1、单克隆抗体单克隆抗体一、单克隆抗体的概念单：单个细胞单：单个细胞克隆：复制，无性繁殖克隆：复制，无性繁殖抗体：抗体：化学性质单一、特异性强的与化学性质单一、特异性强的与抗原特异性结合的抗体抗原特异性结合的抗体思考1:抗体是怎样产生的？浆浆细细胞胞（效效应应B细细胞胞）产产生生抗抗体体思考2：常规提取抗体的办法？向动物体内反复注射某种抗原，使动物产向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。缺缺点点产量低，纯度低，特异性差。产量低，纯度低，特异性差。急需大量特异性抗体，怎么办？急需大量特异性抗体，怎么办？思考3：如何快速地获得大
2、量单一的抗体？浆浆细胞特点：一种浆细胞产生一种单一抗体，细胞特点：一种浆细胞产生一种单一抗体，B淋淋巴细胞在体外巴细胞在体外 (能能/不能不能)无限增殖。无限增殖。l要求：要求：单一单一 大量大量 癌细胞癌细胞 能否把两种细胞的优点集中在一种细胞上呢？能否把两种细胞的优点集中在一种细胞上呢？杂交细胞杂交细胞不能不能一种一种B淋巴细胞产生淋巴细胞产生能在体外无限增殖的细胞能在体外无限增殖的细胞科学家的汗水科学家的汗水1975年年.英国科学家科勒和米尔斯坦英国科学家科勒和米尔斯坦.将将B淋巴细胞淋巴细胞中产生抗体的基因通过特殊的技术转移到肿瘤细中产生抗体的基因通过特殊的技术转移到肿瘤细胞（骨髓瘤细
3、胞）内胞（骨髓瘤细胞）内.成功地获得了世界上第一株成功地获得了世界上第一株能稳定分泌单一抗体的杂交肿瘤的细胞株能稳定分泌单一抗体的杂交肿瘤的细胞株.1984年，他们获得了诺贝尔生理学或医学奖。年，他们获得了诺贝尔生理学或医学奖。B淋巴细胞淋巴细胞+骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞二、制备过程1、为什么给小鼠注射特定的抗、为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？原蛋白？2、会有几种融合方式？、会有几种融合方式？3、经过几次筛选？、经过几次筛选？4、杂交瘤细胞培养方式有哪、杂交瘤细胞培养方式有哪些？些？5、杂交瘤细胞的特点是什么？、杂交瘤细胞的特点是什么？获得产生相应抗体的获得产生相应抗体的B淋巴
4、细胞淋巴细胞BB、B瘤、瘤瘤瘤、瘤瘤（B、瘤、瘤没发生融合的细胞）没发生融合的细胞）两次：一选杂交瘤细胞两次：一选杂交瘤细胞 二选能产生特异性抗体二选能产生特异性抗体 的杂交瘤细胞群的杂交瘤细胞群（1）体外培养）体外培养（2）小鼠腹腔内培养）小鼠腹腔内培养既能产生特异性抗体，既能产生特异性抗体，又能体外大量增殖又能体外大量增殖概括单克隆抗体制备过程概括单克隆抗体制备过程理论基础理论基础：一、细胞膜的流动性一、细胞膜的流动性二、细胞增殖二、细胞增殖三、单克隆抗体的应用l单克隆抗体优点：单克隆抗体优点：、并并可可大量制备。大量制备。特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高(1)作为诊断试剂，具有准确、
5、作为诊断试剂，具有准确、简、简易、易、的优点。的优点。(2)用于治疗疾病和用于治疗疾病和 。l应用应用高效高效快速快速运载药物运载药物如：单抗诊断盒，利用同位素示踪技术，诊断疾病如：单抗诊断盒，利用同位素示踪技术，诊断疾病“生物导弹生物导弹”单克隆抗体药物放射性同位素单克隆抗体药物放射性同位素 优点：疗效高、毒副作用小。优点：疗效高、毒副作用小。1单克隆抗体是由下列哪种细胞产生（）A.B淋巴细胞 BT淋巴细胞 C骨髓瘤细胞 D杂交瘤细胞D2.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。诱导融合后，要用特定培养
6、基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活增殖的细胞是在这种培养基上不能存活增殖的细胞是()B淋巴细胞淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞A B C DA3.“生物导弹生物导弹”是指（是指（）A.单克隆抗体单克隆抗体 B.杂交瘤细胞杂交瘤细胞C.产生特定抗体的产生特定抗体的B淋巴细胞淋巴细胞 D.在单抗上连接抗癌药物在单抗上连接抗癌药物 DABCD4.（多选）1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制备有关的是A.效应B细胞 BT淋巴细胞C.骨髓
7、瘤细胞 D杂交瘤细胞5（多选）下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙（多选）下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，正确的是述中，正确的是（）A.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不需要灭淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不需要灭 活的仙台病毒或聚乙二醇诱导活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B.融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体生单克隆抗体C.体外培养时，一个效应体外培养时，一个效应B淋巴细胞可以产生抗体，淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖但不能无限增殖D.单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，
8、优越性明显高，优越性明显BCD6.下图是单克隆抗体制备过程示意图，据图回答：（1）图中A过程是从小鼠的脾脏中取得_细胞，该细胞能够产生_。从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_ 类物质。（2）B过程是一个_过程，该过程的进行需要灭活的_或_的诱导。（3）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_。（4）此过程包括_和_ 技术。分别根据的原理是_ 和_。效应效应B 抗体抗体 仙台病毒仙台病毒 细胞融合细胞融合 聚乙二醇聚乙二醇 抗原抗原 特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高动物细胞融合动物细胞融合 动物细胞培养动物细胞培养细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞增殖细胞增殖一、单克隆抗体概念二、制备过程（重点）三、单克隆抗体的应用一种新细胞杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性强，灵敏度高主主干干知知识识认认识识两两“一一”
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