人体组织的检验.pptx

第十六章 人体组织的检验 一、毛发检验一、毛发检验 毛发结构：毛发结构：毛发是皮肤的一种特殊的附属器，是毛发是皮肤的一种特殊的附属器，是 皮肤毛囊细胞产生的一种富有弹性角质体。皮肤毛囊细胞产生的一种富有弹性角质体。毛尖毛尖-是毛干的游离末端，毛干向毛尖逐渐是毛干的游离末端，毛干向毛尖逐渐 变细而尖变细而尖 毛干毛干-是裸露于皮肤外部的部分，由角化上是裸露于皮肤外部的部分，由角化上 皮细胞组成，中心向外可以分为：皮细胞组成，中心向外可以分为：毛小皮：毛小皮：人人-毛小皮花纹通常为细小波浪状。毛小皮花纹通常为细小波浪状。毛皮质：毛皮质：人人-皮质发达，皮质发达，毛髓质：毛髓质：人人-髓质不发达、而且髓质不连续髓质不发达、而且髓质不连续 毛根毛根-是埋在皮肤内的部分。是埋在皮肤内的部分。毛毛 球：球：毛根起始端膨大和球状的部分毛根起始端膨大和球状的部分 毛毛 囊：囊：包裹毛根的一管状结构，内层为上皮包裹毛根的一管状结构，内层为上皮 根鞘、外层为纤维组织鞘根鞘、外层为纤维组织鞘 毛乳头：毛乳头：毛球和毛囊末端膨大，底面内凹，含毛球和毛囊末端膨大，底面内凹，含 毛细血管和神经的结缔组毛细血管和神经的结缔组法医意义：1 1 毛发容易脱落，在凶杀、强奸、抢劫等毛发容易脱落，在凶杀、强奸、抢劫等 案件中均可遗留案件中均可遗留 2 2 毛发理化性质稳定，其主要成分为角蛋毛发理化性质稳定，其主要成分为角蛋 白，不易腐蚀和毁坏，可长期保存白，不易腐蚀和毁坏，可长期保存 3 3 毛发可以进行个人识别毛发可以进行个人识别鉴定注意：1 1 毛发容易丢失，检验时应该特别小心，最毛发容易丢失，检验时应该特别小心，最 好带口罩好带口罩 2 2 选择合适的背景进行观察选择合适的背景进行观察 毛发与其他纤维的鉴别 肉眼观：毛尖、毛干、毛根肉眼观：毛尖、毛干、毛根 显微镜：毛小皮、毛皮质、毛髓质显微镜：毛小皮、毛皮质、毛髓质 燃烧法：毛发由特殊的臭味燃烧法：毛发由特殊的臭味-角蛋白中含有角蛋白中含有 3%5%3%5%的硫的硫 人毛与其他动物毛的鉴别毛小皮毛皮质毛髓质形态边缘宽度色素宽度连续性末端人毛细而不规则花形细 锯齿状较 宽2/3均匀较 窄1/41/5不连续部 分缺如动物毛形状多变粗 锯齿状较 窄1/21/3不均匀较宽1/3连续直 至毛尖毛发部位的确定毛发部位的确定毛发其他特征鉴别毛发其他特征鉴别 5%10%5%10%亚硝基铁氰化钠溶液亚硝基铁氰化钠溶液 脱落脱落-毛根完全角化，干燥萎缩，无根鞘附着，毛根完全角化，干燥萎缩，无根鞘附着，根部色素少。染色不颜色反应根部色素少。染色不颜色反应 拔出拔出-毛囊组织附着、毛球湿润，毛球下端开放毛囊组织附着、毛球湿润，毛球下端开放 呈钩状，染色呈红色。呈钩状，染色呈红色。钝器损伤钝器损伤-钝器作用部位变宽扁平，皮质纤维分钝器作用部位变宽扁平，皮质纤维分 离，部分或完全断裂离，部分或完全断裂 锐器损伤锐器损伤-断端平滑整齐、毛干不碎裂、皮质纤断端平滑整齐、毛干不碎裂、皮质纤 维不分裂维不分裂长度直径横断面头发2m0.1圆形或椭圆形胡须30cm0.15钝的三角形阴毛36cm0.10.2长椭圆形 毛发的个人识别毛发的个人识别 形态学检查：形态学检查：长度长度-色泽色泽-黑色、浅褐色、灰色、白色黑色、浅褐色、灰色、白色-色素：白色、黑色、红色色素：白色、黑色、红色 形态形态-直发、波状发、卷发直发、波状发、卷发 断端断端-剪切或切割、部分撕裂或完全撕裂剪切或切割、部分撕裂或完全撕裂 免疫学检查：免疫学检查：ABOABO血型血型-解离试验解离试验 特征特征：1 1 血型物质含量少；血型物质含量少；2 2 毛小皮没有血型物质，只有皮质和髓质才有毛小皮没有血型物质，只有皮质和髓质才有 方法：毛发洗净方法：毛发洗净-乙醇脱色乙醇脱色-充分压扁充分压扁-加抗体吸收加抗体吸收-涤、解离、涤、解离、RBCRBC 注意：注意：1 1 毛发压扁，原宽度地毛发压扁，原宽度地44倍；倍；2 2 抗血清效价抗血清效价128128；3 3吸收时间充分，过夜吸收时间充分，过夜 4 4 毛发对照毛发对照 生化学检查：生化学检查：有毛根和毛囊的毛发可以检测有毛根和毛囊的毛发可以检测ESDESD、GLOIGLOI、PGM1PGM1、ORMORM等等 分子生物学：分子生物学：带毛囊带毛囊-DNADNA提取用提取用chelex-100chelex-100，STRSTR基因座分析，性别基因鉴定基因座分析，性别基因鉴定 毛毛 干干-线粒体线粒体DNADNA多态性分析多态性分析 化学化学 分分 析：析：微量元素的检测微量元素的检测 应用：可以推测可能的生活环境、从事的职业、判断是否中毒应用：可以推测可能的生活环境、从事的职业、判断是否中毒 方法：原子发射光谱析、原子吸收分光光度、中子活性、气相色谱、质谱方法：原子发射光谱析、原子吸收分光光度、中子活性、气相色谱、质谱二、软组织检验二、软组织检验 1 1 种类鉴别种类鉴别 肉眼观察肉眼观察 适合于组织块比较大的检材的识别适合于组织块比较大的检材的识别 组织切片组织切片 HEHE染色后，在显微镜下观察，鉴别染色后，在显微镜下观察，鉴别 *如果干燥组织可以用如果干燥组织可以用5%5%醋酸浸软组织以醋酸浸软组织以 恢复正常形态恢复正常形态 皮肤皮肤-复层鳞状上皮细胞的表层结构复层鳞状上皮细胞的表层结构+真皮层的真皮层的 毛囊和皮脂腺，及皮下脂肪毛囊和皮脂腺，及皮下脂肪 脑组织脑组织-神经细胞和神经胶质细胞神经细胞和神经胶质细胞 肝肝 脏脏-肝细胞及胆管构成发肝小叶结构肝细胞及胆管构成发肝小叶结构 肾肾 脏脏-肾小球、肾小管、肾小球、肾小管、消化道消化道-粘膜层、粘膜下层、肌层、外膜粘膜层、粘膜下层、肌层、外膜 2 2 种属鉴定种属鉴定 免疫学方法：免疫学方法：抗人血清抗人血清-沉淀反应、凝集反应、酶免疫分析沉淀反应、凝集反应、酶免疫分析 *法医检验中的组织经常受各种因素的影响，变性或分解，法医检验中的组织经常受各种因素的影响，变性或分解，易产生误判。易产生误判。分子生物学：分子生物学：AluAlu序序列列 含含有有AluIAluI酶酶切切位位点点 散散在在重重复复序序列列，由由300300bpbp重重复复单单位，该序列为人类和灵长类特有位，该序列为人类和灵长类特有-种属特异性种属特异性 PCR-AFLP PCR-AFLP：人类人类130130bpbp的扩增产物的扩增产物 2828srRNA srRNA rRNA=60s rRNA=60s（28s+5.8s+5s+5028s+5.8s+5s+50多种多肽）多种多肽）+40+40 保守区中的可变区进化较快，种属之间差异很大保守区中的可变区进化较快，种属之间差异很大 人类人类108108、104104、101101、9999bpbp，不同动物的扩增产物长度不同不同动物的扩增产物长度不同 细胞色素细胞色素b b基因基因 位于线粒体上的具有种属差异的遗传标记位于线粒体上的具有种属差异的遗传标记 人和哺乳类动物区别人和哺乳类动物区别 AluIAluI酶切位点酶切位点-酶切片断的长度不同酶切片断的长度不同 人和鸟类的动物区别人和鸟类的动物区别NcoINcoI酶切位点酶切位点-人类不含有该酶切位点人类不含有该酶切位点 SONSON基因基因 3 3 个人识别个人识别检检验验基基础础：正正常常情情况况下下，同同一一个个体体不不同同组组织织的的血血型型、酶型、酶型、DNADNA分型结果相同分型结果相同 例外：癌变的组织；腐败组织例外：癌变的组织；腐败组织-获得性获得性B B物质物质影响因素：影响因素：环境因素，干燥能保存，潮湿易破坏环境因素，干燥能保存，潮湿易破坏 温度、酸碱温度、酸碱 烧熟（但未焦）的组织可以检出，烧熟（但未焦）的组织可以检出，自自溶溶和和腐腐败败 使使组组织织的的血血型型物物质质及及其其他他的的遗遗传传标标记更容易被破坏记更容易被破坏送检注意：送检注意：1 1 尽快送检尽快送检-2 2 妥善保存妥善保存-所有检材不宜用甲醛固定所有检材不宜用甲醛固定 3 3 合合理理选选材材-肝肝脏脏和和脾脾脏脏中中核核酸酸分分解解酶酶丰丰富富，蛋蛋白白质质和和DNADNA降降解解快快，不不宜宜首首选选，肌肌肉肉和和脑脑是提取是提取DNADNA较理想的检材较理想的检材血型：血型：ABOABO血血型型 ABHABH抗抗原原不不仅仅分分布布于于人人类类红红细细胞胞 上上，也也存存在在于于人人体体各各种种上上皮皮细细胞胞、血血管管与与淋淋巴巴管管的的内内皮皮细细胞胞、心内膜及神经组织的神经细胞及突触。心内膜及神经组织的神经细胞及突触。有些组织的有些组织的ABHABH抗原发育较红细胞早抗原发育较红细胞早 方法：方法：吸收试验吸收试验-凝集抑制试验凝集抑制试验 解离试验解离试验-热解离试验热解离试验 混合凝集混合凝集-红细胞粘连试验红细胞粘连试验 免疫组化免疫组化-酶标抗体的应用酶标抗体的应用 基因分型基因分型-PASAPASA、PCR-RFLPPCR-RFLP、ASO-PCRASO-PCR酶酶 型测定型测定 检材处理：组织制成匀浆，检材处理：组织制成匀浆，DNADNA分分析析 DNADNA提提取取：冷冷冻冻组组织织-常常规规有有机机溶溶剂剂，量量少用少用Chelex-100Chelex-100 DNADNA分析分析 STRSTR或或HLAHLA基因分型基因分型 三、其他组织检验三、其他组织检验 1 1 指指甲甲检检验验由由表表皮皮细细胞胞角角化化而而成成，由由多多层层连连接接牢牢固固的的角角化化细细胞胞构构成成，细胞内充满角质蛋白。细胞内充满角质蛋白。ABOABO血血型型 特特点点：ABHABH为为水水溶溶性性血血型型物物质质，但但不不受受分分泌泌型型的的影影响响，存存在于所有的个体。成人和新生儿指甲中的在于所有的个体。成人和新生儿指甲中的ABHABH含量无明显的差异。含量无明显的差异。方法：洗净方法：洗净-用肥皂水充分的洗涤，再用蒸馏水冲洗数次用肥皂水充分的洗涤，再用蒸馏水冲洗数次 软化软化-生理盐水中生理盐水中2 2小时，晾干小时，晾干 脱脂脱脂-丙酮或乙醇脱脂丙酮或乙醇脱脂 压碎压碎-加大抗血清接触的面积加大抗血清接触的面积 mtDNAmtDNA检测检测 测定测定mtDNAmtDNA多态性的灵敏度比检测核多态性的灵敏度比检测核DNADNA的多态性高的多态性高 2 2 骨及牙检验骨及牙检验-人体最坚硬的组织，抵抗腐败，长期保存人体最坚硬的组织，抵抗腐败，长期保存 检检材材处处理理：用用手手术术刀刀刮刮净净骨骨表表面面和和牙牙齿齿表表面面的的污污垢垢物物，用用蒸蒸馏馏水水冲冲洗洗2 2次次，紫紫外外线线照照射射1 1小小时时后后，用用锤锤子子将将牙牙齿齿砸砸碎碎成成粉粉末末，或或用用电电钻钻取出骨粉取出骨粉 ABOABO血型：血型：骨粉经乙醇脱脂后，分别粘在透明胶布上骨粉经乙醇脱脂后，分别粘在透明胶布上-解离试验解离试验 DNADNA分析：分析：常规提取以后，可以再用常规提取以后，可以再用DNAclean-upDNAclean-up纯化备用。纯化备用。