血流感染的实验室诊断.pptx

血流感染试验室诊疗血流感染的实验室诊断1/291血流感染概述血流感染概述2自动化血培养系统自动化血培养系统3标本采集和运输标本采集和运输4阳性报警后处理方法阳性报警后处理方法5怎样判断是否污染怎样判断是否污染血流感染的实验室诊断2/29一、血流感染概述一、血流感染概述血流感染的实验室诊断3/29（一）血流感染定义（一）血流感染定义血流感染（血流感染（bloodstream bloodstream infections,BSIinfections,BSI）是指各种病原微生物侵）是指各种病原微生物侵入血循环，释放毒素和代谢产物，并诱导入血循环，释放毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放，对机体全部脏器造成损害，细胞因子释放，对机体全部脏器造成损害，严重者可造成休克、多脏器衰竭、弥散性严重者可造成休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血，甚至死亡，是一个严重全身血管内凝血，甚至死亡，是一个严重全身感染性疾病。感染性疾病。血流感染的实验室诊断4/29（二）血流感染类型（二）血流感染类型菌血症（菌血症（bacteremiabacteremia）：细菌侵入血流，）：细菌侵入血流，还未大量还未大量繁殖且未引发临床症状，往往是一过性。繁殖且未引发临床症状，往往是一过性。败血症（败血症（septicemiasepticemia）：细菌进入血液）：细菌进入血液大量繁殖大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，分泌毒素或代谢产物，产生严重临床症状产生严重临床症状。脓毒败血症（脓毒败血症（pyemiapyemia）：细菌进入血液）：细菌进入血液大量繁殖大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，产生严重临床症状，常伴有分泌毒素或代谢产物，产生严重临床症状，常伴有多发性脓肿或败血性休克多发性脓肿或败血性休克。毒血症（毒血症（toxemiatoxemia）：细菌毒素或代谢产物进入血）：细菌毒素或代谢产物进入血液引发临床病症。液引发临床病症。血流感染的实验室诊断5/29（三）血培养现实状况（三）血培养现实状况l送检率低送检率低送检量送检量（瓶（瓶/日）日）床位床位中国大陆三甲医院中国大陆三甲医院2020505010001000中国香港玛丽医院中国香港玛丽医院20020014001400中国台湾台大医院中国台湾台大医院300300美国美国John HopinksJohn Hopinks30030040040010391039血流感染的实验室诊断6/29（三）血培养现实状况（三）血培养现实状况不正确采样不正确采样污染问题污染问题 皮肤定植菌群是血培养污染最常见细菌。阳性检出率低阳性检出率低检验周期长检验周期长 血流感染的实验室诊断7/29二、全自动血培养系统二、全自动血培养系统血流感染的实验室诊断8/29二、自动化血培养系统二、自动化血培养系统我院使用是我院使用是BacT/BacT/ALERT 3D ALERT 3D 全自动细全自动细菌、分枝杆菌培养系菌、分枝杆菌培养系统统工作原理：工作原理：细菌在培养基中代细菌在培养基中代谢基质时产生谢基质时产生CO2,CO2,并并水解成水解成H H+，H H+透过瓶透过瓶底滤过膜，瓶底乳胶底滤过膜，瓶底乳胶感应器颜色由墨绿色感应器颜色由墨绿色变成黄色。变成黄色。血流感染的实验室诊断9/29二、自动化血培养系统二、自动化血培养系统仪器培养孔底光仪器培养孔底光电探测器测量反电探测器测量反射光改变并按对射光改变并按对应公式计算。应公式计算。判读公式：判读公式：加速度法加速度法 速率法速率法 起始阈值法起始阈值法血流感染的实验室诊断10/29三、标本采集和运输三、标本采集和运输血流感染的实验室诊断11/29（一）标本采集（一）标本采集采集时间采集时间 1.1.尽可能在抗菌药品使用前；尽可能在抗菌药品使用前；2.2.对已经使用抗菌药品病人，最好在下次用药对已经使用抗菌药品病人，最好在下次用药前采集；前采集；3.3.寒战和发烧初起时采血可提升培养阳性率，寒战和发烧初起时采血可提升培养阳性率，心内膜炎（连续性菌血症）例外；心内膜炎（连续性菌血症）例外；4.4.怀疑血流感染时应尽早采血，不要强调体温怀疑血流感染时应尽早采血，不要强调体温超出超出3939才抽血，而错过时机。才抽血，而错过时机。血流感染的实验室诊断12/29（一）标本采集（一）标本采集寒战后体温高峰前寒战后体温高峰前细菌含量最高。细菌含量最高。血液细菌含量伴随血液细菌含量伴随体温从最高峰逐步体温从最高峰逐步下降而越来越少。下降而越来越少。血液采样最正确时血液采样最正确时间是在寒战后和发间是在寒战后和发烧高峰前，此时阳烧高峰前，此时阳性检出率最高。性检出率最高。血流感染的实验室诊断13/29（一）标本采集（一）标本采集l采血量 成人采血量为510ml/瓶，分别采取需氧瓶和厌氧瓶，双部位抽血。儿童采血量为35ml/瓶，采取儿童瓶。血流感染的实验室诊断14/29（二）标本运输（二）标本运输采血后血培养瓶应马上送检，不得超出采血后血培养瓶应马上送检，不得超出2h。不能放入冰箱或冷冻，有些苛养菌如肺炎链球菌、不能放入冰箱或冷冻，有些苛养菌如肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌等遇冷很轻易死亡。脑膜炎奈瑟菌等遇冷很轻易死亡。如在培养之前不得不放置一段时间，应置于室温。如在培养之前不得不放置一段时间，应置于室温。血流感染的实验室诊断15/29四、阳性报警后处理方法四、阳性报警后处理方法血流感染的实验室诊断16/29血培养阳性报警后，怎样处理？血培养阳性报警后，怎样处理？观察培养曲线观察培养曲线 涂片、转种血平板涂片、转种血平板 革兰染革兰染色色 镜检镜检 汇报危急值汇报危急值若革兰染色镜检未发觉细菌，若革兰染色镜检未发觉细菌，怎么办？怎么办？重新涂片，作重新涂片，作瑞氏染色瑞氏染色 以培养曲线作初步判断是否假阳性，次日观察血以培养曲线作初步判断是否假阳性，次日观察血平板上是否生长平板上是否生长血流感染的实验室诊断17/29血流感染的实验室诊断18/29血流感染的实验室诊断19/29阳性曲线血流感染的实验室诊断20/29阴性曲线血流感染的实验室诊断21/29假阳性曲线血流感染的实验室诊断22/29五、怎样判断是否污染？五、怎样判断是否污染？血流感染的实验室诊断23/29五、怎样判断是否污染？五、怎样判断是否污染？（一）阳性检出瓶数（二）细菌种类（三）阳性检出时间（四）重复培养结果血流感染的实验室诊断24/29（一）阳性检出瓶数（一）阳性检出瓶数两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固酶阴性葡萄球菌，也应考虑为致病菌酶阴性葡萄球菌，也应考虑为致病菌血流感染的实验室诊断25/29（二）细菌种类（二）细菌种类检出检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌菌及其它肠杆科细菌、及其它肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠铜绿假单胞菌、白色念珠菌菌时，时，90%90%以上是致病菌。以上是致病菌。检出检出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、新生隐球菌杆菌、新生隐球菌及其它假丝酵母菌，污染可能及其它假丝酵母菌，污染可能性更低。性更低。检出棒杆菌、微球菌、气球菌、芽胞杆菌、凝固检出棒杆菌、微球菌、气球菌、芽胞杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌，污染可能性很大。酶阴性葡萄球菌，污染可能性很大。血流感染的实验室诊断26/29（三）阳性检出时间（三）阳性检出时间阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。阳性报警出现时间小于阳性报警出现时间小于24h24h，普通为血流感染，普通为血流感染 大于大于48h48h，多为污染，多为污染血流感染的实验室诊断27/29（四）重复培养结果（四）重复培养结果与病人静脉导管培养或其它部位标本培养结果相与病人静脉导管培养或其它部位标本培养结果相比较，比较，2 2次以上分离细菌菌种与药敏谱相同时，考次以上分离细菌菌种与药敏谱相同时，考虑血流感染。虑血流感染。血流感染的实验室诊断28/29血流感染的实验室诊断29/29