药物分析药物的杂质检查专家讲座.pptx

第三章药品杂质检验 Test for purity药物分析药物的杂质检查第1页基本要求基本要求 一、掌握普通杂质检验原理、方法和计算。一、掌握普通杂质检验原理、方法和计算。二、熟悉特殊杂质检验方法和原理。二、熟悉特殊杂质检验方法和原理。三、了解热分析在药品分析中应用。三、了解热分析在药品分析中应用。返 回药物分析药物的杂质检查第2页第三章 药品杂质检验 Test for purityp 概 述p 普通杂质检验p 特殊杂质检验药物分析药物的杂质检查第3页有效性有效性针对一些药效进行检验项目 如Al(OH)3制酸力，反应主要质量；明胶凝冻度，控制物理性能；利福平结晶度，影响生物利用度均一性均一性含量均一性 如“含量均匀度”试验 一、概 述 药物分析药物的杂质检查第4页药品纯度：药品纯度：药品纯度是指药品纯洁程度。药品纯度是指药品纯洁程度。p安全性安全性 进行异常毒性、热原、降压物质和无菌等项目p纯度要求纯度要求 对杂质限量进行检验p药品纯度评价药品纯度评价 把药品性状、理化常数、杂质检验、含量测定等作为一个有联络整体来评价药品纯度。一、概 述 药物分析药物的杂质检查第5页例：纯度要求例：纯度要求Pethidine Hydrochloride盐酸哌替啶盐酸哌替啶无效异构体I 无效异构体 II药物分析药物的杂质检查第6页化学试剂纯度与药品纯度区分化学试剂纯度与药品纯度区分p化学试剂纯度化学试剂纯度 不考虑生理作用，杂质限量只是从可能引发化学改变对使用影响来限定。p药品纯度药品纯度 从用药安全、有效和药品稳定性影响考虑。比如：BaSO4（可溶性钡盐检项）药物分析药物的杂质检查第7页二、杂质起源与种类二、杂质起源与种类 source and sorts of impurities1.制备过程中产生制备过程中产生 酸度：水解试剂带入 乙醇中不溶物：水解中间体(糊精)SO32-：产品用H2SO3漂白 可溶性淀粉：水解不完全药物分析药物的杂质检查第8页2.2.贮藏过程中产生贮藏过程中产生 外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、微生物等引发药品产生微生物等引发药品产生 比如：比如：麻醉乙醚麻醉乙醚 醛及有毒醛及有毒 过氧化物过氧化物药物分析药物的杂质检查第9页(1)普通杂质：在各种药品中普遍存在杂质。(Cl-SO42-Pb As Fe)有害杂质有害杂质 (Pb As)信号杂质信号杂质 （Cl-SO42-）：考查生产工艺，反应药品纯度水平(2)特殊杂质：个别药品生产及贮藏中引入杂质。杂质种类 药物分析药物的杂质检查第10页杂质限量杂质限量：药品中所含杂质最大允许量。限量表示(g/g)：百分之几（%）百万分之几（10-6）限量检验：检验所含杂质是否超出杂质限量要求，通常不要求测定其准确含量。3 3、杂质限量检验、杂质限量检验（limit test）药物分析药物的杂质检查第11页杂质限量检验方法杂质限量检验方法 取取一定量一定量(CV)与被检杂质相同纯品或对照与被检杂质相同纯品或对照品配成对照品溶液，与品配成对照品溶液，与一定量一定量(S)药品供试溶液在药品供试溶液在相同条件下处理后，比较反应结果，以确定杂质相同条件下处理后，比较反应结果，以确定杂质含量是否超出要求。含量是否超出要求。药物分析药物的杂质检查第12页NaCl对照液对照液葡萄糖葡萄糖 稀硝酸稀硝酸10ml 硝酸银硝酸银1ml 稀硝酸稀硝酸10ml 硝酸银硝酸银1ml要求：对照液浊度要求：对照液浊度 供试液浊度供试液浊度药物分析药物的杂质检查第13页杂质限量计算：杂质限量计算：式中：式中：L 杂质程度（杂质程度（%）C 对照液浓度对照液浓度（g/ml）V 对照液加入体积（对照液加入体积（ml)S 供试品量供试品量(g)注意注意:单位统一单位统一药物分析药物的杂质检查第14页例例 1 ：对乙酰氨基酚中氯化物检验：样 2.0g 溶于100ml水中，取25ml检验Cl-，与标准NaCl溶液(10g/ml)5ml对照液相比，不得更深。C=10g/ml V=5.0ml S=25 2.0 100=0.5g药物分析药物的杂质检查第15页第二节第二节 普通杂质检验方法普通杂质检验方法条件：硝酸酸性条件（稀硝酸10ml）反应试剂：硝酸银试液 1.0ml杂质对照：NaCl (10g/ml)灵敏度范围：5080 g /50ml 讨论：选择稀硝酸反应条件意义。一一、氯化物（、氯化物（Chloride）检验）检验原理：原理：药物分析药物的杂质检查第16页1.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。2.平行操作标准。3.若供试品有色，需经处理后方可检验。注注 意：意：药物分析药物的杂质检查第17页）干扰及排除 （1）外消色法：如高锰酸钾中氯化物检验，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检验。（2）内消色法：倍量法供试品有色处理方法供试品有色处理方法药物分析药物的杂质检查第18页二二、重金属、重金属（Heavy Metals）检验检验1、第一法 硫代乙酰胺法 适用对象：溶于水、稀酸和乙醇药品 原 理：Pb2+醋酸盐缓冲液 +硫代乙酰胺(CH3CSNH2)PbS (黄棕黑)条件：介质：醋酸盐缓冲液 (pH 3.5)2ml 试剂：硫代乙酰胺(CH3CSNH2)2ml杂质对照液：PbNO3 (10g/ml)灵敏度范围：1020 g /27ml药物分析药物的杂质检查第19页葡萄糖中重金属检验：样4.0g溶于23ml水，加入2ml缓冲盐，依法检验，其重金属不得超出 百万分之五，取标准铅（10g/ml），v=?C=10g/ml L=5 10-6 S=4.0g V=2.0 ml 例例 2 2：药物分析药物的杂质检查第20页 注意：供试品如有色，需经处理后方可检验。注意：供试品如有色，需经处理后方可检验。1.外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其它无干扰有色溶液。2.内消色法。3.改用第四法，微孔滤膜过滤法。药物分析药物的杂质检查第21页第二法：灼烧后硫代乙酰胺法第二法：灼烧后硫代乙酰胺法 适合用于含芳环或杂环有机药品，如苯佐卡因、甲硝唑第三法第三法:硫化钠法硫化钠法 适合用于溶于碱药品或在稀酸产生沉淀药品，如磺胺类、巴比妥类第四法：微孔滤膜法第四法：微孔滤膜法 适合用于重金属限量低（25 g）药品。药物分析药物的杂质检查第22页C 垫圈垫圈(外径外径10mm,内径内径6mm)D 滤膜滤膜(直径直径10mm,孔径孔径3.0m)E 辅助滤板辅助滤板CDABFE滤器下部滤器上盖连接头 微孔滤膜过滤法检验重金属装置微孔滤膜过滤法检验重金属装置药物分析药物的杂质检查第23页三、砷盐检验法三、砷盐检验法 第一法 古蔡氏法 Gutzeit第二法 Ag-DDC法白田道夫法 Bettendorff 国内外惯用方法：药物分析药物的杂质检查第24页古古 蔡蔡 氏氏 法法：Zn+HCl药物分析药物的杂质检查第25页白田道夫法白田道夫法药物分析药物的杂质检查第26页 检检验验砷砷盐盐仪仪器器装装置置8cm18cm有孔玻璃旋塞有孔玻璃旋塞导气管导气管AsH3发生瓶发生瓶醋酸铅棉花醋酸铅棉花溴化汞试纸溴化汞试纸药物分析药物的杂质检查第27页二乙基二硫代氨基甲酸银法Ag-diethyldithiocarbamateAg-DDC法原理：是利用砷化氢与原理：是利用砷化氢与Ag-DDC吡啶溶液作用，使吡啶溶液作用，使Ag-DDC中中 银还原为红色胶态银，以银还原为红色胶态银，以Ag-DDC溶液为空白，于溶液为空白，于510nm波优点，测定吸收度，供试品溶液吸收度不得大于波优点，测定吸收度，供试品溶液吸收度不得大于标准砷溶液吸收度。标准砷溶液吸收度。药物分析药物的杂质检查第28页四、干燥失重四、干燥失重 （loss on drying）p恒温干燥恒温干燥 p干燥剂干燥干燥剂干燥 p减压干燥减压干燥p热分析法热分析法 thermal analysis,TA干燥失重物主要指水分干燥失重物主要指水分(结晶水或吸附水结晶水或吸附水)或挥发性物质或挥发性物质药物分析药物的杂质检查第29页在程序控制温度下,测量物质质量与温度关系方法热重分析法热重分析法 thermal gravimetric analysis,TGA:差示热分析法差示热分析法在程序控制温度下,测定供试品与参比物质之间温差(T)随温度改变函数关系differential thermal analysis,DTA:药物分析药物的杂质检查第30页草酸钙草酸钙(CaC(CaC2 2O O4 4HH2 2O)O)热重曲线热重曲线G1G2G310008006004002000WT1T2T3398838635478134226T()在温度在温度T1时时 CaC2O4H2O CaC2O4+H2O在温度在温度T2时时 CaC2O4 CaCO3+CO在温度在温度T3时时 CaCO3 CaO+CO2药物分析药物的杂质检查第31页样品样品 参比参比加热炉加热炉至信号至信号放大器放大器加热器加热器导线导线炉温炉温控制器控制器热差曲线直线热差曲线直线吸热峰吸热峰放热峰放热峰T()T热差曲线示意图热差曲线示意图差示热分析仪主要结构简图差示热分析仪主要结构简图载气？药物分析药物的杂质检查第32页盐酸多巴酚丁胺DTA-TGA曲线10090807060DTAT(/min)196233药物分析药物的杂质检查第33页15/min Program1纯双氯青霉素转变成液态并降解、纯双氯青霉素转变成液态并降解2、加入乳糖、加入乳糖3、加入硬脂酸镁、加入硬脂酸镁4、加入硬脂酸，主成份峰消失、加入硬脂酸，主成份峰消失5、单加入硬脂酸，主峰亦消失、单加入硬脂酸，主峰亦消失0100200T12345DTA扫描图扫描图药物分析药物的杂质检查第34页甲磺酸二氢麦角毒碱DSC-TGA曲线50100150200DSCTGA药物分析药物的杂质检查第35页不一样纯度苯甲酸DSC曲线温度温度97.2%98.6%标准品标准品药物分析药物的杂质检查第36页温度温度()50 80 110 140 170 200 230 260 29015.000.007.50盐酸舍曲林晶型盐酸舍曲林晶型DSCDSC曲线曲线mcal/sec药物分析药物的杂质检查第37页温度温度()50 80 110 140 170 200 230 260 2905.000.002.50mcal/sec盐酸舍曲林晶型盐酸舍曲林晶型DSCDSC曲线曲线药物分析药物的杂质检查第38页有机溶剂残留量有机溶剂残留量测定法测定法有机溶剂 程度,%程度,%苯苯 0.01 0.0002 氯仿氯仿 0.005 0.006 二氧六环二氧六环 0.01 0.038 二氯甲烷二氯甲烷 0.01 0.06 吡啶吡啶 0.01 0.02 甲苯甲苯 0.01 0.089 环氧乙烷环氧乙烷 0.001 0.001 ChP(95)Ch.P()药物分析药物的杂质检查第39页六、有机溶剂残留量测定色谱系统与系统适用性试验色谱系统与系统适用性试验System Suitability Tests;SSTs以直径为0.250.18mm二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为固定相，柱温为80170；并符合以下条件：用待测物色谱峰计算N应大于1000；内标物与待测物两个色谱峰R1.5；每个标准溶液进样5次，所得待测物与内标物峰面积之比RSD5%；若以外标法测定，所得待测物峰面积RSD10%药物分析药物的杂质检查第40页嗅味及挥发性差异颜色差异溶解行为差异旋光性质差异吸附或分配性质差异对光选择吸收性质差异第三节 特殊杂质检验物理性质上差异：物理性质上差异：药物分析药物的杂质检查第41页酸、碱性质差异氧化还原性差异杂质与一定试剂产生沉淀杂质与一定试剂产生颜色反应杂质与一定试剂反应产生气体化学性质上差异：化学性质上差异：药物分析药物的杂质检查第42页旋光性质旋光性质差异差异Ch.P要求黄体酮在乙醇中比旋度为：186198黄体酮及其中间体比旋度（溶剂：乙醇）化合物化合物 浓度浓度%温度温度 D 黄体酮 11.4 2025 +1934 醋酸双烯醇酮 0.9 20 -312 醋酸妊娠烯醇酮 1 常温 +202药物分析药物的杂质检查第43页220 260 300 nm肾上腺酮及肾上腺素紫外吸收曲线max310nm药物分析药物的杂质检查第44页药物分析药物的杂质检查第45页薄层色谱原理图 最惯用薄层色谱也属于液-固吸附色谱。同柱色谱不一样是吸附剂被涂布在玻璃板上，形成薄薄平面涂层。干燥后在涂层一端点样，竖直放入一个盛有少许展开剂有盖容器中。展开剂接触到吸附剂涂层，借毛细作用向上移动。与柱色谱过程相同，经过在吸附剂和展开剂之间屡次吸附-溶解作用，将混合物中各组分分离成孤立样点，实现混合物分离。药物分析药物的杂质检查第46页吸附或分配性质差异吸附或分配性质差异薄层色谱法薄层色谱法 TLCTLC比移值比移值药物分析药物的杂质检查第47页 常常 用用 方方 法：法：杂质对照品法杂质对照品法供试品本身对照法供试品本身对照法对照药品法对照药品法药物分析药物的杂质检查第48页供试品供试品10l N-甲基哌嗪甲基哌嗪10l 50mg/ml 50g/ml 枸橼酸乙胺嗪枸橼酸乙胺嗪I2蒸气显色蒸气显色药物分析药物的杂质检查第49页 要求要求：如显杂质斑点，不如显杂质斑点，不得多于得多于2个，其颜个，其颜色与对照品主斑点色与对照品主斑点相比较，不得更深。相比较，不得更深。地塞米松磷酸钠地塞米松磷酸钠 地塞米松地塞米松 20mg/ml 0.20mg/ml 药物分析药物的杂质检查第50页如有如有12个杂质点超出个杂质点超出时，应不得深于时，应不得深于0.01%对照液主斑点。对照液主斑点。其中有其中有1个杂质点应不个杂质点应不深于深于0.002%供试品主供试品主斑点。斑点。氨苯砜中检验氨苯砜中检验“相关相关物质物质”要求要求：0.01%供试品供试品100g/ml1%供试品供试品10mg/ml0.002%供试品供试品20g/ml药物分析药物的杂质检查第51页 分类 柱填充剂流动相正相色谱正相色谱硅胶硅胶n极性小有机溶剂极性化学键合硅胶极性化学键合硅胶正己烷正己烷,氯仿氯仿,二氧六环等二氧六环等反相色谱反相色谱十八烷基硅烷键合硅胶十八烷基硅烷键合硅胶甲醇甲醇/水水乙腈乙腈/水水四氢呋喃四氢呋喃/水水离子对色谱离子对色谱ODSRP流动相中加离子对试流动相中加离子对试剂剂离子交换色谱离子交换色谱离子交换填料离子交换填料电解质水溶液电解质水溶液排阻色谱排阻色谱 凝胶渗透凝胶渗透有机凝胶有机凝胶有机溶剂有机溶剂 凝胶过滤凝胶过滤玻璃微孔球玻璃微孔球水溶液水溶液高效液相色谱法 HPLC药物分析药物的杂质检查第52页主主 要要 方方 法：法：峰面积归一化法峰面积归一化法不加校正因子主成份本身对照法不加校正因子主成份本身对照法 加校正因子主成份本身对照法：用于加校正因子主成份本身对照法：用于有杂质对照品有杂质对照品时，时，杂质含量测定。杂质含量测定。内标法加校正因子测定供试品中杂质含量：用于内标法加校正因子测定供试品中杂质含量：用于有杂有杂质对照品质对照品时，时，杂质含量测定。杂质含量测定。外标法测定供试品中某个杂质或主成份含量：用于外标法测定供试品中某个杂质或主成份含量：用于有有杂质对照品杂质对照品或杂质对照品易制备情况。或杂质对照品易制备情况。药物分析药物的杂质检查第53页供试品供试品 供试品供试品+内标内标内标峰内标峰内标峰内标峰杂质杂质杂质杂质药物分析药物的杂质检查第54页