动物源性食品组织样品中硝基呋喃代谢物快速前处理--液相色谱-串联质谱法测定.pdf

兽药残留前处理类-QC001-8动物源性食品组织样品动物源性食品组织样品中中硝基呋喃代谢物快速硝基呋喃代谢物快速前处理前处理液相色谱液相色谱-串联质谱法串联质谱法测定测定企业名称：北京六角体科技发展有限公司生产厂址：北京市通州区中关村科技园区通州园金桥科技产业基地景盛南四街 15 号 12C电话：[phone]传真：[phone]邮编：101102商城网址：http：/www.L技术支持：技术支持：18910713917/13381289182/13381072316共 2 页 第页售后服务电子商城11 1范围范围本方法规定了动物源性食品组织样品中硝基呋喃代谢物 AMOZ、SEM、AHD 和 AOZ 残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。2 2检测原理检测原理由于动物源性食品组织样品中硝基呋喃代谢物在肌肉组织中的特殊残留形式及其低下限的标准规定，前处理方法存在前处理时间长、操作步骤繁琐、检测成本高等多年来尚未解决的问题。本方法可先将硝基呋喃代谢物在 15 min 内快速衍生，衍生化产物被另一种试剂萃取，萃取液经固相萃取净化后即可用液相色谱-质谱联用仪检测，内标法定量。该方法具有以下创新点：2.1 新型衍生化技术：将硝基呋喃代谢物的衍生时间由原有 16 小时缩短至 15 min。2.2 试剂用量少，对环境污染小，同时对操作人员的健康危害小。2.3 操作简便、快速，结果稳定可靠。3 3试剂与材料试剂与材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。3.1 快速检测试剂盒规格：20 样/盒名称名称数量数量名称名称数量数量名称名称数量数量检测试剂 A2 瓶检测试剂 B1 瓶衍生化试剂2 瓶提取剂 120 管提取剂 24 瓶固相萃取柱20 支3.2 甲醇：色谱纯。3.3 标准品：对应检测项目的标准物质及对应内标物质，纯度大于 98%。3.4 硝基呋喃代谢物标准储备溶液（100 g/mL）：称取适量的四种硝基呋喃代谢物标准物质，分别用甲醇稀释成 100 g/mL 的标准储备液，避光保存于-18 冰柜中，可使用六个月3.5 硝基呋喃代谢物混合标准中间液（1 g/mL）：吸取适量四种硝基呋喃代谢物的标准储备溶液，用甲醇稀释成 1 g/mL 的混合标准中间溶液，避光保存于-18 冰柜中，可使用三个月。3.6 硝基呋喃代谢物内标储备液的配制参照 3.4 中溶液的配制方法，硝基呋喃代谢物内标混合标准中间液的配制参照 3.5 中溶液的配制方法。4 4仪器和设备仪器和设备4.1 绞肉机/均质机、离心管架、天平、离心机、超声波提取器、移液枪、振荡器。4.2 50 mL 离心管、5 mL 离心管。4.3 固相萃取装置（含真空泵）。4.4 微孔滤膜：0.2 m，有机相。4.5 液相色谱-串联质谱仪。兽药残留前处理类-QC001-8动物源性食品组织样品动物源性食品组织样品中中硝基呋喃代谢物快速硝基呋喃代谢物快速前处理前处理液相色谱液相色谱-串联质谱法串联质谱法测定测定企业名称：北京六角体科技发展有限公司生产厂址：北京市通州区中关村科技园区通州园金桥科技产业基地景盛南四街 15 号 12C电话：[phone]传真：[phone]邮编：101102商城网址：http：/www.L技术支持：技术支持：18910713917/13381289182/13381072316共 2 页 第页售后服务电子商城25 5样品制备样品制备称取 5.0 g 绞碎或均质后的组织样品于 50 mL 离心管中，加入 3 mL 检测试剂 A，1.0 mL 衍生化试剂，充分混匀，置于 65 超声波提取器中，超声 15 min（期间摇匀 23 次）。取出后加入 2.5 mL 检测试剂 B，振荡 23 min 混匀；再加入 1 管提取剂 1、5 mL 提取剂 2，振荡 10 min，8000 r/min 离心 5 min。用 5.0 mL 提取剂 2 活化固相萃取柱，取 3 mL 上清液（切勿取到下层）过柱，收集流出液，60 下氮吹至近干，残渣用 1.0 mL,水溶解，同时加 1.0 mL 正己烷去除杂质，4000 r/min 离心 5 min，下层水相即为硝基呋喃代谢物待测液。注：本步操作可在固相萃取装置上进行，具体过程如下：注：本步操作可在固相萃取装置上进行，具体过程如下：1）把所需数量的固相萃取柱连接好注射器筒并安装在固相萃取装置上，打开上下接头阀门，用 5.0 mL提取剂 2 活化固相萃取柱。2）将 5 mL 离心管对应固相萃取柱的位置放入测试液收集架上，并将其置于废液收集缸中，将上盖板盖在收集缸上，确保将上盖板下方的管道与离心管对准；取 3 mL 上清液（切勿取到下层）过柱，收集流出液。3）将流出液在 60 下氮吹至近干，残渣用 1.0 mL,水溶解，同时加 1.0 mL 正己烷去除杂质，4000 r/min离心 5 min，下层水相即为硝基呋喃代谢物待测液。将待测液过 0.2 m 滤膜，供液相色谱-串联质谱仪测定。6 6测定测定按实验室现用的硝基呋喃代谢物的液相色谱-质谱条件测定即可；如有需要，可联系生产商索要可供参考的仪器条件。7 7检出限检出限本方法硝基呋喃代谢物 AMOZ、SEM、AHD 和 AOZ 的检出限均为 0.5 g/kg。8 8含量计算关键点（分取比例）含量计算关键点（分取比例）本方法中硝基呋喃代谢物的分取比例是 3/5。咨询电话：本方法使用过程中如有疑问，可致电咨询电话：本方法使用过程中如有疑问，可致电 18910713917 咨询。咨询。