外耳道乳头状瘤组织形态学观察及HPV分型的分析_梅静.pdf

J Med Theor PracVol.36，No.8，Apr20232023年第36卷第8期医学理论与实践外耳道乳头状瘤组织形态学观察及 HPV 分型的分析*基金项目:江苏省南京市卫健委中医专项(2009 92)。通信作者:耿建祥梅静1印洪林2耿建祥3何健3陈静3兰建云3张亚3邓伟3丁康31安徽省当涂县人民医院病理科243100;2东部战区总医院病理科;3南京中医药大学附属南京中医院病理科摘要目的:目的:观察 41 例外耳道乳头状瘤(PEAC)患者的 46 个病变组织病理形态学变化，探讨人乳头瘤病毒(HPV)型别分布及临床意义。方法:方法:收集 2019 年 1 月2021 年 10 月安徽省当涂县人民医院病理科诊断为外耳道乳头状瘤的41 例患者的 46 个病变组织蜡块，先行显微镜下的病变组织形态学观察，再从其石蜡组织中提取 HPV DNA，采用聚合酶链式反应(PC)和基因芯片技术对患者的瘤组织行 23 种高危和低危型 HPV 检测。结果:结果:对 41 例外耳道乳头状瘤的 46 个病变，镜下观察，鳞状上皮均呈乳头状增生，轻度到高度角化，可见散在不全角化的细胞，中心结缔组织内伴有淋巴细胞浸润，鳞状上皮的表层和中层内可见数目不等的挖空细胞，有少量核分裂，20 例鳞状上皮下 1/3 可见异型增生的细胞层。41 例外耳道乳头状瘤患者 HPV 总检出率为 75 61%，单一型别检出率和多型别检出率分别为73.17%和2 44%，单一型别均为6 型，多型别为6+16 型。结论:结论:外耳道乳头状瘤是由于外耳道皮肤炎症或受损后感染 HPV 所致的一种耳鼻喉科的疾病，以低危单一 6 型 HPV 感染为主，伴有少量的多型 HPV 感染。行该病变的病理观察和 HPV 分型检测，有助于本病的病因学诊断，对防止其病变的传播、复发及恶变都具有重要的临床指导意义。关键词外耳道乳头状瘤组织形态学人乳头瘤病毒型别中图分类号:739.61文献标识码:Adoi:10.19381/j.issn.1001-7585.2023.08.007Observation of Morphology and Analysis of HPV Typing in Papilloma of the External Auditory Canal TissuesMEI Jing#，YIN Honglin，GENG Jianxiang，et al#Department of Pathology，the People s Hospital of Dangtu County，An-hui Province243100ABSTACT Objective:Pathological changes of 46 diseased tissues from papilloma of the external auditory canal(PEAC)in41 patients were observed，to investigate the distribution and clinical significance of human papilloma virus(HPV)typesMethods:A total of 46 wax blocks were collected from 41 patients diagnosed as PEAC in January 2019 to October 2021 Thepathological morphology changes were first observed under the microscope，and HPV DNA was extracted from the paraffin tis-sues，polymerase chain reaction(PC)and gene chip technology were used to detect 23 high-risk and low-risk HPV types intumor tissues esults:Microscopic observation of 46 lesions in 41 cases of PEAC showed papillary hyperplasia，squamous epi-thelium with mild to high keratinization，scattered incomplete keratinized cells，lymphocyte infiltration in central connective tis-sues，varying numbers of hollowed cells in the surface and middle layer of squamous epithelium and a small amount of nucleardivision Heterotype hyperplastic cell layers were seen in the 1/3 place beneath squamous epithelium in 20 cases The totaldetection rate of HPV in 41 PEAC patients was 75 61%，the detection rate of single type and the multi-type was 73 17%and2 44%，respectively All the single type was 6 type，and the multi-type was 6+16 type Conclusion:PEAC is an otorhinolar-yngology disease caused by HPV infection after skin inflammation or damage of the external auditory canal It is dominated bylow-risk single type infection of HPV 6 type，accompanied by a small number of multi-type HPV infection The pathologicalobservation and HPV typing testing of PEAC are helpful to the etiological diagnosis of PEAC，and have important clinical guid-ing significance to prevent the spread，recurrence and malignant transformation of PEACKEY WODSExternal auditory canalPapillomaTissueMorphologyHuman papillomavirusType乳头状瘤是一种来源于被覆上皮的良性肿瘤，其上皮的鳞状细胞或基底细胞受到长期的外部刺激导致细胞增殖的结果。外耳道乳头状瘤是一种相对少见的肿瘤，可发生于耳郭，其中，多数发生于外耳道软骨部，少数可原发于中耳。该病多见于我国的南方省份，好发于男性，以老年男性发病率较高。外耳道乳头状瘤的病因学以前并不完全清楚，现认为可能与下列因素相关:(1)慢性炎症的长时间刺激，或者异物导致的外耳道皮肤损伤，比如习惯性挖耳，80%的患者有挖耳的经历;(2)病毒性感染，长期以来，外耳道乳头状瘤的发病被疑为由 HPV 感染引起的。据统计中国人外耳道乳头状瘤的发病率明显高4821医学理论与实践2023年第36卷第8期Vol.36，No.8，Apr2023J Med Theor Prac于外国人，这与中国人爱挖耳，可能导致外耳道皮肤的损伤，为病毒感染创造了有利的致病条件有关1-4。因此，慢性炎症、习惯性挖耳和病毒感染，这 3 个因素互相影响，促进了外耳道乳头状瘤的发生和发展。国内外文献检索尚未见外耳道乳头状瘤与 20 种以上HPV 分型研究的报道。本文对 41 例外耳道乳头状瘤患者的 46 个病变组织标本行 23 种 HPV 分型检测，并对该肿瘤行病理组织形态学观察和 HPV 感染型别的分布进行探讨和分析。现报告如下。1资料与方法1 1一般资料收集安徽省当涂县人民医院病理科2019 年1 月2021 年10 月耳鼻喉科手术后常规石蜡组织病理诊断为外耳道乳头状瘤的患者 41 例。其中女 6 例，男 35 例，男女之比为 5 5 1，最小年龄24 岁，最大年龄 82 岁，平均年龄 63 24 岁。其中 2029 岁3 例，40 49 岁2 例，50 59 岁9 例，60 69岁 10 例，70 79 岁 14 例，80 89 岁 3 例。发生于单侧外耳道乳头状瘤 36 例(发生于左侧外耳道乳头状瘤 21 例、发生于右侧外耳道乳头状瘤 15 例)，发生于双侧外耳道乳头状瘤 5 例。收集同时间内的外耳道正常鳞状上皮组织 10 例，其中男 8 例，女 2例，最小年龄 41 岁，最大年龄 78 岁，平均年龄59.56 岁，40 49 岁 2 例，50 59 岁 3 例，60 69 岁4 例，70 79 岁 1 例。由 2 位年资较高的主治以上医师，按照 WHO(2006 年)耳部肿瘤病理学和遗传学中的外耳道乳头状瘤组织学分类标准进行复片，并复习其患者临床病理资料。1 2仪器与试剂聚合酶链式反应扩增仪(购自新加坡 Perkin Elmer 公司，型号:AB 2720)，分子杂交仪(购自亚能生物技术深圳有限公司，型号:YN-H16)，高速冷冻离心机(购自湖南凯达科学仪器有限公司，型号:KH20-)，生物安全柜(购自上海瑞仰 净 化 装 备 有 限 公 司，型 号:BSC2A2-1102)。HPV 分型基因检测试剂盒(购自亚能生物技术深圳有限公司)。HPV 分型检测所需要的显色液体，应依据当时所需的浓度加入适当的蒸馏水来调制。1 3方法1 3 1制片和取样:46 个外耳道乳头状瘤标本均经 10%的中性福尔马林液体固定，常规脱水，石蜡包埋，4m 厚切片，行 HE 染色后，封片。对 46 个病理组织学诊断为外耳道乳头状瘤患者的石蜡组织样本，一般切取 5 8 个组织样片，每个组织样片的厚度为 3 5m，用镊子夹起石蜡组织样片后，放入小锥形离心管内。每切下一个组织样片后，用次氯酸钠液体反复擦刀片和镊子各 3 4 次。132DNA 的提取:将装有石蜡组织样片的 1 5ml离心管取出，加入 150l 裂解液，充分振荡混匀后，放入金属浴中加热 1 000 10min，立即13 000r/min 离心 10min，离心半径 7cm。离心后取待测离心管的中间层 DNA 溶液备用。PC 扩增、分子杂交、孵育和显色实验操作依据说明书规范进行。每份检测标本显色后，根据膜芯片上有无杂交信号，来判断结果。1 3 3结果判断:实验完成后，观察每张膜芯片上不同位点显示出小圆形蓝色信号所在的位置，判断人乳头瘤病毒感染的某个基因型别，如显示出两个及两个以上的小圆形蓝色信号判断为多型感染，如只是显示出一个小圆形蓝色信号提示为一型感染(IC 点除外)。低危型为 6、11、42、43、81、83 型，高危型为 16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82 型。1 4统计学方法采用 SPSS25 0 统计软件系统进行相关数据分析。定性资料以频数(%)形式表示。各组间率的比较采用 2检验。以 P0 05 为差异有统计学意义。2结果2 141 例外耳道乳头状瘤患者的 46 个瘤组织病理肉眼和镜下所见41 例外耳道乳头状瘤患者的46 个组织标本，肉眼所见:瘤体呈灰白灰红色的 33个、灰白色的 7 个、灰红色的 2 个、灰褐色的 2 个、灰白灰褐色的 2 个;瘤体质软的 42 个、质中的 3 个、质硬的 1 个;瘤体表面呈细颗粒状的 39 个，非颗粒状的 7 个;瘤体直径1cm(1 2 5cm)31 个，1cm(0 3 0 8cm)10 个，5 个双侧瘤体的直径为 0 4 0 8cm(1 个左侧瘤、4 左侧瘤)。镜下所见:46 个瘤体镜下均见被覆的鳞状上皮呈乳头状增生，伴有分枝状结构，间质结缔组织较稀少，血管明显，有数目不等的炎细胞浸润，角化过度 10 个及角化不全 36个，少量挖空细胞的 8 个，较多挖空细胞的 38 个，20个鳞状上皮内低级别病变的细胞表现出轻度异型，极向稍乱，可见少量核分裂象。见图 1。图 1PEAC 组织 HE 染色a.PEAC 呈乳头状增生，表皮角化不全，放大倍数(10)b PEAC 表皮下 1/3 的细胞呈轻度异型增生，见较多的挖空细胞，放大倍数(20)c PEAC 棘层增厚，见纤维血管轴心及少量的挖空细胞，放大倍数(20)d PEAC 表皮中上层见明显的挖空细胞，放大倍数(40)2 210 例正常鳞状上皮组织和 41 例外耳道乳头状瘤的 46 个组织中 HPV 分型分布状况外耳道正5821J Med Theor PracVol.36，No.8，Apr20232023年第36卷第8期医学理论与实践常鳞状上皮组织 10 例中，检测出 HPV 阳性者 1 人，HPV 阴性者 9 人，总的 HPV 阳性率为 10 00%(1/10)，1 例阳性者为单一6 型。41 例外耳道乳头状瘤患者中，检测出 HPV 阳性者 31 人，HPV 阴性者 10人，总的 HPV 阳性率为 75 61%(31/41)，其中一型HPV 阳性率为 73 17%(30/41)，多型 HPV 阳性率为 2 44%(1/41)，30 例一型 HPV 阳性者均为 6 型HPV，1 例多型 HPV 阳性者为 6+16 型 HPV，一型HPV 与多型 HPV 的阳性者比值 30 1。HPV 阳性者检测出不同型别 HPV 出现频率次数合计为 32 次(注:对多型 HPV 阳性者，各型别的阳性率重复计算)，其中高危型 HPV 阳性次数 1 次，低危型 HPV阳性次数 31 次。5 例双侧外耳道的双侧乳头状瘤患者的病变组织检测均为 6 型 HPV。见图 2。图 2PEAC 组织 HPV 膜芯片杂交染色a 基因芯片显示 PEAC 组织中 6 型 HPV 单一位点阳性，IC 为内标点b 基因芯片显示 PEAC 组织中多型 6+16 型 HPV 两个位点阳性，IC 为内标点3讨论乳头状瘤是一种外生性增生性良性病变。乳头状瘤在临床上是指高出皮肤或黏膜表面的乳头状突起，病理组织形态学特点是复层鳞状上皮呈乳头状增生，表面轻度到高度角化，中心为结缔组织和血管组成。它多发生于皮肤、口腔、耳、鼻、咽喉、阴茎、肛门等部位，耳部的乳头状瘤好发于外耳道。外耳道乳头状瘤是偶尔发生于外耳道的一种外生性增生性病变，在临床上，男性患者明显多于女性患者，中国人明显多于外国人，我国南方省份明显多于北方省份。大多数患者发病时年龄为 20 60 岁。外耳道乳头状瘤的发生和发展与外耳道的慢性长期刺激:如患者伴有外耳道的炎症、外耳道皮肤损伤及与挖耳的经历有着密切的关系。以往的研究认为该病除上述的因素相关之外，还与病毒感染相关。HPV 感染现已被广泛疑为是外耳道乳头状瘤的致病因子1-4。本文对 41 例外耳道乳头状瘤患者的 46 个病变组织中 HPV 型别分布、病理组织形态学观察和临床情况进行分析。HPV 是一类微小的环状 DNA 病毒，其家族较为庞大。目前，经过鉴定的就有 100 多种。它们主要通过性传播，部分可通过间接接触传染和母婴传播的方式感染人体的黏膜和皮肤上皮细胞，引发人类的各种良、恶性病变。人是 HPV 唯一的宿主，其宿主是人体的皮肤和黏膜上皮细胞，该病毒具有高度的宿主和组织的特异性。在持续性 HPV 感染状态下则可引发尖锐湿疣、上皮内瘤变和癌性病变。临床上，根据 HPV 致病性的大小，将 HPV 分为高危型人乳头瘤病毒(High-risk human papillomavirus，H-HPV)和低危型人乳头瘤病毒(Low-risk humanpapillomavirus，L-HPV)两大类，一般 L-HPV 常诱发人体的低级别上皮内瘤变、生殖器疣类病变等，而H-HPV 则可导致人体的高级别上皮内瘤变、癌性病变5-8。鉴于女性生殖道尖锐湿疣组织 HPV 感染的分型研究，发现除检测出不同的低危型 HPV 感染外，还检测出不同的高危型 HPV9-10。因此，对外耳道乳头状瘤组织行高、低危型 HPV 分型检测，有利于耳鼻喉科医师对该病的预防、治疗和随访。目前，病理科可用于 HPV 检测方法主要有组织形态学观察、免疫组化染色法、原位杂交染色法和聚合酶链式反应检测法等。组织形态学观察主观性比较强、重复性较差，有时难与其他病毒感染相区别;免疫组化染色法是蛋白水平的检测，存在着假阴性和假阳性均较高的现象，重复性不好，敏感性也低;原位杂交染色法属于分子水平的检测，具有较高的特异性和敏感性，其原理是用设计好的特异性探针与待测样本中的互补核酸序列杂交，检测原位目的基因的存在，缺点是在检测 HPV 时，不能分出 HPV感染的具体型别，也不适合两种以上多型 HPV 的分型检测;聚合酶链式反应(PC)和基因芯片技术是分子水平的检测(是将 PC 扩增和分子杂交相结合的检测技术)，先行待检物的 DNA 提取，再行 PC扩增、分子杂交、孵育、显色和判读等步骤，检测相应目的基因的存在，由于基因芯片上可设置许多分子的杂交点，一次可对许多目的基因进行检测，与原位杂交染色法相比，PC 和基因芯片技术操作相对简单、快速、容易判断、一次可检测 20 30 个以上的目的基因。因此，特异性杂交基因芯片检测已成为临床上 HPV 分型诊断的金标准，也是 HPV 感染流行病调查非常有用的工具。一般外耳道乳头状瘤肉眼所见:外耳道口或外耳道外段，可见大小不一、数目不定的高低不平肿块，状似桑椹，广基或有蒂，呈棕色或灰白色，质较坚实。如继发感染时则可见充血、肿胀，可因局部血液循环障碍而变为黑色，肿瘤可自行突落。本文 46 个瘤体肉眼所见，呈灰白灰红色的 33 例、灰白色的 7例、灰红色的 2 例、灰褐色的 2 例、灰白灰褐色的 2例，质软 42 个、质中 3 个、质硬 1 个，表面呈细颗粒状 39 个，表面光滑 7 个，直径1cm(1 2 5cm)31个，1cm(0 3 0 8cm)10 个，5 个双侧瘤的另外一侧瘤体直径为 0 4 0 8cm。由此可见，本文外耳道乳头状瘤肉眼特征是一种外观以灰白灰红色、质软、表面呈细颗粒状为主，其瘤体直径为 0 3 2 5cm的肿瘤。外耳道乳头状瘤镜下所见:乳头状瘤表现为被覆的鳞状上皮呈乳头状突起，乳头较粗大，有的乳头呈分枝状，棘层高度肥厚，表皮嵴增粗延长，细胞层次较多，极向和排列尚规则，偶见核分裂象。间质结缔组织较稀少，血管丰富，常伴炎细胞浸润。多6821医学理论与实践2023年第36卷第8期Vol.36，No.8，Apr2023J Med Theor Prac数表现出表层细胞呈角化过度及角化不全，棘层以上的上皮层可见数目不等的挖空细胞。该瘤体的鳞状上皮可发生恶变，呈现出细胞不同程度的异型性、极向紊乱、核分裂象增多等病理形态学改变。本文46 个瘤体镜下均见被覆的鳞状上皮呈乳头状增生，伴分枝状结构，间质结缔组织较稀少，血管明显，有数目不等的炎细胞浸润，角化过度 10 个及角化不全36 个，少量挖空细胞的 8 个，较多挖空细胞的 38个，20 个鳞状上皮内低级别病变的细胞表现出轻度异型，极向稍乱，可见少量核分裂像。提示病理组织学诊断是该肿瘤准确诊断的保证，也是发现其瘤体是否伴有鳞状上皮内瘤变(癌前病变)的重要手段。在病理组织形态学改变上，外耳道乳头状瘤与生殖器疣的组织学相似，所以亦称外耳道尖锐湿疣。本文 10 例外耳道正常鳞状上皮组织中 HPV 检出率为 10%，41 例外耳道乳头状瘤组织中 HPV 检出率为 75 61%，两者 HPV 检出率相比较，差异有统计学意义(P 0 05)。说明 HPV 与外耳道乳头状瘤的发生、发展密切相关。低危 HPV6 型和 HPV11 型在人群中感染率是最高的，一般认为这两型病毒只是引起良性病变(尖锐湿疣、乳头状瘤、趾疣等)。有研究表明，低危 HPV6 型也具有增强子和转化潜能，并已在恶性肿瘤中分离到，这是一个新的危险信号11。在 CIN 1 3 级病变患者中，均有单一 HPV6型被检出，说明 HPV6 型是一个具有转化潜能的增强子，可引起女性生殖道上皮细胞的瘤变或癌变12。本文外耳道乳头状瘤组织中检测出 30 例单一感染的 6 型 HPV，检测出 1 例多型感染的 6 型HPV(6+16 型)，未检测出 11 型感染的 HPV。6 型HPV 是外耳道乳头状瘤患者 HPV 感染的优势病毒，与国外报道尖锐湿疣组织中以 6 型为主13 与我国报道的尖锐湿疣组织中以 11 型为主的研究结果不同7，9-10，提示在外耳道乳头状瘤患者中 6 型 HPV感染占据了绝对的优势，占本文 HPV 感染患者100%。为什么外耳道乳头状瘤组织中，只检测出 6型 HPV，而没有检测出 11 型 HPV。是外耳道上皮鳞状细胞的内外环境只适合 6 型 HPV 感染，而不适合 11 型 HPV 感染，还是外耳道鳞状上皮细胞表面的受体唯独只与 6 型 HPV 特异性结合，而导入细胞内，致外耳道乳头状瘤的发生、发展。对外耳道乳头状瘤组织中仅检出低危 6 型 HPV 感染的这一独特的现象，还有待于大样本的研究进一步证实。本文 41 例外耳道乳头状瘤患者，询问其病史，均有挖耳朵的经历，且患者都喜欢自己经常挖耳朵或请他人挖耳朵的习惯。挖耳工具，一可导致外耳道皮肤损伤，二可成为携带病毒的工具。因此，接受或自己使用没有经高温消毒或酒精消毒的挖耳工具挖耳时，很可能通过被 HPV 污染的挖耳工具导致外耳道皮肤的损伤，从而感染了 HPV，引起外耳道乳头状瘤的发生和发展。本文所有患者均否认有尖锐湿疣及不洁性生活史。本病发病年龄为 26 60 岁。与兰建云等4 报道(原位杂交染色法)的外耳道乳头状瘤患者的平均年龄为 53 40 岁相比，本文外耳道乳头状瘤患者的平均年龄(63 24 岁)比前者大了近 10 岁。除 3 例患者外，患者发病年龄都在 48 岁以上，60 岁以上的患者占 65 85%，占患者总人数的一大半以上。本文 5 例患者为双耳道乳头状瘤，其双侧瘤组织中 HPV 分型检测，均为低危 6 型 HPV感染，此结果说明患者使用了未经消毒的挖耳工具，导致双耳道感染了 6 型 HPV，从而诱发了外耳道乳头状瘤。由此，可以推测 60 岁以上的老年患者，其外耳道的 HPV 非性接触感染概率远比年轻人群要高得多，这进一步支持通过共用未经消毒的挖耳工具致老年人群体感染 HPV，从而导致老年人群体易患外耳道乳头状瘤的主要原因。目前外耳道乳头状瘤的治疗方法多种多样，如激光治疗法、电治疗法、局部药物注射法等，但治疗后病变均易复发。我院收治的 41 例外耳道乳头状瘤患者均为住院治疗的病人，均采用手术切除瘤体的治疗措施。经病理科医师确诊外耳道乳头状瘤后，在患者切除病变的部位和全身给予抗病毒药物辅助治疗。患者术后随访4 30 个月，仅有 1 例患者在半年内复发，提示手术加抗病毒治疗，效果较满意。本病的预防，要尽可能避免使用不洁工具挖耳朵，挖耳时不要过度用力，避免伤到外耳道皮肤，导致耳道皮肤损伤;有慢性化脓性中耳炎的患者要积极配合治疗中耳炎。总之，外耳道乳头状瘤是由于外耳道皮肤炎症或受损后感染 HPV 所致的一种外耳道的疾病。外耳道乳头状瘤可发生鳞状上皮细胞的异型增生，也可发生高级别上皮内瘤变和癌变。外耳道乳头状瘤发生癌变的时间一般为发病后 5 40 年，但也有极少数患者在半年内发生恶性变的报道2-3，11。如果外耳道乳头状瘤组织中检测出高危型 HPV，提示该瘤组织存在着较高的癌变风险，低危 HPV6 型也具有增强子和转化潜能，也可以导致组织的鳞状上皮细胞瘤变和癌变。本文 41 例外耳道乳头状瘤患者中有 20 例患者伴鳞状上皮低级别瘤变，提示患者感染 HPV 后，HPV 基因可能整合到宿主细胞的基因内，从而诱发上皮增生，发生细胞异型改变，甚至恶性变4，14-16。本文 1 例患者外耳道乳头状瘤组织中检测出高危 16 型 HPV，31 例患者外耳道乳头状瘤组织中检测出低危 6 型 HPV。因此，对外耳道乳头状瘤患者，除行其肿瘤常规病理组织形态学诊断外，还应对该肿瘤组织行 HPV 分型检测，对 HPV 感染或 HPV 感染伴有瘤组织鳞状上皮瘤变的患者，除进行常规病变手术切除外，应对病变局部和全身辅以抗病毒药物治疗，并对患者行长期的随访工作、以减少肿瘤的复发和癌变，改善预后，造福于广大患者。参考文献 1耿建祥，王旭波 人乳头瘤病毒检测及其临床应用M 北京:人民卫生出版社，2009:381-427 2李添应 耳鼻咽喉头颈肿瘤学M 北京:人民军医出版社，2007:40-41(上转第 1283 页)7821医学理论与实践2023年第36卷第8期Vol.36，No.8，Apr2023J Med Theor Prac染性单核细胞增多症最常见的血象改变。此外，在传染性单核细胞增多症患儿继发多系统多器官损害中，以肝功能损伤最为常见，而有大量研究在这类肝损伤患儿身上检测出苷酶异常增高的现象，发生率高达 80%，同时有研究表示，本病重症死亡患儿中约有半数以上都发生了肝功能衰竭。不少研究甚至认为，EB 病毒并不能直接杀伤肝细胞，多因自由基异常或乙肝病毒的型过敏反应引发肝损伤。综上所述，传染性单核细胞增多症继发肝损伤患儿，多表现为持续高热、肝脾肿大、肝酶异常、异型淋巴结细胞增多，在病程早期展开肝功能检查，有助于尽早发现肝损伤，做出对症支持治疗，避免病情发展至危重阶段。参考文献 1邵彩林，吉训超 不同年龄段儿童传染性单核细胞增多症临床特点及合并肝功能异常危险因素分析J 广州中医药大学学报，2021，38(6):1102-1106 2师瑜，杨明珠，张娇蕊，等 传染性单核细胞增多症合并多种病原体感染患儿临床特征和预后研究J 陕西医学杂志，2020，49(11):1453-1456 3欧阳文献，朱咏贵，李双杰，等 儿童传染性单核细胞增多症临床特征及治疗的单中心研究 J 中华实验和临床病毒学杂志，2018，32(1):12-16 4姜涛，李黎平，易思思，等 穿孔素和颗粒酶 B 在儿童传染性单核细胞增多症肝损伤中的表达及意义J 临床肝胆病杂志，2018，34(9):1956-1959 5王华，刘晓东，许超凡，等 儿童传染性单核细胞增多症 110例临床分析J 中国感染与化疗杂志，2019，19(1):23-26 6赵昕峰，吴亦栋，陈刚，等 血清腺苷脱氨酶在儿童传染性单核细胞增多症诊断中的应用J 中华传染病杂志，2019，37(1):38-40 7樊亚楠，施逸怡，徐京杭，等 274 例青少年和成人传染性单核细胞增多症患者肝损伤临床特征分析J 临床肝胆病杂志，2021，37(3):636-641 8姚艳青，孔玮晶，丁瑛雪，等 EB 病毒传染性单核细胞增多症肝功能异常患儿的临床特征及高危因素分析J 中国医刊，2021，56(3):317-320 9邵淑容，余跃，陈漪 还原型谷胱甘肽与异甘草酸镁治疗儿童传染性单核细胞增多症所致轻中度肝酶异常的临床疗效与影响因素研究J 中国现代应用药学，2020，37(18):2258-2263 10张书婉，吴爽，徐蓓，等 儿童传染性单核细胞增多症不同抗体模式下血浆 EB 病毒核酸检出率和载量的研究J 山西医科大学学报，2018，49(12):1513-1516 11Steiner LA，Erbay A，Pache F，et al Oculomotor Nerve Palsy as aPresenting Symptom of Epstein-Barr Virus-Associated InfectiousMononucleosis:Case eport and eview of the LiteratureJ Case eports in Neurology，2021，13(3):756-762 12Wakiguchi H，Hisakawa H，Kubota H，et al Serodiagnosis of in-fectious mononucleosis in childrenJ Acta paediatrica Japonica:Overseas edition，2019，40(4):328-332 13房丽云，王洁英，吕梅，等 NL，ML 与儿童传染性单核细胞增多症的相关性研究J 中国妇幼健康研究，2021，32(11):1672-1675 14葛洁，关月，崔佳，等 儿童传染性单核细胞增多症不同抗病毒治疗策略的比较研究J 中国药物应用与监测，2021，18(5):294-296，307 15Ho-Yen DO Is the serological diagnosis of infectious mononucleo-sis always necessary?J British medical journal(Clinical re-search ed)，2019，287(6400):1187-1188收稿日期 2022 10 26(编辑倩楠)(下接第 1287 页)3Wang S，YeeH，Wen HY，et al Papillomas of the external ear ca-nal:report of ten cases in Chinese patients with HPV in situ hybrid-izationJ Head and Neck Pathol，2009，3(3):207-211 4兰建云，邵伟伟，袁苏娟，等 外耳道乳头状瘤中人乳头瘤病毒检测及其临床意义J 医学研究生学报，2010，23(4):391-393 5陈晔，顾芸，耿建祥，等 宫颈鳞癌组织中 HPV 感染型别分布情况的分析 J 国际检验医学杂志，2019，40(16):1933-1037 6夏林，王宏景，耿建祥，等 华东地区宫颈鳞状细胞癌组织 HPV感染基因型数据库建立的意义J 诊断病理学杂志，2017，24(1):7-10 7张金浩，耿建祥，路斌，等 326 例尖锐湿疣患者肛门及肛管组织 HPV 基因型检测及性别对比研究J 医学研究生学报，2017，30(12):1246-1249 8陈海涛，兰建云，翁国武，等 宫颈上皮内瘤变组织中 HPV 型别分布情况分析J 国际检验医学杂志，2018，39(22):2778-2781 9龙秀荣，姜锦贵，耿建祥，等 691 例女性外阴尖锐湿疣组织HPV 感染基因分型的研究J 国际检验医学杂志，2017，38(17):2350-2352 10季月霞，兰建云，耿建祥，等 阴道及宫颈尖锐湿疣组织中 HPV感染基因型的研究J 中国妇幼保健，2016，31(3):556-558 11Xia MY，Zhu WY，Lu JY，et al Ultrastructure and human papillo-mavirus DNA in papillomatosis of external auditory canalJ Int JDermatol，1996，35(5):337-339 12梅静，徐海燕，耿建祥，等 宫颈上皮内瘤变组织中人乳头瘤病毒感染基因型的分析 J 中国妇幼保健，2015，30(15):2333-2336 13Komlos KF，Kocjan BJ，Kosorok P，et al Tumor-specific and gen-der-specific pre-vaccination distribution of human papillomavirustypes 6 and 11 in anogenital warts and laryngeal papillomas:astudy on 574 tissue specimensJ J Med Virol，2012，84(10):1233-1241 14陈晔，黄健，耿建祥，等 宫颈鳞癌患者单一人乳头瘤病毒感染型别分布及发病年龄的研究J 东南国防医药，2020，22(6):581-586 15张金浩，耿建祥，樊志敏，等 肛管及肛门区尖锐湿疣组织中人乳头瘤病毒基因类型的研究J 医学研究生学报，2011，24(11):1129-1132 16耿建祥，黄华艺，刘建华，等 HPV 感染疾病相关问题专家共识(2017)J 医学研究生学报，2017，30(12):1238-1241收稿日期 2022 05 11(编辑羽飞)3821