戊肝病毒与戊型肝炎.pptx

戊肝病毒与戊型肝炎戊肝病毒与戊型肝炎 WHO IS HE?HEHepatitis E戊型肝炎的认识过程戊型肝炎的认识过程1955.12-1956.1,1955.12-1956.1,世界上首次有记载的肠道传播世界上首次有记载的肠道传播-非甲非乙型肝非甲非乙型肝炎炎(ET-NANBH)(ET-NANBH)发生于印度新德里；发生于印度新德里；19831983年前苏联学者年前苏联学者BalayanBalayan应用免疫电镜技术应用免疫电镜技术(IEM)(IEM)首先在感染首先在感染志愿者和猕猴粪便中发现病毒样颗粒志愿者和猕猴粪便中发现病毒样颗粒(VLPs)(VLPs)；19881988年本病命名为戊型肝炎年本病命名为戊型肝炎(Hepatitis E,HE)(Hepatitis E,HE)；19891989年年美国学者美国学者ReyesReyes等克隆到病毒基因组，同年在东京国际肝等克隆到病毒基因组，同年在东京国际肝炎会议上正式被命名为戊型肝炎病毒炎会议上正式被命名为戊型肝炎病毒 (Hepatitis E Virus(Hepatitis E Virus，HEV)HEV)。戊型肝炎病毒戊型肝炎病毒 -HEV-HEVHEVHEV为直径为直径272738nm38nm的无包膜球形颗粒，的无包膜球形颗粒，基因组为单正链基因组为单正链RNARNA；HEVHEV有三个有三个ORF:ORF1ORF:ORF1约约5kb5kb，编码非结构，编码非结构蛋白蛋白；ORF2ORF2约约2.4kb2.4kb，编码主要结构蛋白，编码主要结构蛋白，组成病毒衣壳；组成病毒衣壳；ORF3ORF3编码一个磷酸化蛋编码一个磷酸化蛋白，其功能尚不清楚。白，其功能尚不清楚。HEVHEV归于归于HEVHEV样病毒属，其序列与风疹病样病毒属，其序列与风疹病毒和甜菜坏死黄叶脉病毒最为相近。毒和甜菜坏死黄叶脉病毒最为相近。HEV病毒颗粒病毒颗粒基因型基因型群群HEVHEV病毒株病毒株1缅缅甸甸、中中国国、巴巴基基斯斯坦坦、尼尼泊泊尔尔、埃埃及及、印印度度、巴巴塞塞罗罗那那、摩摩洛哥、乌兹别克斯坦、吉尔吉斯、乍得、日本洛哥、乌兹别克斯坦、吉尔吉斯、乍得、日本2墨西哥、尼日利亚墨西哥、尼日利亚3美国、日本，美国、日本、荷兰美国、日本，美国、日本、荷兰4意大利意大利5西班牙、希腊，荷兰西班牙、希腊，荷兰6希腊、英国希腊、英国7阿根廷、奥地利阿根廷、奥地利8中国中国9中国中国HEVHEV的基因分型的基因分型HEVHEV的基因分型的基因分型戊型肝炎的全球流行情况戊型肝炎的全球流行情况高度流行区：高度流行区：印度、尼泊尔、巴基斯坦和缅甸等；印度、尼泊尔、巴基斯坦和缅甸等；地方性流行区：地方性流行区：中国、俄罗斯、印尼和墨西哥等；中国、俄罗斯、印尼和墨西哥等；低度流行区：低度流行区：沙特阿拉伯和南非等；沙特阿拉伯和南非等；散发地区：散发地区：欧洲、英国和美国等。欧洲、英国和美国等。全球万例以上的戊肝暴发全球万例以上的戊肝暴发年份年份国家国家.城市城市病例病例(万万)孕妇病死率孕妇病死率(%)195556印度印度.新德里新德里2.910.5195556前苏联前苏联.吉尔吉斯共和国吉尔吉斯共和国1.118.0197374尼泊尔尼泊尔.加德满都山峡加德满都山峡1.02025197677缅甸缅甸.曼德勒市曼德勒市2.018.0197882印度印度.克什米尔克什米尔5.2NA198182尼泊尔尼泊尔.加德满都山峡加德满都山峡1.22025198688中国中国.新疆新疆12.0NA198889索马里索马里.谢贝利河下游谢贝利河下游11417.01991印度印度.坎普尔坎普尔7.9NA近年各地戊肝爆发情况近年各地戊肝爆发情况时间时间地点地点患病人数（已知死亡人数）患病人数（已知死亡人数）2006年年7至至10月月刚果刚果 341（13）2006年年5月月尼泊尔尼泊尔 30002005年年8月月乍得乍得 502005年年3月月印度印度 4002005年年1月月印度印度 500(10)2004年年6至至8月月乍得乍得672（21）2004年年5至至7月月苏丹苏丹625（22）2004年年3月月伊拉克伊拉克1002004年年4月月印度印度 800戊型肝炎的国内流行情况戊型肝炎的国内流行情况1982年起即有报道；年起即有报道；1986-88年间新疆南部大流行是迄今年间新疆南部大流行是迄今世界上最大的一次流行。世界上最大的一次流行。国内发生的戊肝暴发国内发生的戊肝暴发时间时间地点地点罹患率罹患率病死率病死率(%)(%)可能原因可能原因1986.9-1988.41986.9-1988.4新疆南部三地州新疆南部三地州119280/4029729 119280/4029729（2.96%2.96%）0.60.6水源污染水源污染1993.2.18-3.101993.2.18-3.10北京市丰台区某工厂北京市丰台区某工厂11/107 11/107（10.3%)10.3%)NANA不洁饮食不洁饮食1994.4.27-5.151994.4.27-5.15天津某部队学院天津某部队学院24/379 24/379（6.87%)6.87%)NANA不洁饮食不洁饮食1995.2.3-3.151995.2.3-3.15长春市南关区某单位长春市南关区某单位11/92 11/92（12.0%12.0%）9.19.1不洁饮食不洁饮食北京市某机关北京市某机关9/600 9/600（1.5%)1.5%)NANA2001.1.20-3.12001.1.20-3.1北京市某机关北京市某机关145/1675 (8.7%)145/1675 (8.7%)0.70.7不洁饮食不洁饮食各地临床散发急性肝炎中的戊肝比例各地临床散发急性肝炎中的戊肝比例急性肝炎急性肝炎戊肝戊肝(%)上海上海(9094)105418817.8%武汉武汉(02-03)2264319.0%江苏江苏(0506)2669836.8%香港香港(02)1292418.6%福州福州(0003)1913719.4%20052005年各型肝炎的发病率和死亡率的增减情况年各型肝炎的发病率和死亡率的增减情况资料来源资料来源:中国疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心未分型肝炎戊肝？未分型肝炎戊肝？文献及大量流行病调查数据显示，以往很大一部分的未分文献及大量流行病调查数据显示，以往很大一部分的未分型的肝炎是戊型肝炎，是由于过去使用的戊肝检测试剂的型的肝炎是戊型肝炎，是由于过去使用的戊肝检测试剂的灵敏度不足所致。灵敏度不足所致。戊肝占非甲非乙型肝炎的戊肝占非甲非乙型肝炎的30-70%!戊肝在国内的流行情况很可能被低估了，临床上增加戊肝戊肝在国内的流行情况很可能被低估了，临床上增加戊肝的检测有助于及时了解患者病情并开展治疗，而且能够更的检测有助于及时了解患者病情并开展治疗，而且能够更加准确的监控戊肝的流行。加准确的监控戊肝的流行。甲肝甲肝戊肝戊肝戊肝爆发的季节性戊肝爆发的季节性戊型肝炎的年龄分布戊型肝炎的年龄分布戊型肝炎的性别差异戊型肝炎的性别差异双抗原夹心法双抗原夹心法ELISAELISA对不同动物对不同动物HEVHEV感染的检测感染的检测戊型肝炎是一种人畜共患病戊型肝炎是一种人畜共患病我国在猪中获得我国在猪中获得5 5株株HEVHEV基因序列分型基因序列分型中国商品猪中的戊肝感染情况中国商品猪中的戊肝感染情况20个省市，120个猪场，8626只猪20个省市，120个猪场，8626只猪猪是戊肝病毒的携带者猪是戊肝病毒的携带者复旦大学公共卫生学院郑英杰博士等在国际权威期刊复旦大学公共卫生学院郑英杰博士等在国际权威期刊感染性疾病感染性疾病杂志杂志上公布了最新研究结果：上公布了最新研究结果：n人的戊型肝炎的感染主要来源于猪；人的戊型肝炎的感染主要来源于猪；n猪的带毒率远高于人群，猪的带毒率远高于人群，IVIV型戊肝病毒能够在人群和猪群间自由型戊肝病毒能够在人群和猪群间自由传播；传播；n猪的感染无症状，猪的感染无症状，IVIV型戊肝病毒占主导地位。型戊肝病毒占主导地位。戊型肝炎流行病学特征总结戊型肝炎流行病学特征总结暴发流行多见于发展中国家，发达国家以散发病例为主；暴发流行多见于发展中国家，发达国家以散发病例为主；中老年罹患率高于青少年，男女发病比例约为中老年罹患率高于青少年，男女发病比例约为 3 3：1 11.31.3：1 1；潜伏期末期和急性期早期粪便排毒量大，是主要传染源；潜伏期末期和急性期早期粪便排毒量大，是主要传染源；水源和食物是主要传播途径，呈春季高峰；水源和食物是主要传播途径，呈春季高峰；病情较重，病死率（病情较重，病死率（2.5%2.5%）高于甲肝（）高于甲肝（0.1%0.1%）和乙肝（）和乙肝（0.90.9），），孕妇病死率孕妇病死率20%20%；戊型肝炎是一种人畜共患病。戊型肝炎是一种人畜共患病。戊型肝炎的临床表现戊型肝炎的临床表现 潜伏期潜伏期10106060天，平均天，平均4040天；天；急性起病，黄疸型多见；急性起病，黄疸型多见；乏力、恶心、呕吐、皮肤巩膜黄染；乏力、恶心、呕吐、皮肤巩膜黄染；转氨酶和胆红素生高；转氨酶和胆红素生高；黄疸程度较甲肝重黄疸程度较甲肝重,持续时间长持续时间长,胆汁淤积更明显；胆汁淤积更明显；重症肝炎发生率较高。重症肝炎发生率较高。成人多为临床型感染，儿童为亚临床型；成人多为临床型感染，儿童为亚临床型；病程病程6 68 8周，一般不发展为慢性；周，一般不发展为慢性；戊型肝炎的特异性诊断方法戊型肝炎的特异性诊断方法方法方法待测样品待测样品反应物反应物方法评价方法评价检测检测HEVHEV抗原抗原免疫荧光免疫荧光肝脏组织肝脏组织患者血清患者血清操作复杂，难以推广操作复杂，难以推广免疫电镜免疫电镜粪便粪便/胆汁胆汁患者血清患者血清操作复杂，难以推广操作复杂，难以推广检测检测HEV RNAHEV RNART-PCRRT-PCR血清血清/胆汁胆汁/粪便粪便HEVHEV特异引物特异引物特异度和灵敏度好，特异度和灵敏度好，易污染，用于辅助诊断易污染，用于辅助诊断检测检测HEVHEV抗体抗体 免疫电镜免疫电镜血清血清/血浆血浆HEVHEV病毒颗粒病毒颗粒操作复杂，难以推广操作复杂，难以推广荧光抗体阻断荧光抗体阻断血清血清/血浆血浆HEVHEV阳性的肝组织阳性的肝组织组织来源有限，难以推广组织来源有限，难以推广Western BlotWestern Blot血清血清/血浆血浆重组蛋白重组蛋白 ELISA ELISA血清血清/血浆血浆重组蛋白重组蛋白/合成肽合成肽 戊型肝炎的病程戊型肝炎的病程HEVHEV抗体的检出模式与意义抗体的检出模式与意义检出模式检出模式HEV-IgMHEV-IgG意意 义义1+HEVHEV感染早期、急性期感染早期、急性期2+现症感染期和恢复期早期现症感染期和恢复期早期3+HEVHEV既往感染或恢复后期既往感染或恢复后期两种抗原示意图两种抗原示意图构象型抗原构象型抗原线性表位抗原线性表位抗原u 构象型抗原能自发形成多种聚合体，类似于病毒颗粒的构象型抗原能自发形成多种聚合体，类似于病毒颗粒的 装配过程。装配过程。u 构象型抗原具有很强的构象依赖性表位，与构象型抗原具有很强的构象依赖性表位，与HEVHEV病毒颗粒病毒颗粒 表面的空间结构有较大相似性。表面的空间结构有较大相似性。u 构象型抗原免疫的单抗能够直接捕获病毒，并具有中和构象型抗原免疫的单抗能够直接捕获病毒，并具有中和 活性活性,不影响酶的标记。不影响酶的标记。E2E2抗原的血清反应性抗原的血清反应性1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 N急性期血清急性期血清(10例例)恢复期血清恢复期血清(8例例)阴阴性性对对照照二聚体E2单 体E2戊肝急性期血清和多年后的恢复期血清均有明显的反应，戊肝急性期血清和多年后的恢复期血清均有明显的反应，恢复期血清的反应性集中在二聚体上恢复期血清的反应性集中在二聚体上。E2E2抗原能自发形抗原能自发形成以二聚体为基成以二聚体为基础的多种聚合形础的多种聚合形式，类似于病毒式，类似于病毒结构蛋白的装配结构蛋白的装配过程。过程。E2抗原的质谱图（抗原的质谱图（MALDI-TOF）单体二聚体三聚体四聚体生物工程学报，生物工程学报，2002,18:463-467E2E2抗原的聚合形式抗原的聚合形式万泰公司试剂：万泰公司试剂：构象型抗原：构象型抗原：E2E2 HEV-IgM HEV-IgM：捕获法：捕获法 HEV-IgGHEV-IgG：间接法：间接法GL公司试剂：公司试剂：线性抗原表位线性抗原表位 HEV-IgMHEV-IgM：间接法：间接法 HEV-IgGHEV-IgG：间接法：间接法不同戊肝试剂在急性戊肝中的灵敏度不同戊肝试剂在急性戊肝中的灵敏度单位单位WT IgMWT IgMGL IgMGL IgMGL IgGGL IgG阳性数阳性数/检测数检测数灵敏度灵敏度阳性数阳性数/检测数检测数灵敏度灵敏度阳性数阳性数/检测数检测数灵敏度灵敏度香港卫生署香港卫生署135/14096.4%112/14080.0%-复复 旦旦 大大 学学47/4897.9%35/4872.9%45/4893.8%广广西西C C D D C C123/12697.6%109/12686.5%-合合 计计305/31497.1%256/31481.5%45/4893.8%不同戊肝试剂在健康人群中的特异性不同戊肝试剂在健康人群中的特异性单位单位检测人群检测人群WT IgMWT IgMGL IgMGL IgMGL IgGGL IgG阴性数阴性数/检测数检测数特异度特异度()阴性数阴性数/检测数检测数特异度特异度()阴性数阴性数/检测数检测数特异度特异度()香港卫生署香港卫生署自然人群1287/131697.8复旦大学公卫学院复旦大学公卫学院自然人群273/273100.0264/27396.7233/27385.4北京市红十字血北京市红十字血液中心液中心献血员6989/711398.3北京铁路总医院北京铁路总医院自然人群882/88399.9广西广西CDCCDC自然人群7234/728099.3总总 计计16665/1686598.6264/27396.7233/27385.4指标指标正常人群正常人群急性戊肝急性戊肝约登指数约登指数(%)阴性数阴性数/检测数检测数特异度特异度（%）阳性数阳性数/检测数检测数灵敏度灵敏度（%）WTIgM273/273100.0100.047/4897.997.997.997.9GLIgM264/27396.796.735/4872.969.6GLIgG233/27385.445/4893.893.879.2灵敏度和特异度综合评价灵敏度和特异度综合评价临床阴转血清的临床阴转血清的IgGIgG检测对比检测对比B B公司公司新疆戊肝感染新疆戊肝感染10年后血清抗年后血清抗HEV抗体检出抗体检出1616份临床急性戊肝阳转血清的评价份临床急性戊肝阳转血清的评价总总 结结戊肝戊肝IgMIgM在诊断急性戊肝上优于戊肝在诊断急性戊肝上优于戊肝IgGIgG，符合免疫学诊断常规；，符合免疫学诊断常规；IgMIgM采用抗采用抗链捕获法和构象抗原，诊断时间早，可准确区分既往和链捕获法和构象抗原，诊断时间早，可准确区分既往和现症感染，是一个高度敏感、特异的诊断急性戊肝的指标。现症感染，是一个高度敏感、特异的诊断急性戊肝的指标。