医疗器械生物相容性试验方案.doc

医疗器械生物学试验方案

我公司委托贵检验中心对我公司的×××××××××××产品，按照下列方法进行生物相容性试验：
1.细胞毒性
（1）（显微镜观察法）
取××产品/部件，按 □0.1g/mL；□0.2g/mL；□1.25cm2/mL；□3cm2/mL；□6cm2/mL 的比例（浸提比例见样品制备方法说明），浸提介质为含血清培养基， (37±1)℃， (24±2) h制备试验液，取试验液按照GB/T16886.5-2017中8.2规定的浸提法进行。
细胞毒性分级不大于 □ 1；□ 2；□ 3；□4 （分级大于2时被认为有细胞毒性）
（2）浸提液试验（MTT法）
取××产品/部件，按 0.2g/mL 的比例，浸提介质为含血清培养基， (37±1)℃， (24±2) h制备试验液，取试验液按照GB/T16886.5-2017中附录C规定的浸提法进行。
细胞存活率应不小于70%。
（3）直接接触试验
取××产品/原液直接使用，按照GB/T16886.5-2017中8.3规定的直接接触法进行。(适用于液体，凝胶，单一材质的片状产品)
细胞毒性分级不大于 □ 1；□ 2；□ 3；□4 （分级大于2时被认为有细胞毒性）
（4）间接接触试验——琼脂扩散法
细胞毒性分级不大于 □ 1；□ 2；□ 3；□4 （分级大于2时被认为有细胞毒性）
2. 致敏试验
（1）取××产品/部件，按 0.2g/mL 的比例，浸提介质0.9%氯化钠注射液和植物油；(37±1)℃， (72±2) h制备试验液,按照GB/T16886.10-2017中7.5规定的最大剂量试验方法进行。
或者（2）××产品/部件，按照GB/T16886.10-2017中7.6规定的封闭贴敷试验方法进行。（适合于与正常皮肤接触的胶带、敷贴类，材料单一的产品）
或者（3）取××产品/部件，按 0.2g/mL 的比例，浸提介质为0.9%氯化钠注射液和植物油，(37±1)℃， (72±2) h制备试验液，按照GB/T16886.10-2017中7.6规定的的封闭贴敷试验方法进行。（适合于与正常皮肤接触的但不易进行直接贴敷的产品）
（应无致敏反应）
3. 皮内反应
（1）取××产品/部件，按 0.2g/mL 的比例，浸提介质分别为0.9%氯化钠注射液和植物油，(37±1)℃， (72±2) h制备试验液，取试验液按照GB/T16886.10-2017中6.4规定的试验方法进行。
或者（2）取××产品/原液直接使用，按照GB/T16886.10-2017中6.4规定的方法进行。（适用液体产品）
（样品组与对照组记分之差不大于1.0）
4. 皮肤刺激
（1）取××产品/部件，按 0.2g/mL 的比例，浸提介质为0.9%氯化钠注射液和植物油； (37±1)℃， (72±2) h制备试验液，取试验液按照GB/T16886.10-2017中6.3规定的□单次接触 □重复接触 试验方法进行。（多次接触需提供接触次数）
或者（2）取××产品/部件直接使用，按照GB/T16886.10-2017中6.3规定的□单次接触 □重复接触方法进行。（适用于直接接触皮肤的敷料，织物等片状产品以及液体，凝胶状态的产品，多次接触需提供接触次数）
（应为极轻微）
5. 黏膜刺激
（1）取××产品/部件，按 0.2g/mL 的比例，浸提介质分别为0.9%氯化钠注射液和植物油，(37±1)℃， (72±2) h制备试验液，取试验液按照GB/T16886.10-2017中□B.3口腔刺激 □B.5直肠刺激 □B.6阴道刺激 （建议单选）规定的试验方法进行。
或者（2）取××产品/原液直接使用，按照GB/T16886.10-2017中□B.3口腔刺激 □B.5直肠刺激 □B.6阴道刺激（建议单选）规定的方法进行。（适用液体产品）
（刺激指数不大于4。）
6. 急性全身毒性
取××产品/部件，按 0.2g/mL 的比例，浸提介质分别为0.9%氯化钠注射液和植物油，(37±1)℃， (72±2) h制备试验液，取试验液按照GB/T16886.11-2011规定的试验方法进行。
（应无急性全身毒性反应）
7. 血液相容性
7.1 溶血
取××产品/部件，按 5g 样品加入10mL0.9%氯化钠注射液的比例制备试验液，按照GB/T16886.4-2003规定的试验方法进行。
（溶血率应小于5%。）
7.2 凝血酶原时间（PT）试验
取与血液接触的主要部件，按GB/T16886.4-2003规定的试验方法进行。
（试验结果与参照品相比在统计学上应无显著性差异。）
7.3 部分凝血活酶时间（PTT）试验
取与血液接触的主要部件，按GB/T16886.4-2003规定的试验方法进行。
（试验结果与参照品相比在统计学上应无显著性差异。）
7. 4体外血栓形成试验
取与血液接触的主要部件，按GB/T16886.4-2003规定的试验方法进行。
（试验结果与参照品相比在统计学上应无显著性差异。）
7. 5血小板计数试验
取与血液接触的主要部件，按GB/T16886.4-2003规定的试验方法进行。
（试验结果与参照品相比在统计学上应无显著性差异。）
7. 6补体3a(C3a)激活试验

取与血液接触的主要部件，按GB/T16886.4-2003规定的试验方法进行。
（试验结果与参照品相比在统计学上应无显著性差异。）
7. 7血液学（白细胞和红细胞计数试验）
取与血液接触的主要部件，按GB/T16886.4-2003规定的试验方法进行。
（试验结果与参照品相比在统计学上应无显著性差异。）
8. 遗传毒性
8.1 细菌回复突变试验：
取××产品/部件，按 0.2g/mL 的比例，浸提介质分别为0.9%氯化钠注射液和（□二甲基亚砜； □棉籽油）。 (37±1)℃， (72±2) h制备试验液。取试验液按照GB/T16886.3-2008中规定的Ames试验方法进行。
（结果应为阴性）
8.2 体外哺乳动物细胞基因突变试验：
取××产品/部件，按 0.2g/mL 的比例，浸提介质分别为0.9%氯化钠注射液和（□二甲基亚砜； □含血清培养基）。 (37±1)℃， (72±2) h制备试验液；浸提介质为含血清培养基时，(37±1)℃， (48±2) h制备试验液。取试验液按照GB/T16886.3-2008中规定的小鼠淋巴瘤试验方法进行。
（结果应为阴性）
8.3 体外哺乳动物细胞染色体畸变试验：
取××产品/部件，按 0.2g/mL 的比例，浸提介质分别为09%氯化钠注射液和（□二甲基亚砜； □含血清培养基）。 (37±1)℃， (72±2) h制备试验液；浸提介质为含血清培养基时，(37±1)℃， (48±2) h制备试验液。取试验液按照GB/T16886.3-2008中规定的的染色体畸变试验方法进行。
（结果应为阴性）
（注：PVC、PC、PS、PES等材料不适合用二甲基亚砜等有机溶剂做为浸提介质）
9. 植入试验
取××××产品/部件，□肌肉，□皮下，□骨植入（植入部位选择，单选），□1周，□4周，□12周，□26周，□52周，□其他周期：（植入观察点选择，可多选），按照GB/T16886.6-2015中规定的试验方法进行。
（与阴性对照样品相比较，应为无刺激）
10. 亚急性全身毒性试验
（1）取××××产品/部件，按 0.2g/mL 的比例，浸提介质为0.9%氯化钠注射液，(37±1)℃，(72±2) h制备试验液，按照GB/T16886.11-2011中规定的试验方法进行，接触途径为□静脉注射；□皮下注射；□腹腔注射；□经口灌胃，给药剂量为10mL/kg大鼠体重/天，接触周期为□连续7天（静脉途径）；□连续28天（其他途径）；，对样品的亚急全身毒性进行评价。
或者（2）取××××部件/产品，按照GB/T16886.11-2011中规定的试验方法进行，接触途径为□肌肉，□皮下，□骨植入（植入部位选择，单选），接触剂量为×g/kg大鼠体重，接触周期为××天，对样品的亚急毒性进行评价。
（应无亚急性全身毒性反应）
11. 亚慢性全身毒性试验
（1）取××××产品/部件，按 0.2g/mL 的比例，浸提介质为0.9%氯化钠注射液，(37±1)℃，(72±2) h制备试验液，按照GB/T16886.11-2011中规定的试验方法进行，接触途径为□静脉注射；□皮下注射；□腹腔注射；□经口灌胃，给药剂量为10mL/kg大鼠体重/天，接触周期为□连续14天（静脉途径）；□连续28天（静脉途径）；□一周5天,连续90天（其他途径），对样品的亚慢全身毒性进行评价。
或者2）：取××××部件/产品，按照GB/T16886.11-2011中规定的试验方法进行，接触途径为□肌肉，□皮下，□骨植入（植入部位选择，单选），接触剂量为×g/kg大鼠体重，接触周期为 90天，对样品的亚慢毒性进行评价。
（应无亚慢性全身毒性反应）
12.热原
取××产品/部件，按 0.2g/mL 的比例，浸提介质为0.9%氯化钠注射液，(37±1)℃， (72±2) h制备试验液。取试验液按照《中华人民共和国药典》2015年版 四部 1142 热原检查法规定的试验方法进行。
（应无热原反应）

样品制备方法说明
根据产品特点和临床使用特性，推荐按照GB/T16886.12《医疗器械生物学评价 第12部分：样品制备与参照样品》的规定选择试验液制备方法，确定浸提介质（见表1）、比例（见表2）、温度和时间（见表3）。或依据常用操作并在论证的基础上提供一个标准化的方法，在多数情况下产品应使用适宜的加严条件。
若受试样品不适合用二甲基亚砜等有机溶剂做为浸提介质（如PVC、PC、PS、PES等），可采用其他浸提介质，如遗传毒性可改用细胞培养基等。
表1 浸提介质
性质
浸提介质
极性介质
生理盐水（常用）、无血清培养基、水
非极性介质
植物油（常用）

其他介质
乙醇/水、乙醇/生理盐水、聚乙二醇400、二甲基亚砜、含血清培养基（常用）

表2 浸提比例
厚度（mm）
比例
＜0.5
6cm2/mL
0.5-1.0
3cm2/mL
＞1.0
1.25cm2/mL
不规则形状
0.2g/mL
不规则形状多孔器械（低密度材料）
0.1g/mL
吸水材料
除吸收容量外0.1g/mL

表3 浸提条件
条件
备注
37±1℃,24±2h
该项条件仅推荐细胞毒使用
37±1℃,72±2h
常用
50±2℃,72±2h
三类及长期植入产品建议选择加严条件浸提。
70±2℃,24±2h
121±2℃,1±0.1h