动物源性食品中喹乙醇代谢物的测定解决方案.pdf

北京：北京：400-608-7719 上海：上海：021-61263966 天津：天津：400-633-6606 广州：广州：020-85593520 成都：成都：028-86612625 沈阳：沈阳：024-22943513 石家庄：石家庄：0311-66686220 青岛：青岛：0532-83725230 济南：济南：0531-83681355 重庆：重庆：023-62568657 动物源性食品中喹乙醇代谢物的测定解决方案动物源性食品中喹乙醇代谢物的测定解决方案（参考 GB/T 20746-2006 牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法）喹乙醇是一种饲料添加剂，能提高饲料转化率，促进牲畜生长。但对大多数动物有明显的致畸作用，对人也有潜在致畸性，致突变，致癌作用。因此喹乙醇在美国和欧盟都被禁止用作饲料添加剂。中国兽药典（2005 版）也有明确规定，喹乙醇被禁止用于家禽及水产养殖。喹乙醇在体内不稳定，在动物体内能短时间内产生十多种代谢物，其中 3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA)是其主要代谢产物之一，在体内相对稳定，是国际食品法典委员会认定的标示残留物之一。我国农业部规定肌肉和肝脏组织中的最大残留限量分别为 4 g/kg 和 50 g/kg。方法方法优势优势 迪马科技建立猪肉、猪肝等动物源性食品中喹乙醇代谢物解决方案，对比GB/T 207462006 牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法，本方案：1.不需要甲酸溶液消化、蛋白酶酶解、盐酸酸化等复杂操作步骤，采用 2%甲酸乙酸乙酯作为提取液，采用 ProElut PXA 固相萃取柱，水、甲醇淋洗，2%甲酸乙酸乙酯洗脱；2.简化前处理步骤，降低实验成本，节省大量时间，并降低基质效应的影响，回收率达 85%以上，保证实验结果的准确性、重现性；3.方法检出限为 0.27 g/kg，较国标方法GB/T 20746-2006 牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 的方法检测限 0.5 g/kg 低，可供广大分析工作者使用。以下为详细解决方案，敬请参考！1、适用范围适用范围 适用于猪肉、猪肝等动物源性食品中喹乙醇代谢物 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 北京：北京：400-608-7719 上海：上海：021-61263966 天津：天津：400-633-6606 广州：广州：020-85593520 成都：成都：028-86612625 沈阳：沈阳：024-22943513 石家庄：石家庄：0311-66686220 青岛：青岛：0532-83725230 济南：济南：0531-83681355 重庆：重庆：023-62568657 的检测，检出限是 0.27 g/kg，定量限是 0.63 g/kg。2、提取提取(1)取 2.0 g 样品，加入 5 g 无水硫酸钠，搅匀，加入 15 mL 2%甲酸乙酸乙酯，涡旋混合，振荡 5 min，8000 rpm 下离心 2 min，收集上清液；(2)将下层残留物用 10 mL 2%甲酸乙酸乙酯按照步骤(1)重复提取一次，合并两次上清液；(3)将上清液在 35 水浴条件下，减压蒸至近干，再加入 10 mL 2 mo/L HCl水溶液超声溶解，转移至 15 mL 离心管中，6000 rpm 下离心 2 min，取 5 mL下层清液，待净化。3、净化净化 ProElut PXA 150 mg/6 mL（Cat.#68304）a 活 化：5 mL 甲醇，5 mL 水活化；b 上 样：c 淋 洗：加入待净化液，弃去流出液；加入 10 mL 水，5 mL 甲醇，弃去流出液；d 洗 脱：加入 5 mL 2%甲酸乙酸乙酯，收集流出液；e 重新溶解：将流出液在 35 下减压蒸馏至干，用甲醇定容至 1 mL，供LC-MS/MS 分析。4、色谱、色谱条件条件 4.1 液相条件液相条件 色谱柱：Endeavorsil C18,100 2.1 mm,1.8 m（Cat.#87003）流 速：0.2 mL/min 进样量：5 L 柱 温：35 流动相：0.2%甲酸水：乙腈=40：60 北京：北京：400-608-7719 上海：上海：021-61263966 天津：天津：400-633-6606 广州：广州：020-85593520 成都：成都：028-86612625 沈阳：沈阳：024-22943513 石家庄：石家庄：0311-66686220 青岛：青岛：0532-83725230 济南：济南：0531-83681355 重庆：重庆：023-62568657 4.2 质谱条件质谱条件 电离模式：ESI 扫描方式：正离子扫描 检测方式：多反应监测 电喷雾电压：5500 V 雾化气压力：50 psi 辅助气压力：50 psi 气帘气压力：20 psi 离子源温度：500 定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表 药物名称 定性离子对（m/z）(母离子/子离子)定量离子对（m/z）(母离子/子离子)碰撞气能量/V 去簇电压/V 3-甲基-喹噁林-2-羧酸 189.1/145.1 189.1/145.1 17 51 189.1/142.9 19 5、添加回收结果添加回收结果 猪肉和猪肝中喹乙醇代谢物 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的 LC-MS/MS 检测添加回收结果 基质 分析物 添加水平(g/kg)回收率(%)猪肉 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 1.0 92.7 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 2.0 91.5 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 5.0 88.0 猪肝 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 1.0 97.9 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 2.0 902 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 5.0 93.8 XIC of+M R M (2 pairs):189.100/145.100 D a ID:1 from Sam ple 16(5ppb-1)of 20150114.w iff(Turbo Spray)M ax.2.0e4 cps.0.00.20.40.60.81.01.21.41.61.82.02.22.42.62.83.03.23.43.63.84.04.24.44.64.8Tim e,m in2000.03000.04000.05000.06000.07000.08000.09000.01.0e41.1e41.2e41.3e41.4e41.5e41.6e41.7e41.8e41.9e42.0e42.1e42.2e4Intensity,cps1.72 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸多反应监测色谱图 北京：北京：400-608-7719 上海：上海：021-61263966 天津：天津：400-633-6606 广州：广州：020-85593520 成都：成都：028-86612625 沈阳：沈阳：024-22943513 石家庄：石家庄：0311-66686220 青岛：青岛：0532-83725230 济南：济南：0531-83681355 重庆：重庆：023-62568657 相关产品信息相关产品信息 货号货号 名称名称 规格规格 样品前处理样品前处理 68304 混合型阴离子萃取柱 ProElut PXA 150 mg/6 mL 30/pkg 244358 12 管防交叉污染真空 SPE 萃取装置 12 位 4803 1,3,6mL 柱管通用连接器 15/pk 4806 考克(控制流量)15/pk 99011 真空/正压两用泵，无油 1/pk 99013 抽滤瓶套装(包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞)1/pk 30039 FitMax 针头式过滤器 Nylon 13 mm,0.22 m 100/pk 30040 FitMax 针头式过滤器 Nylon 13 mm,0.45 m 100/pk 色谱柱及保护柱色谱柱及保护柱 87003 UHPLC 色谱柱 Endeavorsil C18 100 x 2.1 mm,1.8 m HPLC溶剂溶剂 缓冲盐缓冲盐 离子对试剂离子对试剂 50101 乙腈 HPLC 级 4 L 50102 甲醇 HPLC 级 4 L 50104 乙酸乙酯 HPLC 级 4 L 50144 甲酸 HPLC 级 50 mL 通用色谱产品通用色谱产品 52401B 瓶架/蓝色 50 孔 52401A 瓶架/白色 50 孔 1034 样品瓶（棕色/螺纹）2 mL,100/pk 1035 样品瓶盖/含垫（已经组装）100/pk H80465 HPLC 进样针 25 L 红色产品货号红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035 火热促销中火热促销中