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温和条件下美拉德反应产生香味物质的组成.doc

1、实验步骤 主要工作 所需试验材料 所需试验设备及条件 实验结论 样品的制备 将化学当量相同的羰基化合物和氨基酸溶于乙醇溶液(12%)中体积浓度为20mmol/L,然后用H3PO4(1/3)和NaOH(1M)将pH调节到3.5后,将溶液遮光保存于25℃。监测这混合物四周来的香气变化情况。 氨基酸(精氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、丝氨酸、丙氨酸、γ-氨基丁酸和谷氨酸) 羰基化合物(乙二醛、乙偶姻、2,3-戊二酮、二乙酰基、甲基乙二醛和羟基丙酮) 鉴定物质(烷基吡嗪、烷基噻唑、2-乙酰基噻唑、2-乙酰基-2-噻唑啉、三甲基恶唑

2、和乙醛) NaOH、H3PO4 乙醇、 遮光、25℃ 1、反应混合液中关键香味物质的检测和反应产物的鉴定。 α-羟基酮类化合物和大多数氨基酸混合液,反应时间内,混合物中香气几乎不变,很少有带气味的化合物形成。但与缬氨酸(2-甲基丙醛、奶酪香气)、蛋氨酸(甲烷、二甲基二硫醚、甲硫醚、土豆和洋白菜香气)、半光氨酸(硫化氢、甲烷、臭鸡蛋香气)反应的香韵有所不同。2-甲基丁醛和3-甲基丁醛分别从亮氨酸、异亮氨酸从鉴定出来。 氨基酸和α-二羰基化合物反应时,含硫氨基酸存在的情况下变化有趣。由于其他氨基酸参与,反应中包括缬氨酸(奶酪香气)、亮氨酸(戊基)、异亮氨酸(水果香气)和苯丙氨酸(花香)

3、鉴定出的物质有乙醛(Strecker反应)、2-甲基丙醛(缬氨酸)、2-甲基丁醛(亮氨酸)、3-甲基丁醛(异亮氨酸)、苯乙醛(苯丙氨酸)。苯丙氨酸存在还会产生少量苯甲醛,Strecker反应容易产生吡嗪的前体——活泼的α-氨基酮。 所有蛋氨酸参与的反应都会释放不同强度的土豆和洋白菜香气,土豆香气主要是与methional有关,同时也鉴定出了甲硫醇和二甲基二硫醚。半胱氨酸参与反应时,香气较为复杂。头几个小时时,由于甲基乙二醛存在,具有强烈的爆米花香和烤香、大约四周后香气逐渐变成烤榛子香气。2,3-戊二酮具有强烈的硫磺和猫味、一周后变成烤面包香。二羰基和乙二醛的反应具有硫磺味香气,然后会演变成

4、烤面包香气。 半胱氨酸和蛋氨酸两种含硫氨基酸参与反应,半胱氨酸生成的物质种类繁多,而蛋氨酸则较少,原因是半胱氨酸除了发生Strecker反应外,还可以发生去碳酸基反应,释放硫化氢和希夫碱。 2、基于pH的模型反应中三种羰基化合物和半胱氨酸降解的动力学研究。 针对在各种羰基化合物存在的情况下,半胱氨酸分贝在pH为3.5和8时的分解速率进行研究发现,pH=8时,半胱氨酸的分解速率大于pH=3.5时,尤其是在甲基乙二醛和二乙酰基存在的情况下。而在乙偶姻存在时,特别是在pH=3.5时,半胱氨酸的分解速率相对要慢。并且在两种pH条件下,和甲基乙二醛存在的情况下,两种反应物的颜色和香味都是不同的。在

5、pH=3.5时,溶液释放爆米花香气和烤榛子香气,产物呈黄棕色。pH=8时,产物呈黄色,具有臭鸡蛋、洋白菜、和烤肉的香气。从反应产物方面分析,pH=3.5时,2-乙酰基噻唑和2-乙酰基-2-噻唑啉的含量较高,这说明酸性的酒中易产生这两种物质。 另外,对低浓度(2mM)的甲基乙二醛和半胱氨酸 在10℃和25℃时的反应结果对比,这个模型反应被选为在pH=3.5条件下的反应速度和2-乙酰基噻唑及其中间体的感官重要性。在25℃时,半胱氨酸降解速率较大,10min后,2-乙酰基-2-噻唑啉呈现了中间体反应的特征曲线,60min后达到了最大值,这物质是有连续不断产生的2-乙酰基噻唑氧化而成。在10℃时,

6、反应速度较慢,至到180min2-乙酰基-2-噻唑啉才达到最大生成量,2-乙酰基噻唑的生成也推迟了。 仪器分析 1、GC/FPD 2、GC/NPD 3、GC/FID 4、GC/MS 5、HPLC GC/FPD: HP、Carbowax CW20M(50m×0.25mm,0.25μm) GC/NPD: HP、HP5(60m×0.32mm,0.12μm) GC/FID: HP、HP5(60m×0.32mm,0.12μm) GC/MS: HP、BP21(SGE)(50m×0.25mm,0.25μm) HPLC: HP1050 GC/FPD: HP、Carbowax CW20M(50m×0.25mm,0.25μm) GC/NPD: HP、HP5(60m×0.32mm,0.12μm) GC/FID: HP、HP5(60m×0.32mm,0.12μm) GC/MS: HP、BP21(SGE)(50m×0.25mm,0.25μm) HPLC: HP1050 温和条件下美拉德反应生成香味物质的组成

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