1、第二章 病毒非非细细胞胞生生物物 (真)病毒:至少含核酸(真)病毒:至少含核酸 亚病毒亚病毒 类病毒类病毒拟病毒拟病毒 朊病毒朊病毒第二章 病毒A A、没有细胞构造、没有细胞构造,仅是核酸和蛋白质。仅是核酸和蛋白质。B B、形态极其微小、形态极其微小,必须在电镜下才能观察。必须在电镜下才能观察。C C、一种病毒只含一种核酸、一种病毒只含一种核酸,DNA/RNA,DNA/RNA。D D、无产酶系统、无产酶系统,无蛋白合成系统,在宿主无蛋白合成系统,在宿主活细胞活细胞 内营专性寄生。内营专性寄生。E E、抗生素不敏感、抗生素不敏感,但对干扰素敏感。但对干扰素敏感。病毒的一般特征病毒的一般特征第二章
2、 病毒第一节第一节 病毒的形态结构和理化特性病毒的形态结构和理化特性一、病毒的大小及形态一、病毒的大小及形态二、病毒的构造、化学成分及其功能二、病毒的构造、化学成分及其功能三、病毒结构的对称性三、病毒结构的对称性第二章 病毒一、病毒的大小及形态(一)、病毒的大小(一)、病毒的大小病毒粒子:发育成熟的病毒个体统称为病毒病毒粒子:发育成熟的病毒个体统称为病毒粒子粒子病毒计量单位:纳米(病毒计量单位:纳米(nm,1nm=1/1000um)nm,1nm=1/1000um)第二章 病毒病病 毒毒 大大 小小牛痘苗病毒传染性浓泡皮炎病毒腮腺炎病毒T偶数病毒疱疹病毒大蚊病毒流感病毒烟草花叶病毒腺病毒多瘤病毒
3、脊髓灰质炎病毒1微米第二章 病毒 (二)(二)、病毒的形态、病毒的形态 病毒粒子外形有下列五种:病毒粒子外形有下列五种:1.1.砖形:痘病毒砖形:痘病毒 2.2.弹状:狂犬病病毒弹状:狂犬病病毒,水疱性口炎病毒等水疱性口炎病毒等 3.3.球形:腺病毒球形:腺病毒,疱疹病毒等疱疹病毒等 4.4.蝌蚪形:大部分噬菌体蝌蚪形:大部分噬菌体 5.5.杆状和丝形:烟草花叶病毒等杆状和丝形:烟草花叶病毒等第二章 病毒1.砖形2.弹状3.球形4.蝌蚪形5.杆形第二章 病毒二、病毒的结构、化学成分及其功能第二章 病毒(一)病毒的核心(一)病毒的核心 单单单单股股股股或或或或双双双双股股股股的的的的核核核核酸酸
4、酸酸:即即即即DNADNADNADNA或或或或RNARNARNARNA,其其其其包包包包含含含含全全全全部部部部遗传信息,主导病毒的生命活动。遗传信息,主导病毒的生命活动。遗传信息,主导病毒的生命活动。遗传信息,主导病毒的生命活动。(二)病毒的外壳(二)病毒的外壳 病病病病毒毒毒毒的的的的外外外外壳壳壳壳为为为为衣衣衣衣壳壳壳壳:包包包包围围围围在在在在病病病病毒毒毒毒核核核核心心心心外外外外面面面面的的的的一一一一层层层层蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质结结结结构构构构,由由由由许许许许多多多多蛋蛋蛋蛋白白白白亚亚亚亚单单单单位位位位(壳壳壳壳粒粒粒粒)组组组组成成成成。保保保保护护护护核核核核酸酸
5、酸酸免免免免受受受受外外外外界界界界环环环环境境境境因因因因素素素素破破破破坏坏坏坏,对对对对宿宿宿宿主主主主细细细细胞胞胞胞有有有有特特特特别别别别亲亲亲亲和和和和力力力力,是病毒的特异性抗原。是病毒的特异性抗原。是病毒的特异性抗原。是病毒的特异性抗原。第二章 病毒(三)病毒的囊膜(三)病毒的囊膜 病病毒毒在在衣衣壳壳外外面面有有双双层层膜膜(蛋蛋白白质质 多多糖糖 脂脂类类),主主要要来来自自于于宿宿主主细细胞胞的的细细胞胞膜膜或或核核膜膜。有有维维护护病病毒毒颗颗粒粒结结构构,保保护护病病毒毒核核衣衣壳壳的的作用。作用。(四)病毒的化学组成(四)病毒的化学组成 核酸核酸 蛋白质蛋白质 多
6、糖多糖 脂类脂类第二章 病毒三、病毒结构的对称性螺旋对称立体对称复合对称RNAorDNAProteinCoat(Capsomers)Lipidenvelope第二章 病毒螺旋对称的代表螺旋对称的代表-烟草花叶病毒烟草花叶病毒(tobao mosaicvirus,TMV)(tobao mosaicvirus,TMV)第二章 病毒二十面体对称的代表二十面体对称的代表-腺病毒腺病毒(Adenovirus)(Adenovirus)衣壳粒总数N=10(n-1)2+2n为每条边的衣壳粒数第二章 病毒刺突tailpins复合对称的代表-T偶数噬菌体95nm95nm头部head领环neck尾鞘tail(24环
7、)尾丝(tailfibers)65nm第二章 病毒四、包涵体四、包涵体 在在某某些些病病毒毒感感染染的的宿宿主主细细胞胞的的胞胞浆浆或或胞胞核核内内,出出现现的的光光镜镜下下可可见见的的大大小小,形形态态和和数数量量不不等等的的个体。个体。第二章 病毒组成组成:病毒的聚集体病毒的聚集体病毒的聚集体病毒的聚集体(腺病毒的核内包涵体腺病毒的核内包涵体腺病毒的核内包涵体腺病毒的核内包涵体)病毒感染细胞后的反应产物病毒感染细胞后的反应产物病毒感染细胞后的反应产物病毒感染细胞后的反应产物;出出现现部部位位:不不不不同同同同病病病病毒毒毒毒不不不不一一一一样样样样,痘痘痘痘病病病病毒毒毒毒见见见见于于于于
8、皮皮皮皮肤肤肤肤的的的的棘棘棘棘层层层层细胞中细胞中细胞中细胞中,而新城疫病毒则多见于支气管上皮细胞中而新城疫病毒则多见于支气管上皮细胞中而新城疫病毒则多见于支气管上皮细胞中而新城疫病毒则多见于支气管上皮细胞中;特特征征:具具具具有有有有一一一一定定定定的的的的种种种种属属属属性性性性.如如如如疱疱疱疱疹疹疹疹病病病病毒毒毒毒形形形形成成成成核核核核内内内内包包包包涵涵涵涵体体体体,痘痘痘痘病病病病毒毒毒毒形形形形成成成成胞胞胞胞浆浆浆浆包包包包涵涵涵涵体体体体,麻麻麻麻疹疹疹疹病病病病毒毒毒毒在在在在核核核核内内内内和和和和胞胞胞胞浆浆浆浆内内内内都出现包涵体都出现包涵体都出现包涵体都出现包
9、涵体.作用作用:可用于病毒的快速鉴别和某些疾病的辅助诊断可用于病毒的快速鉴别和某些疾病的辅助诊断可用于病毒的快速鉴别和某些疾病的辅助诊断可用于病毒的快速鉴别和某些疾病的辅助诊断第二章 病毒五、病毒的物理性状(一)滤过性(一)滤过性 “过滤性病毒过滤性病毒过滤性病毒过滤性病毒”常用滤器:赛氏滤器常用滤器:赛氏滤器常用滤器:赛氏滤器常用滤器:赛氏滤器,玻璃滤器玻璃滤器玻璃滤器玻璃滤器,微孔滤膜滤器微孔滤膜滤器微孔滤膜滤器微孔滤膜滤器.(二)浮密度(二)浮密度 由于病毒粒子太小,不能直接进行其密度的测定,由于病毒粒子太小,不能直接进行其密度的测定,由于病毒粒子太小,不能直接进行其密度的测定,由于病毒
10、粒子太小,不能直接进行其密度的测定,而将提纯的病毒粒子悬浮于某液体中(氯化铯、蔗而将提纯的病毒粒子悬浮于某液体中(氯化铯、蔗而将提纯的病毒粒子悬浮于某液体中(氯化铯、蔗而将提纯的病毒粒子悬浮于某液体中(氯化铯、蔗糖溶液等)进行间接测定,称为浮密度。糖溶液等)进行间接测定,称为浮密度。糖溶液等)进行间接测定,称为浮密度。糖溶液等)进行间接测定,称为浮密度。第二章 病毒六、理化因素对病毒的作用六、理化因素对病毒的作用(一)温(一)温 度度 保存病毒方法:保存病毒方法:保存病毒方法:保存病毒方法:1.1.1.1.快速低温冷冻快速低温冷冻快速低温冷冻快速低温冷冻 2.2.2.2.冷冻干燥冷冻干燥冷冻干
11、燥冷冻干燥(二)(二)pH pH 值值 大多数病毒在大多数病毒在大多数病毒在大多数病毒在pHpHpHpH为为为为6 6 6 68 8 8 8保存,保存,保存,保存,pHpHpHpH为为为为5.05.05.05.0以以以以下和下和下和下和9.09.09.09.0以上,多数病毒会被灭活。以上,多数病毒会被灭活。以上,多数病毒会被灭活。以上,多数病毒会被灭活。第二章 病毒(三)辐射(三)辐射n n射线和射线和射线和射线和X X X X射线以及非电离辐射紫外线,都对病射线以及非电离辐射紫外线,都对病射线以及非电离辐射紫外线,都对病射线以及非电离辐射紫外线,都对病毒呈现灭活作用毒呈现灭活作用毒呈现灭活作
12、用毒呈现灭活作用(四)超声波和光动力作用(四)超声波和光动力作用(五)脂溶剂(五)脂溶剂n n乙醚、氯仿、丙酮对有囊膜病毒有灭活作用乙醚、氯仿、丙酮对有囊膜病毒有灭活作用乙醚、氯仿、丙酮对有囊膜病毒有灭活作用乙醚、氯仿、丙酮对有囊膜病毒有灭活作用(六)甘油和抗生素(六)甘油和抗生素第二章 病毒七、病毒的血凝性与红细胞吸附现象七、病毒的血凝性与红细胞吸附现象某些病毒囊膜上有糖蛋白血凝素能与多种动物的红某些病毒囊膜上有糖蛋白血凝素能与多种动物的红某些病毒囊膜上有糖蛋白血凝素能与多种动物的红某些病毒囊膜上有糖蛋白血凝素能与多种动物的红细胞表面的糖蛋白受体结合,发生红细胞凝集现象。细胞表面的糖蛋白受体
13、结合,发生红细胞凝集现象。细胞表面的糖蛋白受体结合,发生红细胞凝集现象。细胞表面的糖蛋白受体结合,发生红细胞凝集现象。(新城疫(新城疫(新城疫(新城疫,禽流感禽流感禽流感禽流感 ;腺病毒);腺病毒);腺病毒);腺病毒)红细胞凝集现象可以被特异性抗体抑制,称为红细红细胞凝集现象可以被特异性抗体抑制,称为红细红细胞凝集现象可以被特异性抗体抑制,称为红细红细胞凝集现象可以被特异性抗体抑制,称为红细胞凝集抑制试验。胞凝集抑制试验。胞凝集抑制试验。胞凝集抑制试验。利用此法以鉴定病毒和检查动物体内抗体滴度,以利用此法以鉴定病毒和检查动物体内抗体滴度,以利用此法以鉴定病毒和检查动物体内抗体滴度,以利用此法以
14、鉴定病毒和检查动物体内抗体滴度,以诊断某些传染病。诊断某些传染病。诊断某些传染病。诊断某些传染病。第二章 病毒八八 噬菌体噬菌体n n噬菌体是侵袭细菌、放线菌、真菌和螺旋体等的病噬菌体是侵袭细菌、放线菌、真菌和螺旋体等的病噬菌体是侵袭细菌、放线菌、真菌和螺旋体等的病噬菌体是侵袭细菌、放线菌、真菌和螺旋体等的病毒。毒。毒。毒。n n噬菌体的形态有蝌蚪形、微球形、纤线形等三种形噬菌体的形态有蝌蚪形、微球形、纤线形等三种形噬菌体的形态有蝌蚪形、微球形、纤线形等三种形噬菌体的形态有蝌蚪形、微球形、纤线形等三种形态。态。态。态。n n噬菌体的化学成分主要是核酸和蛋白质。噬菌体的化学成分主要是核酸和蛋白质
15、。噬菌体的化学成分主要是核酸和蛋白质。噬菌体的化学成分主要是核酸和蛋白质。n n噬菌体具有抗原性,能刺激机体产生中和抗体。噬菌体具有抗原性,能刺激机体产生中和抗体。噬菌体具有抗原性,能刺激机体产生中和抗体。噬菌体具有抗原性,能刺激机体产生中和抗体。n n噬菌体对理化因素的抵抗力较强,一般在噬菌体对理化因素的抵抗力较强,一般在噬菌体对理化因素的抵抗力较强,一般在噬菌体对理化因素的抵抗力较强,一般在70707070下下下下30min30min30min30min仍不失去活性。耐低温和冰冻仍不失去活性。耐低温和冰冻仍不失去活性。耐低温和冰冻仍不失去活性。耐低温和冰冻,对紫外线和对紫外线和对紫外线和对
16、紫外线和X X X X射射射射线敏感线敏感线敏感线敏感.第二章 病毒 采用双层平板法采用双层平板法:将少量噬菌体与大量宿主将少量噬菌体与大量宿主将少量噬菌体与大量宿主将少量噬菌体与大量宿主细胞混合后,将此混合液与细胞混合后,将此混合液与细胞混合后,将此混合液与细胞混合后,将此混合液与45454545左右的琼脂培养基左右的琼脂培养基左右的琼脂培养基左右的琼脂培养基(1%)(1%)(1%)(1%)在培养皿中充分混匀,然后倒入含底层琼脂培在培养皿中充分混匀,然后倒入含底层琼脂培在培养皿中充分混匀,然后倒入含底层琼脂培在培养皿中充分混匀,然后倒入含底层琼脂培养基养基养基养基(2%)(2%)(2%)(2
17、%)的平板培养,经数小时至的平板培养,经数小时至的平板培养,经数小时至的平板培养,经数小时至10101010余小时后,在余小时后,在余小时后,在余小时后,在平板表面布满宿主细胞的菌苔上,可以用肉眼看到平板表面布满宿主细胞的菌苔上,可以用肉眼看到平板表面布满宿主细胞的菌苔上,可以用肉眼看到平板表面布满宿主细胞的菌苔上,可以用肉眼看到一个个透亮不长菌的小圆斑。即噬菌斑。一个个透亮不长菌的小圆斑。即噬菌斑。一个个透亮不长菌的小圆斑。即噬菌斑。一个个透亮不长菌的小圆斑。即噬菌斑。每一个噬菌斑一般由一个噬菌体粒子形成的,噬菌每一个噬菌斑一般由一个噬菌体粒子形成的,噬菌每一个噬菌斑一般由一个噬菌体粒子形成
18、的,噬菌每一个噬菌斑一般由一个噬菌体粒子形成的,噬菌斑的形成可用于检出、分离、纯化噬菌体和进行噬斑的形成可用于检出、分离、纯化噬菌体和进行噬斑的形成可用于检出、分离、纯化噬菌体和进行噬斑的形成可用于检出、分离、纯化噬菌体和进行噬菌体的计数。菌体的计数。菌体的计数。菌体的计数。噬菌斑噬菌斑第二章 病毒噬菌斑噬菌斑(plaque)(plaque)下层培养基下层培养基双层培养基双层培养基敏感菌敏感菌+上层培养基上层培养基噬菌体稀释液噬菌体稀释液培养培养噬菌斑噬菌斑噬菌斑噬菌斑敏感菌菌苔敏感菌菌苔第二章 病毒空斑和蚀斑 在单层细胞培养上时在单层细胞培养上时,由于病毒感染细胞裂由于病毒感染细胞裂解解,出
19、现的与噬菌斑类似的空斑出现的与噬菌斑类似的空斑,称为蚀斑称为蚀斑.是是病毒感染细胞形成的局限性病灶。病毒感染细胞形成的局限性病灶。第二章 病毒第二节 病毒的增殖一、病毒的增殖特点及方式一、病毒的增殖特点及方式隐蔽期隐蔽期隐蔽期隐蔽期增殖期增殖期增殖期增殖期 无囊膜病毒无囊膜病毒无囊膜病毒无囊膜病毒:抑制宿主细胞的增值,裂解释放抑制宿主细胞的增值,裂解释放抑制宿主细胞的增值,裂解释放抑制宿主细胞的增值,裂解释放 有囊膜病毒:和宿主细胞共同增值,有囊膜病毒:和宿主细胞共同增值,有囊膜病毒:和宿主细胞共同增值,有囊膜病毒:和宿主细胞共同增值,“出牙出牙出牙出牙”释放释放释放释放 肿瘤病毒:整合到宿主
20、细胞基因组中,可传到下一代肿瘤病毒:整合到宿主细胞基因组中,可传到下一代肿瘤病毒:整合到宿主细胞基因组中,可传到下一代肿瘤病毒:整合到宿主细胞基因组中,可传到下一代二、增值方式:二、增值方式:自我复制自我复制自我复制自我复制第二章 病毒三、病毒增殖的一般过程三、病毒增殖的一般过程(一)吸附期(一)吸附期吸附的机理:尾丝尖端与受体发生共价结合。吸附的机理:尾丝尖端与受体发生共价结合。第二章 病毒吸附的类型吸附的类型:1 1 静电吸附静电吸附:可逆可逆,非特异的非特异的.在在pH7pH7时时,病毒病毒与宿主细胞均带负电荷与宿主细胞均带负电荷,不易接触不易接触,但但Ca2+Ca2+和和Mg2+Mg2
21、+等阳离子可降低负电荷等阳离子可降低负电荷,促进静电吸附促进静电吸附;2 2 特异性吸附特异性吸附:病毒与易感细胞上的特异病毒与易感细胞上的特异性受体相结合性受体相结合.第二章 病毒影响因素影响因素:噬菌体数量噬菌体数量;阳离子阳离子;辅助因子辅助因子;温度。温度。第二章 病毒(二)进入期(二)进入期收缩的尾鞘(12环)第二章 病毒进入方式进入方式:1 1 膜膜融融合合:病病病病毒毒毒毒囊囊囊囊膜膜膜膜与与与与宿宿宿宿主主主主细细细细胞胞胞胞膜膜膜膜融融融融合合合合,将将将将其其其其内内内内部组分释放到细胞质中部组分释放到细胞质中部组分释放到细胞质中部组分释放到细胞质中,如新城疫病毒等副粘病毒
22、如新城疫病毒等副粘病毒如新城疫病毒等副粘病毒如新城疫病毒等副粘病毒;2 2 胞吞作用:胞吞作用:多数病毒按此方式侵入多数病毒按此方式侵入多数病毒按此方式侵入多数病毒按此方式侵入;3 3 完整病毒穿过细胞膜的完整病毒穿过细胞膜的完整病毒穿过细胞膜的完整病毒穿过细胞膜的移位方式移位方式移位方式移位方式,如腺病毒,如腺病毒,如腺病毒,如腺病毒.第二章 病毒(三)(三)脱壳期脱壳期 大大大大部部部部分分分分病病病病毒毒毒毒在在在在侵侵侵侵入入入入时时时时就就就就已已已已在在在在宿宿宿宿主主主主细细细细胞胞胞胞表表表表面面面面完完完完成成成成;有有有有的的的的则则则则在在在在宿宿宿宿主主主主细细细细胞胞
23、胞胞内内内内的的的的溶溶溶溶酶酶酶酶体体体体酶酶酶酶的的的的作作作作用用用用下下下下先先先先部部部部分分分分脱脱脱脱壳,然后启动病毒表达出脱壳酶壳,然后启动病毒表达出脱壳酶壳,然后启动病毒表达出脱壳酶壳,然后启动病毒表达出脱壳酶,再完全脱壳。再完全脱壳。再完全脱壳。再完全脱壳。(四)生物合成四)生物合成 生生生生物物物物合合合合成成成成特特特特点点点点:基基基基因因因因表表表表达达达达有有有有先先先先有有有有后后后后(基基基基因因因因表表表表达达达达的的的的顺顺顺顺序序序序为为为为:早早早早期期期期表表表表达达达达;次次次次早早早早期期期期表表表表达达达达;核核核核酸酸酸酸复复复复制制制制;晚
24、晚晚晚期表达)期表达)期表达)期表达)第二章 病毒n n双链双链双链双链DNADNADNADNA的复制的复制的复制的复制:()DNA()DNA()DNA()DNA()DNA()DNA()DNA()DNAn n单链单链单链单链DNADNADNADNA的复制的复制的复制的复制:+DNA -DNA DNA +DNA+DNA -DNA DNA +DNA+DNA -DNA DNA +DNA+DNA -DNA DNA +DNAn n双链双链双链双链RNARNARNARNA的复制的复制的复制的复制:RNA+RNA-RNA RNARNA+RNA-RNA RNARNA+RNA-RNA RNARNA+RNA-RN
25、A RNA n n+RNA+RNA+RNA+RNA复制复制复制复制:+RNA-RNA RNA+RNA+RNA-RNA RNA+RNA+RNA-RNA RNA+RNA+RNA-RNA RNA+RNAn n-RNA-RNA-RNA-RNA复制复制复制复制:-RNA +RNA(mRNA)Pr(RNA-RNA +RNA(mRNA)Pr(RNA-RNA +RNA(mRNA)Pr(RNA-RNA +RNA(mRNA)Pr(RNA复制酶复制酶复制酶复制酶)n n逆转录病毒单链逆转录病毒单链逆转录病毒单链逆转录病毒单链RNARNARNARNA的复制的复制的复制的复制:+RNA (-)DNA ()DNA+RNA
26、+RNA (-)DNA ()DNA+RNA+RNA (-)DNA ()DNA+RNA+RNA (-)DNA ()DNA+RNA肿瘤病毒肿瘤病毒肿瘤病毒肿瘤病毒 病毒核酸的复制第二章 病毒病毒核酸复制病毒核酸复制病毒核酸的复制病毒核酸链接入寄主核酸链病毒核酸链接入寄主核酸链第二章 病毒病毒核酸的转录病毒核酸的转录n n含含含含DNADNADNADNA的病毒的病毒的病毒的病毒:DNA mRNA:DNA mRNA:DNA mRNA:DNA mRNAn n+DNA+DNA+DNA+DNA病毒病毒病毒病毒:+DNA DNA mRNA:+DNA DNA mRNA:+DNA DNA mRNA:+DNA DN
27、A mRNAn n含含含含RNARNARNARNA病毒病毒病毒病毒:RNA mRNA:RNA mRNA:RNA mRNA:RNA mRNAn n含含含含+RNA+RNA+RNA+RNA病毒病毒病毒病毒:+RNA RNA mRNA:+RNA RNA mRNA:+RNA RNA mRNA:+RNA RNA mRNAn n含含含含-RNA-RNA-RNA-RNA病毒病毒病毒病毒:-RNA mRNA:-RNA mRNA:-RNA mRNA:-RNA mRNA第二章 病毒最后最后:大肠杆菌死亡并破裂,释放出里面的病毒,大肠杆菌死亡并破裂,释放出里面的病毒,新一代病毒开始新的生命旅程新一代病毒开始新的生命
28、旅程(五)病毒的装配与释放(五)病毒的装配与释放1 1、一次性释放:无囊膜病毒裂解宿主细胞的释放。一次性释放:无囊膜病毒裂解宿主细胞的释放。一次性释放:无囊膜病毒裂解宿主细胞的释放。一次性释放:无囊膜病毒裂解宿主细胞的释放。2 2、逐个释放:有囊膜病毒以出芽方式,获得核膜或、逐个释放:有囊膜病毒以出芽方式,获得核膜或、逐个释放:有囊膜病毒以出芽方式,获得核膜或、逐个释放:有囊膜病毒以出芽方式,获得核膜或细胞膜,形成囊膜及刺突。细胞膜,形成囊膜及刺突。细胞膜,形成囊膜及刺突。细胞膜,形成囊膜及刺突。第二章 病毒四四 .不完全复制和缺损病毒不完全复制和缺损病毒不完全复制不完全复制不完全复制不完全复
29、制:可以合成部分或全部病毒成分可以合成部分或全部病毒成分可以合成部分或全部病毒成分可以合成部分或全部病毒成分,但不能正常装但不能正常装但不能正常装但不能正常装配配配配.缺损病毒缺损病毒缺损病毒缺损病毒:不能形成成熟病毒粒子的病毒不能形成成熟病毒粒子的病毒不能形成成熟病毒粒子的病毒不能形成成熟病毒粒子的病毒.五五.干扰现象和干扰素干扰现象和干扰素(一)干扰现象(一)干扰现象(一)干扰现象(一)干扰现象 当两种病毒感染同一细胞,甲种病毒能抑制乙病毒的当两种病毒感染同一细胞,甲种病毒能抑制乙病毒的当两种病毒感染同一细胞,甲种病毒能抑制乙病毒的当两种病毒感染同一细胞,甲种病毒能抑制乙病毒的增殖。增殖。
30、增殖。增殖。本质本质本质本质:1:1:1:1 由干扰素引起由干扰素引起由干扰素引起由干扰素引起;2;2;2;2 均需膜上的同一受体均需膜上的同一受体均需膜上的同一受体均需膜上的同一受体;3;3;3;3 复制复制复制复制时时时时,需动用细胞的同种功能需动用细胞的同种功能需动用细胞的同种功能需动用细胞的同种功能.第二章 病毒(二)干扰素的生物学特性(二)干扰素的生物学特性 干干干干扰扰扰扰素素素素是是是是由由由由干干干干扰扰扰扰素素素素诱诱诱诱导导导导剂剂剂剂作作作作用用用用于于于于活活活活细细细细胞胞胞胞后后后后,由由由由细细细细胞胞胞胞产产产产生生生生的的的的一一一一种种种种低低低低分分分分子
31、子子子糖糖糖糖蛋蛋蛋蛋白白白白,能能能能抑抑抑抑制制制制多多多多种种种种病病病病毒的生长和繁殖。毒的生长和繁殖。毒的生长和繁殖。毒的生长和繁殖。干干干干扰扰扰扰素素素素诱诱诱诱导导导导剂剂剂剂:不不不不论论论论天天天天然然然然还还还还是是是是合合合合成成成成,凡凡凡凡是是是是能能能能诱诱诱诱导导导导细胞产生干扰素的物质细胞产生干扰素的物质细胞产生干扰素的物质细胞产生干扰素的物质.第二章 病毒1 1 干扰素的生物学活性干扰素的生物学活性干扰素的生物学活性干扰素的生物学活性 (1)(1)抑抑抑抑制制制制病病病病毒毒毒毒复复复复制制制制;抗抗抗抗病病病病毒毒毒毒作作作作用用用用无无无无特特特特异异异
32、异性性性性,是是是是广广广广谱谱谱谱抗抗抗抗病病病病毒毒毒毒物质物质物质物质,,但其保护作用具有种属特异性,但其保护作用具有种属特异性,但其保护作用具有种属特异性,但其保护作用具有种属特异性.(2)(2)抑制癌细胞分裂抑制癌细胞分裂抑制癌细胞分裂抑制癌细胞分裂;(3)(3)活化单核巨噬细胞。活化单核巨噬细胞。活化单核巨噬细胞。活化单核巨噬细胞。2 2 作用机制作用机制作用机制作用机制 本本本本身身身身对对对对病病病病毒毒毒毒无无无无灭灭灭灭活活活活作作作作用用用用,主主主主要要要要作作作作用用用用于于于于正正正正常常常常细细细细胞胞胞胞使使使使其其其其产产产产生生生生一一一一种种种种抗抗抗抗病
33、病病病毒毒毒毒蛋蛋蛋蛋白白白白,这这这这种种种种蛋蛋蛋蛋白白白白可可可可干干干干扰扰扰扰病病病病毒毒毒毒mRNAmRNA的的的的翻翻翻翻译译译译,从从从从而而而而抑制了新病毒的合成抑制了新病毒的合成抑制了新病毒的合成抑制了新病毒的合成.3 3 应用应用应用应用第二章 病毒第四节 病毒的微生物学检查一、病料的收集和送检一、病料的收集和送检n n从病畜体内存在病毒最多的器官或组织采取病料。从病畜体内存在病毒最多的器官或组织采取病料。从病畜体内存在病毒最多的器官或组织采取病料。从病畜体内存在病毒最多的器官或组织采取病料。n n注意采集病料的时间,以症状刚出现是为佳。注意采集病料的时间,以症状刚出现是
34、为佳。注意采集病料的时间,以症状刚出现是为佳。注意采集病料的时间,以症状刚出现是为佳。n n检查抗体时,则采取一个病畜的初期和恢复期的血清,以检查抗体时,则采取一个病畜的初期和恢复期的血清,以检查抗体时,则采取一个病畜的初期和恢复期的血清,以检查抗体时,则采取一个病畜的初期和恢复期的血清,以了解抗体滴度的变化。了解抗体滴度的变化。了解抗体滴度的变化。了解抗体滴度的变化。n n保存与运送,由于病毒对外界的因素特别是很敏感,因此保存与运送,由于病毒对外界的因素特别是很敏感,因此保存与运送,由于病毒对外界的因素特别是很敏感,因此保存与运送,由于病毒对外界的因素特别是很敏感,因此必须放在保护液中,并在
35、低温下保存或寄送。必须放在保护液中,并在低温下保存或寄送。必须放在保护液中,并在低温下保存或寄送。必须放在保护液中,并在低温下保存或寄送。n n收集病料必须无菌操作,如有污染,可用通过滤器、加抗收集病料必须无菌操作,如有污染,可用通过滤器、加抗收集病料必须无菌操作,如有污染,可用通过滤器、加抗收集病料必须无菌操作,如有污染,可用通过滤器、加抗生素或高速离心法除去细菌,方可使用。生素或高速离心法除去细菌,方可使用。生素或高速离心法除去细菌,方可使用。生素或高速离心法除去细菌,方可使用。第二章 病毒二、病毒的分离培养(一)动物的接种法(一)动物的接种法(一)动物的接种法(一)动物的接种法 可可可可
36、用用用用该该该该动动动动物物物物的的的的敏敏敏敏感感感感病病病病毒毒毒毒接接接接种种种种,如如如如怀怀怀怀疑疑疑疑伪伪伪伪狂狂狂狂犬犬犬犬病病病病料料料料接接接接种种种种兔兔兔兔子;口蹄疫病料接种乳鼠;猪瘟病毒的猪兔交互免疫实验等。子;口蹄疫病料接种乳鼠;猪瘟病毒的猪兔交互免疫实验等。子;口蹄疫病料接种乳鼠;猪瘟病毒的猪兔交互免疫实验等。子;口蹄疫病料接种乳鼠;猪瘟病毒的猪兔交互免疫实验等。(二)鸡胚的接种法(二)鸡胚的接种法(二)鸡胚的接种法(二)鸡胚的接种法 目目目目前前前前常常常常用用用用鸡鸡鸡鸡胚胚胚胚分分分分离离离离的的的的病病病病毒毒毒毒有有有有正正正正黏黏黏黏病病病病毒毒毒毒、副
37、副副副黏黏黏黏病病病病毒毒毒毒、痘痘痘痘病病病病毒等。常用的途径有绒毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊等。毒等。常用的途径有绒毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊等。毒等。常用的途径有绒毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊等。毒等。常用的途径有绒毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊等。(三)组织培养法(三)组织培养法(三)组织培养法(三)组织培养法 原原原原指指指指动动动动物物物物或或或或植植植植物物物物组组组组织织织织小小小小块块块块的的的的体体体体外外外外培培培培养养养养。此此此此名名名名称称称称现现现现已已已已用用用用以以以以泛泛泛泛指指指指体体体体外外外外的的的的组组组组织织织织、器器器器官官官官和
38、和和和细细细细胞胞胞胞培培培培养养养养。组组组组织织织织培培培培养养养养是是是是分分分分离离离离和和和和培培培培养养养养病病病病毒以及进行病毒学试验研究的简便而有效的工具和手段。毒以及进行病毒学试验研究的简便而有效的工具和手段。毒以及进行病毒学试验研究的简便而有效的工具和手段。毒以及进行病毒学试验研究的简便而有效的工具和手段。第二章 病毒三、病毒的鉴定三、病毒的鉴定 可通过以下方法确证病毒的存在:形态学观察 检查包涵体 细胞病变 检测某病毒抗原或确证特异性抗体的存在第二章 病毒四四、病毒定量的几个概念病毒定量的几个概念1 病毒感染单位病毒感染单位(IU)能够引起宿主或宿主细胞发生一定特异性反应
39、能够引起宿主或宿主细胞发生一定特异性反应能够引起宿主或宿主细胞发生一定特异性反应能够引起宿主或宿主细胞发生一定特异性反应的病毒最小剂量的病毒最小剂量的病毒最小剂量的病毒最小剂量2 病毒的效价或毒力病毒的效价或毒力 指单位体积病毒悬液的感染单位数目指单位体积病毒悬液的感染单位数目指单位体积病毒悬液的感染单位数目指单位体积病毒悬液的感染单位数目3 半数致死剂量半数致死剂量(LD50)4 半数感染剂量半数感染剂量(ID50)5半数组织培养感染剂量半数组织培养感染剂量(TCID50)第二章 病毒第五节 亚病毒n n类病毒n n卫星病毒n n卫星RNAn n朊病毒第二章 病毒类病毒n n由由由由单单单单
40、链链链链共共共共价价价价闭闭闭闭合合合合环环环环状状状状RNARNA组组组组成成成成,没没没没有有有有外外外外壳壳壳壳蛋蛋蛋蛋白白白白和和和和脂脂脂脂质外膜质外膜质外膜质外膜n n能自我复制能自我复制能自我复制能自我复制,不需要辅助病毒不需要辅助病毒不需要辅助病毒不需要辅助病毒,但不能编码蛋白质但不能编码蛋白质但不能编码蛋白质但不能编码蛋白质n n迄迄迄迄今今今今所所所所知知知知的的的的类类类类病病病病毒毒毒毒仅仅仅仅存存存存在在在在于于于于高高高高等等等等植植植植物物物物中中中中,核核核核酸酸酸酸都都都都是是是是RNARNAn n易被易被易被易被RNARNA酶破坏酶破坏酶破坏酶破坏,能耐受能
41、耐受能耐受能耐受50-6050-60度度度度,不失去侵染性不失去侵染性不失去侵染性不失去侵染性n n传染性强传染性强传染性强传染性强,但大多呈隐性感染但大多呈隐性感染但大多呈隐性感染但大多呈隐性感染第二章 病毒卫星病毒 是类基因组缺失,需要依赖辅助病毒,才能复制是类基因组缺失,需要依赖辅助病毒,才能复制是类基因组缺失,需要依赖辅助病毒,才能复制是类基因组缺失,需要依赖辅助病毒,才能复制和表达,完成增殖的病毒。如丁型肝炎病毒必须利和表达,完成增殖的病毒。如丁型肝炎病毒必须利和表达,完成增殖的病毒。如丁型肝炎病毒必须利和表达,完成增殖的病毒。如丁型肝炎病毒必须利用乙型肝炎病毒的包膜蛋白才能完成复制
42、周期用乙型肝炎病毒的包膜蛋白才能完成复制周期用乙型肝炎病毒的包膜蛋白才能完成复制周期用乙型肝炎病毒的包膜蛋白才能完成复制周期.卫星卫星RNARNA 是是是是类类类类寄寄寄寄生生生生于于于于辅辅辅辅助助助助病病病病毒毒毒毒壳壳壳壳体体体体内内内内,虽虽虽虽与与与与辅辅辅辅助助助助病病病病毒毒毒毒基基基基因因因因组组组组无无无无同同同同源源源源性性性性,但但但但必必必必须须须须依依依依赖赖赖赖于于于于辅辅辅辅助助助助病病病病毒毒毒毒才才才才能能能能复复复复制制制制RNARNA分子片段分子片段分子片段分子片段.第二章 病毒朊病毒朊病毒 是是是是类类类类具具具具有有有有侵侵侵侵染染染染性性性性并并并并
43、能能能能在在在在宿宿宿宿主主主主细细细细胞胞胞胞内内内内复复复复制制制制的的的的小小小小分分分分子子子子无无无无免免免免疫疫疫疫性性性性疏疏疏疏水水水水蛋蛋蛋蛋白白白白质质质质,是是是是疯疯疯疯牛牛牛牛病病病病,人人人人的的的的库库库库鲁鲁鲁鲁病病病病和和和和羊羊羊羊搔痒病的病原搔痒病的病原搔痒病的病原搔痒病的病原.所有能使蛋白质变性的物质均能使该病原失活所有能使蛋白质变性的物质均能使该病原失活所有能使蛋白质变性的物质均能使该病原失活所有能使蛋白质变性的物质均能使该病原失活.第二章 病毒第六节 病毒的分类和命名一、动物病毒分类的发展一、动物病毒分类的发展 病病病病毒毒毒毒的的的的分分分分类类类
44、类与与与与命命命命名名名名经经经经历历历历过过过过几几几几个个个个阶阶阶阶段段段段,到到到到目目目目前前前前为为为为止止止止仍仍仍仍未未未未有有有有成成成成熟熟熟熟的的的的分分分分类类类类系系系系统统统统。由由由由于于于于病病病病毒毒毒毒是是是是专专专专性性性性细细细细胞胞胞胞内内内内寄寄寄寄生生生生生生生生物物物物,所所所所以以以以最最最最早早早早是是是是以以以以病病病病毒毒毒毒与与与与宿宿宿宿主主主主的的的的相相相相互互互互关关关关系系系系来来来来进进进进行行行行分分分分类类类类与与与与命命命命名名名名的的的的,未未未未能能能能反反反反应应应应病病病病毒毒毒毒的的的的本本本本质质质质.19
45、61.1961.1961.1961年年年年LooperLooperLooperLooper建建建建议议议议,以以以以病病病病毒毒毒毒核核核核酸酸酸酸作作作作为为为为分类的首要标准分类的首要标准分类的首要标准分类的首要标准,从此病毒分类开始形成较合理的框价从此病毒分类开始形成较合理的框价从此病毒分类开始形成较合理的框价从此病毒分类开始形成较合理的框价.第二章 病毒二二 、分类的机构及标准、分类的机构及标准 1966196619661966年年年年 建建建建 立立立立 了了了了 国国国国 际际际际 病病病病 毒毒毒毒 命命命命 名名名名 委委委委 员员员员 会会会会(ICNV),1973(ICNV
46、),1973(ICNV),1973(ICNV),1973年年年年 更更更更 名名名名 为为为为 国国国国 际际际际 病病病病 毒毒毒毒 分分分分 类类类类 委委委委 员员员员 会会会会(ICTV),(ICTV),(ICTV),(ICTV),作作作作为为为为国国国国际际际际公公公公认认认认的的的的病病病病毒毒毒毒分分分分类类类类与与与与命命命命名名名名的的的的权权权权威威威威机机机机构构构构.第二章 病毒三、动物病毒分类的依据(一)病毒颗粒的特性(一)病毒颗粒的特性 包包包包括括括括:病病病病毒毒毒毒的的的的核核核核酸酸酸酸类类类类型型型型和和和和股股股股数数数数,即即即即指指指指DNADNAD
47、NADNA和和和和RNARNARNARNA病病病病毒毒毒毒是是是是双双双双链链链链核核核核酸酸酸酸还还还还是是是是单单单单链链链链核核核核酸酸酸酸;分分分分子子子子G+CG+CG+CG+C克克克克分分分分子子子子%;有有有有无无无无囊囊囊囊膜膜膜膜,有有有有囊囊囊囊膜膜膜膜结结结结构构构构的的的的病病病病毒毒毒毒对对对对乙乙乙乙醚醚醚醚等等等等有有有有机机机机溶溶溶溶剂剂剂剂的的的的敏敏敏敏感感感感性性性性;形形形形态态态态学学学学区区区区别别别别,即即即即形形形形状状状状、大大大大小小小小及及及及壳壳壳壳粒粒粒粒的的的的结结结结构构构构、排列和组成;病毒有无血凝素等表面结构。排列和组成;病毒
48、有无血凝素等表面结构。排列和组成;病毒有无血凝素等表面结构。排列和组成;病毒有无血凝素等表面结构。第二章 病毒(二)复制(二)复制 指指指指病病病病毒毒毒毒在在在在细细细细胞胞胞胞内内内内进进进进行行行行复复复复制制制制的的的的部部部部位位位位;能能能能否否否否形形形形成成成成包包包包涵体和包涵体出现的部位;病毒的释放方式等。涵体和包涵体出现的部位;病毒的释放方式等。涵体和包涵体出现的部位;病毒的释放方式等。涵体和包涵体出现的部位;病毒的释放方式等。(三)生物学方面(三)生物学方面 包括:宿主的范围和病毒的传播途径等。包括:宿主的范围和病毒的传播途径等。包括:宿主的范围和病毒的传播途径等。包括:宿主的范围和病毒的传播途径等。第二章 病毒四、分类的现状四、分类的现状 病病病病毒毒毒毒分分分分类类类类的的的的系系系系统统统统是是是是由由由由科科科科、属属属属、种种种种组组组组成成成成,有有有有的的的的还还还还分分分分亚亚亚亚科科科科、亚亚亚亚属属属属等等等等级级级级别别别别。根根根根据据据据ICTVICTVICTVICTV的的的的分分分分类类类类报报报报告告告告,目目目目前前前前可把所有已知病毒分为可把所有已知病毒分为可把所有已知病毒分为可把所有已知病毒分为233233233233个属个属个属个属.
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