不同品种花椒药效比较研究.doc

不同品种花椒药效比较研究
李惠勇 刘友平 李旻 张玲 范婧娴
（成都中医药大学，成都，610075）
摘要 目的：比较花椒和青椒的主要药效作用。方法：采用番泻叶致小鼠急性腹泻实验观察花椒的抗腹泻作用；采用小鼠扭体法实验观察其镇痛作用；采用炭末推进法观察其对正常小鼠小肠运动的影响。结果：对番泻叶致小鼠急性腹泻，花椒、青椒均有显著的抗腹泻作用且花椒较青椒作用强；对醋酸所致疼痛，花椒有显著的镇痛作用，青椒镇痛作用不明显。花椒和青椒均能抑制正常小鼠的小肠推进运动，且花椒作用明显强于青椒。结论：花椒和青椒均有明显的抗腹泻、抑制小鼠小肠推进运动作用且花椒作用较强；花椒有明显的镇痛作用，青椒镇痛作用不明显。
关键词 花椒；青椒；抗腹泻；镇痛；小肠推进
Study on efficacy of different varieties of Chinese prickly ash
LI Hui-yong, LIU You-ping, LI Ming, ZHANG Ling, FAN Jing-xian
(Chengdu University of TCM, chengdu 610075, China)
Abstract: Object: To compare the main efficacy of zanthoxylum bungeanum maxim and z. schinifolium sieb.et zucc. Methods: Senna is used to mice to acute diarrhea Chinese prickly ash experimental observation of the anti-diarrhea; writhing in mice by using experimental observation of its analgesic effect at the end of promoting the use of carbon observed in normal mice on the impact of small bowel movement. Results: Senna on the mouse caused by acute diarrhoea, zanthoxylum bungeanum maxim and z. schinifolium sieb.et zucc have significant role in the anti-diarrhea and zanthoxylum bungeanum maxim stronger role than z. schinifolium sieb.et zucc; the pain caused by acetic acid,the two have significant analgesic effect, z. schinifolium sieb.et zucc and analgesic effects is not obvious. Zanthoxylum bungeanum maxim and z. schinifolium sieb.et zucc. in normal mice could inhibit the movement promoting the small intestine, and the front effect is stronger than the latter. Conclusion: Zanthoxylum bungeanum maxim and z.schinifolium sieb.et zucc are obviously anti-diarrhea, intestinal inhibited mice and pepper role in promoting the movement stronger role; the front has clear analgesic effect, the latter analgesic effect was not obvious.
Key words: Zanthoxylum bungeanum maxim, z.schinifolium sieb.et zucc anti-diarrhea; analgesia; intestinal propulsion
花椒为芸香科花椒属植物花椒（Zanthoxylum Bungeanum Maxim）和青椒（Z. Schinifolium Sieb.et Zucc.）的干燥成熟果皮[1]，是常用的温里药。花椒入药最早见于《神农本草经》，认为花椒可以“坚齿发”、“耐老”、“增年”。现收载于《中国药典》2005年版一部中，功效为“温中止痛、杀虫止痒”。临床用于治疗积食停饮、心腹冷痛、咳嗽气逆、风寒湿弊、呕吐、泄泻、痢疾、齿痛、蛔虫痛、阴痒等症。
近年来对花椒和青椒的研究多集中在化学成分方面，对花椒和青椒的药效作用的基础研究较少。熊泉波等[2]研究表明不同品种花椒的生物碱、酰胺类和挥发油等成分之间有较大差异，药理实验显示不同种有不同的镇痛作用。多基原中药是否等质，是中药材标准化的前提。本实验根据花椒“温中止痛、杀虫止痒”的传统功效，就花椒和青椒对胃肠道及镇痛作用进行了比较研究。
1材料
1.1试验药物 花椒药材由作者于2007年10月采自四川汉源县清溪镇，青椒药材于2007年12月购于四川金阳县，分别经成都中医药大学生药教研室陈新教授鉴定为芸香科植物花椒（Zanthoxylum Bungeanum Maxim）和青椒（Z. Schinifolium Sieb.et Zucc.）的干燥成熟果皮。花椒、青椒药材采用煎煮法分别制成生药含量1g/ml药液，4℃冰箱保存备用，实验时按给药剂量配制成不同浓度。番泻叶药材购于成都中医药大学附属医院药房，经鉴定为狭叶番泻叶Cassia Angustifolia Vahl。取番泻叶适量，加入沸蒸馏水研和，研磨均匀后再加入蒸馏水配制成10%的番泻叶混悬液备用[5]。阿司匹林肠溶片，亚宝药业太原制药有限公司，批号：070506。硫酸阿托品注射液，规格：一支0.5mg/ml，芜湖康奇制药有限公司，批号：070405。泻立停，哈药集团制药六厂，批号：070566
1.2动物：小鼠，昆明种，清洁级，体重18～22g，雌雄各半，由成都中医药大学实验动物研究中心提供。动物质量合格证号：SCXK(川)2004-11。
1.3方法
1.3.1花椒和青椒对番泻叶引起小鼠腹泻的影响
取小鼠60只，雌雄各半，体重(18~22) g，随机分为6组，各组均为单次灌胃给药，每组10只。除第六组隔天一次灌胃0.25g/kg泻立停作为阳性药物对照组，分别灌胃花椒和青椒两种剂量水煎液（5g/kg，10g/kg）为给药组，空白对照组灌同体积蒸馏水，每日一次，连续5日，与末次给药1h后除了空白对照组外，其他各组分别灌胃番泻叶混悬液0.2ml/10g，给药后每只小鼠单笼观察，笼下铺置吸水滤纸作腹泻计数，每隔1h换滤纸并计数小鼠腹泻次数，共观察5h，以稀便率为观察指标。稀便率：每只动物排稀便数与总便数之比。
1.3.2花椒和青椒对醋酸引起小鼠扭体反应的影响
取小鼠60只，雌雄各半，体重(18~22g) g，随机分为6组，每组10只。除第六组隔天一次灌胃0.5g/kg阿司匹林作为阳性药物对照组，分别灌胃花椒和青椒两种剂量水煎液（5g/kg，10g/kg）为给药组，空白对照组灌胃同体积蒸馏水，每日一次，连续5日，于末次给药1小时后腹腔注射0.6%醋酸溶液（新鲜配制）0.2ml/只，记录各组的潜伏期以及腹腔注射0.6%醋酸后15分钟内的小鼠扭体次数，计算抑制率。
1.3.3花椒和青椒对正常小鼠肠道推进的影响
取小鼠60只雌雄各半，体重(18~22) g，随机分为6组，每组10只，除第六组隔天一次皮下注射硫酸阿托品5mg/kg作为阳性药物对照组，分别灌胃花椒和青椒两种剂量水煎液（5g/kg，10g/kg）为给药组，空白对照组灌胃同体积蒸馏水，每日一次，连续5日，并于末次给药前将小鼠禁食不禁水12h，灌胃给药组40分钟后灌胃5%炭末与阿拉伯胶混悬液0. 1m1/10g，阳性对照组皮下注射10分钟后灌胃5%炭末与阿拉伯胶混悬液0.1ml/10g。20分钟后脱颈椎处死，打开腹腔分离肠系膜，剪取上起幽门，下至回盲部的肠管，置于托盘中，轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度作为“小肠总长度”（B），从幽门至墨汁前沿的距离作为炭末在肠内推动距离”(A)，A/B即为胃肠推进率(%)。
2. 统计学方法：应用SPSS12.0对数据进行统计分析，计量资料以平均值±标准差（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，检验水准a=0.05。
3. 结果
3.1花椒和青椒对番泻叶引起小鼠腹泻的影响，结果见表1。
表1 花椒和青椒对番泻叶致小鼠腹泻的影响（±s）
Tab 1 Two type of Chinese prickly ash effect on mice on the impact of diarrhea caused by senna（±s）

Group
mice number
dose（g/kg
loose stools rate（%）
blank group
10

68.8±3.6
zanthoxylum bungeanum maxim
10
5
53.5±8.8**△ △
zanthoxylum bungeanum maxim
10
10
44.6±6.6**△ △
z. schinifolium sieb.et zucc
10
5
61.6±5.8**
z. schinifolium sieb.et zucc
10
10
59.6±4.8**
xieliting
10
0.25
39.1±5.9**
注：与空白组比较*P<0.05，**P<0.01；与同剂量青椒组比较△P<0.05, △△P<0.01（下同）
由表1数据可知，花椒青椒四个给药组与空白给药组比较，稀便率的差异均有统计学意义（P<0.01）；即四个给药组的稀便率均小于模型组；花椒青椒相同剂量组间的稀便率的差异有统计学意义（P<0.01），即花椒同剂量组的稀便率均小于青椒组。结果提示，花椒青椒均有一定的抗腹泻作用且花椒较青椒作用强。
3.2花椒和青椒对醋酸引起小鼠扭体反应的影响
表2花椒和青椒对醋酸引起小鼠扭体反应的影响（±s）
Tab 2 Two type of Chinese prickly ash effect on acetic acid in mice writhing reaction

group
mice( number)
dose（g/kg）
latency（min）
writhing (times)
blank
10

3.14±1.07
51.41±7.55
zanthoxylum bungeanum maxim
10
5
4.82±2.04* * △
40.42±8.30* * △
zanthoxylum bungeanum maxim
10
10
5.11±3.21* * △
38.31±8.43* * △ △
z. schinifolium sieb.et zucc
10
5
3.22±1.96
48.50±7.44
z. schinifolium sieb.et zucc
10
10
3.27±2.15
48.4±7.54
aspirin
10
0.5
7.88±2.54* *
21.3±7.96* *

从表2数据可知，与空白对照组比较，花椒两个剂量组的潜伏期和扭体反应次数的差异均有统计学差异（P<0.01），两个花椒剂量组亦具有显著镇痛作用，可显著延长小鼠发生扭体反应的潜伏期和显著减少小鼠15min内扭体反应的次数；青椒两个剂量组的潜伏期和扭体反应次数均没有统计学差异（P>0.05），说明青椒的镇痛作用不明显；花椒青椒相同剂量组间的潜伏期和扭体反应次数的差异有统计学意义（P<0.05），即花椒同剂量组的潜伏期大于青椒组，扭体反应次数小于青椒组。结果提示，花椒有显著的镇痛作用，而青椒镇痛作用并不明显。
3.3花椒和青椒对正常小鼠肠道推进的影响
表3花椒和青椒对正常小鼠肠道推进的影响（±s）
Tab 3 Two type of Chinese prickly ash effect on intestinal transit ratio
group
mice( number)
dose（g/kg）
intestinal transit ratio (%)
blank
10

61.0±2.73
zanthoxylum bungeanum maxim
10
5
51.5±2.05**△△
zanthoxylum bungeanum maxim
10
10
50.8±3.69**△△
z. schinifolium sieb.et zucc
10
5
57.0±3.62*
z. schinifolium sieb.et zucc
10
10
58.0±3.42*
atropine sulfate
10
0.005
29.0±3.16**

从表3数据可知，与空白对照组比较，花椒两个剂量组的推进率的差异均有统计学差异(P<0.01)，花椒两个剂量组均能显著抑制正常小鼠的小肠推进运动；
青椒两个剂量组的推进率的差异均有统计学差异(P<0.05)，青椒两个剂量组均有一定抑制正常小鼠的小肠推进运动的作用；花椒青椒相同剂量组间的推进率的差异有统计学意义（P<0.01），即花椒相同剂量组间的推进率均小于青椒组，提示相同剂量下花椒抑制正常小鼠的小肠推进运动作用强于青椒。
4 讨论
4.1本实验采用番泻叶致小鼠急性腹泻实验，对花椒和青椒的止泻作用进行了研究，结果显示花椒青椒均有显著的抗腹泻作用，这与传统的中医理论认为花椒有温中止泻功效相吻合；采用醋酸扭体实验法对花椒和青椒的镇痛作用进行研究，结果显示花椒有镇痛作用，青椒镇痛作用较弱正常小鼠小肠推进实验表明花椒和青椒均能抑制正常小鼠的小肠推进运动，且花椒作用明显强于青椒。
4.2花椒果皮含有复杂的活性成分如挥发油、生物碱、酰胺等，且不同品种花椒的成分差异很大。本实验对《中国药典》2005版一部列于同一项的花椒和青椒对番泻叶致小鼠腹泻以及对小鼠小肠运动的影响及镇痛作用进行研究，结果表明花椒和青椒主要功效作用相差较大。因而对于两基原品种的花椒的品种整理、活性成分探索等，有待进一步深入研究。
参考文献
[1] Ch．P(2005) VolⅠ（中国药典2005年版．一部）［S］．2005:110
[2]XIONG QB. The research on Chinese medicines commonly used variety and quality of finishing(south edition). Fuzhou: Fujian Science and Technology Publishing Press 2001:532～593
[3]ZHANG MF. Pharmacological Studies on Warming the Channels to Stop pain and Warming the Middle-jiao to Stop Diarrhea of Chinese prickly ash[J]. Chinese medicinal materials .1994,17(2):37～40
[4] ZHANG MF. Pharmacological Studies on Anti deficiency-cold in Spleen and Stomach of Chinese prickly ash[J]. Chinese medicine pharmacological and clinical, 1994,2(2):37～39
[5]CHEN QI. Methodological Study of Chinese Herbs phamiacology. Beijing: People's Health Press. 1993，436