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83 HPLC方法分析食品中酚类防氧化剂方法分析食品中酚类防氧化剂 食品中的某些成分如果暴露在空气中，则生成各种氧化物，造成品质劣化。因此，各种防氧化剂用作食品添加剂。本文介绍用于油脂制食品中的酚类防氧化剂的HPLC分析法。在日本，作为食品添加剂使用的酚类氧化防止剂有BHT（二丁基羟基甲苯），BHA（丁基羟基茴香醚），NDGA（去甲二氢化愈创木酸），PG（没食子酸丙酯）等4种，被容许用于黄油、海鲜冷冻品、海鲜干制品等食品中。本文介绍在上述4种成分及其他国家使用的5种酚类防氧化剂的共9种成分的样品分析例。?使用梯度洗脱法的使用梯度洗脱法的9种成分同时分析种成分同时分析 图1（左）表示对酚类防氧化剂9成分使用梯度洗脱法进行同时分析（UV检测）的例子。将各成分25mg/L（甲醇溶液）的样品10L进样。图1（右）为同一条件的荧光检测结果。TBHQ,NDGA，OG，PG，DG，BHA这6种成分与UV检测相比，灵敏度和选择性增高。另外，对于TBHQ，NDGA，BHA的3种成分，通过将荧光波长变更为短波长，可进一步提高灵敏度。图图1 标准品9成分的梯度洗脱法色谱图（各25mg/L，10L进样）(左)SPD-10Avp at 280nm,(右)RF-10AXL Ex at 275nm,Em at 365nm?黄油的分析黄油的分析 图3表示将黄油按照图2所示的方法进行前处理法后分析的例子。分析条件同表1（UV 280nm检测）。下图为黄油样品的分析结果，上图为在前处理阶段向黄油中添加浓度为20mg/L的9种酚类防氧化剂标准品时的分析结果。表表 1 分析条件 色谱柱：Shim-pack FC-ODS(4.6mmI.D.75mmL.)流动相：A:5%醋酸水溶液 B:甲醇/乙腈=1/1(v/v)B(40%)B(80%)/15min线性梯度 流速 ：1.0mL/min 柱温 ：40 检测器：SPD-10Avp at 280nm RF-10AXL Ex at 275nm,Em at 365nm84 0.5g 黄油 混匀 -20下放置 1 小时 离心 3000rpm.5min 取上清液 过滤 进样 10L 图图2 黄油样品的前处理?使用等度洗脱法的使用等度洗脱法的5种成分分析种成分分析 图4表示使用等度洗脱法进行的成分的分析例。左为使用UV检测器、右为使用荧光检测器测定的色谱图。分析条件表示在表2，各成分25mg/L（甲醇溶液）的样品10L进样。通过增加有机溶剂浓度，也可分析HMBP，OG，BHT，DG。适于特定成分的常规分析。表表2 分析条件 图图4 标准品5种成分的等度洗脱法色谱图(左)SPD-10Avp，280nm,(右)RF-10AXL Ex，275nm,Em，365nm 注：数据出自日本CSC 图图3 黄油的分析(上)样品:添加20mg/L(下)样品 表表 2 分析条件 色谱柱：Shim-pack FC-ODS(4.6mmI.D.75mmL.)流动相：5%醋酸水溶液/甲醇/乙腈=6/2/2(v/v/v)流速 ：1.0mL/min 柱温 ：40 检测器：SPD-10Avp，280nm RF-10AXL Ex，275nm,Em，365nm加硫酸钠 1g，乙腈/异丙醇/乙醇=2/1/1(v/v/v)5 mL