。可取十二指肠引流液。可取十二指肠引流液。可取十二指肠引流液。三三、微生物学检验法、微生物学检验法第章肠杆菌科第47页三三、微生物学检验法、微生物学检验法 伤寒病人不一样病期血、粪、尿中病原菌和特异凝集素检出阳性率伤寒病