222-动物细胞融合与单体克隆抗体-高中生物人教版选修3-现代生物科技专题7789ppt-PPT课件.pptx

人绒毛膜促性腺激素人绒毛膜促性腺激素相对应的抗体相对应的抗体2.2.2单克隆抗体单克隆抗体学习目标：学习目标：1 1、理解和掌握单克隆抗体的制备过程、理解和掌握单克隆抗体的制备过程2 2、关注单克隆抗体的应用前景、关注单克隆抗体的应用前景学习重点、难点：学习重点、难点：单克隆抗体的制备过程单克隆抗体的制备过程抗原抗原抗原抗原吞噬吞噬吞噬吞噬细胞细胞细胞细胞T T细胞细胞细胞细胞B B细胞细胞细胞细胞记忆记忆记忆记忆B B细胞细胞细胞细胞浆细胞浆细胞浆细胞浆细胞（效应（效应（效应（效应B B细胞）细胞）细胞）细胞）抗体抗体抗体抗体摄取摄取摄取摄取传递传递传递传递淋巴因淋巴因淋巴因淋巴因子子子子增增增增殖殖殖殖分分分分化化化化分泌分泌分泌分泌二次免疫二次免疫二次免疫二次免疫少数少数少数少数一、知识链接：抗体的产生一、知识链接：抗体的产生传统抗体（血清抗体）：传统抗体（血清抗体）：产量低、纯度低、特异性差产量低、纯度低、特异性差 每个淋巴细胞只能分泌一种抗体，由一个淋巴细每个淋巴细胞只能分泌一种抗体，由一个淋巴细胞增殖产生的细胞群分泌的抗体化学成份是单一的。胞增殖产生的细胞群分泌的抗体化学成份是单一的。设计方案：设计方案：一个一个B B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 （体外培养不能无限增殖）（体外培养不能无限增殖）骨髓瘤细胞能无限增殖骨髓瘤细胞能无限增殖杂交细胞杂交细胞二、单克隆抗体的制备二、单克隆抗体的制备动动物物细细胞胞融融合合单克隆抗体的制备过程单克隆抗体的制备过程 阅读课本阅读课本阅读课本阅读课本53-5453-54页上面两段思考：页上面两段思考：页上面两段思考：页上面两段思考：1 1）在从小鼠体内取）在从小鼠体内取）在从小鼠体内取）在从小鼠体内取B B淋巴细胞前应对小鼠作何种处理？淋巴细胞前应对小鼠作何种处理？淋巴细胞前应对小鼠作何种处理？淋巴细胞前应对小鼠作何种处理？为什么要这样处理？为什么要这样处理？为什么要这样处理？为什么要这样处理？2 2）从小鼠何处获取）从小鼠何处获取）从小鼠何处获取）从小鼠何处获取B B淋巴细胞？淋巴细胞？淋巴细胞？淋巴细胞？3 3）培养液中融合细胞有几种类型？一共有几种类型？）培养液中融合细胞有几种类型？一共有几种类型？）培养液中融合细胞有几种类型？一共有几种类型？）培养液中融合细胞有几种类型？一共有几种类型？4 4）由特定的）由特定的）由特定的）由特定的B B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合成的淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合成的淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合成的淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合成的杂交杂交杂交杂交 瘤细胞瘤细胞瘤细胞瘤细胞具有什么特点？具有什么特点？具有什么特点？具有什么特点？5 5）图图图图224224224224中，共有几次筛选？筛选的目的分别是什么中，共有几次筛选？筛选的目的分别是什么中，共有几次筛选？筛选的目的分别是什么中，共有几次筛选？筛选的目的分别是什么？B B淋巴细胞淋巴细胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋白融合融合多种多种杂交细胞杂交细胞在具有筛选作用的培养基上培养在具有筛选作用的培养基上培养专一抗体检验阳性专一抗体检验阳性克隆上述杂交细胞克隆上述杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆分开不同杂交细胞，克隆专一抗体检验阳性细胞专一抗体检验阳性细胞单克隆抗体单克隆抗体注射到小鼠体内注射到小鼠体内体外培养体外培养第第第第1 1 1 1次筛选目的：得到杂次筛选目的：得到杂次筛选目的：得到杂次筛选目的：得到杂交瘤细胞（多种）。交瘤细胞（多种）。交瘤细胞（多种）。交瘤细胞（多种）。第第第第2 2 2 2次筛选目的：在杂交次筛选目的：在杂交次筛选目的：在杂交次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所瘤细胞中筛选出能产生所瘤细胞中筛选出能产生所瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。需抗体的杂交瘤细胞。需抗体的杂交瘤细胞。需抗体的杂交瘤细胞。特异性强，灵敏度高，特异性强，灵敏度高，可大量制备可大量制备培养骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞单克隆抗体单克隆抗体1 1、“单单”2 2、“克隆克隆”英文英文“clone”clone”音译，指音译，指无性繁殖无性繁殖的方法产生出的方法产生出DNADNA分子、细胞或个体的过程。在细胞水平指分子、细胞或个体的过程。在细胞水平指细胞培养细胞培养.单个单个三、单克隆抗体的应用：三、单克隆抗体的应用：作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与之特异性结合之特异性结合 优点：优点：准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速用于用于运载药物：制成运载药物：制成“生物导弹生物导弹”治疗疾病：主要用于癌症治疗治疗疾病：主要用于癌症治疗单克隆抗体单克隆抗体+化学药物（或细胞毒素等）化学药物（或细胞毒素等）“瞄准装置瞄准装置”导向作用导向作用1 1、单克隆抗体制备过程、单克隆抗体制备过程B B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞诱导诱导融合融合B-BB-B细胞细胞B-B-瘤细胞瘤细胞瘤瘤-瘤细胞瘤细胞选择培养基选择培养基杂交瘤细胞杂交瘤细胞（B-B-瘤细胞）瘤细胞）克隆化培养克隆化培养抗体检测抗体检测产生所需产生所需抗体的杂抗体的杂交瘤细胞交瘤细胞体外培养体外培养小鼠腹腔内增殖小鼠腹腔内增殖单克隆抗体单克隆抗体课堂小结：课堂小结：2 2、单克隆抗体的应用、单克隆抗体的应用作为诊断试剂；作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物。用于治疗疾病和运载药物。随堂练习：随堂练习：1 1、下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（、下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（）A.A.生物导弹是用癌细胞的单克隆抗体杀死癌细胞生物导弹是用癌细胞的单克隆抗体杀死癌细胞 B.B.动物细胞培养的基础是细胞具有全能性动物细胞培养的基础是细胞具有全能性 C.C.细胞融合是利用了细胞膜的结构特点细胞融合是利用了细胞膜的结构特点 D.D.制备单克隆抗体的第二次筛选是选出杂交瘤细胞制备单克隆抗体的第二次筛选是选出杂交瘤细胞C CB B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔A AC C 2 2、右图为某同学根据杂交瘤技术、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案体的实验方案制备单克隆抗体制备单克隆抗体不能，没有将抗原注入小鼠体内，无法不能，没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的获得产生单一抗体的B B淋巴细胞。淋巴细胞。(1).(1).该实验方案的目的是：该实验方案的目的是：_(2).(2).该方案能达到预期效果该方案能达到预期效果吗？为什么？吗？为什么？随堂练习：随堂练习：B B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔A AC C (3)A(3)A是从小鼠的脾脏中取是从小鼠的脾脏中取的的_ _，该细胞，该细胞能够产生能够产生_ _。(4)(4)图中图中B B为为_过程，过程，常用常用_作为诱导剂，该细胞继承作为诱导剂，该细胞继承_的遗传特性，的遗传特性，既能既能_ ,_ ,又能又能_。B B淋巴细胞淋巴细胞抗体抗体细胞融合细胞融合灭活的病毒灭活的病毒双亲细胞双亲细胞迅速大量繁殖迅速大量繁殖产生专一的抗体产生专一的抗体随堂练习：随堂练习：