阿司匹林片的含量测定方案.pdf

阿司匹林片的含量测定方案 一一、设计背景设计背景 阿司匹林又称为乙酰水杨酸，是水杨酸的衍生物，可以从柳皮中提取出得到，经常会出现在消炎抗痘的产品中。经过近一个世纪的临床应用，证实阿司匹林能有效缓解轻等程度或中等程度的疼痛（比如常见的牙痛、头痛、神经痛、肌肉酸痛及痛经），亦可用于由感冒等发热疾病的退热治疗。阿司匹林作为非甾体类解热镇痛抗炎药的代表药物，对于治疗风湿疼痛等也有一定的疗效。近年的研究表明，阿司匹林对血小板聚集有抑制作用，长期小剂量服用能有效阻止血栓的形成，临床上常用于预防心肌梗死、人工心脏瓣膜和静脉瘘或其他手术后血栓的形成。另有研究发现，阿司匹林还可以一定程度上预防老年痴呆症，一些患有心脏病和关节风湿痛的患者,通过定时定量服用阿司匹林，老年痴呆症状的几率大大降低了。目前，临床上主要用阿司匹林的片剂，鉴于阿司匹林及其制剂在临床上有着广泛的应用，对阿司匹林的质量进行控制就显得尤为重要。本方案旨在设计阿司匹林片的含量测定方法，为阿司匹林片的质量标准提高提供一定的参考依据。二二、设计依据设计依据 经查阅资料得知，阿司匹林的质量标准已收载在中国药典（2020 年版），期刊文献资料中也涉及到了一些有关阿司匹林及其片剂的含量测定方法，阿司匹林的含量测定方法主要有酸碱滴定法和高效液相色谱法等。对于制剂的含量测定，应用最广泛的是高效液相色谱法。采用高效液相色谱法测定阿司匹林的含量可以消除辅料或其他共有杂质对其测定的干扰，能够更准确的测定其含量并有效的控制阿司匹林的质量。高效液相色谱法具有操作简单方便、测定专属性强、结果准确可靠等优点，故本设计参考中国药典（2020年版）和相关文献中提到的方法，按高效液相色谱色谱仪操作一般流程，拟采用高效液相色谱法对阿司匹林片的含量进行测定。三三、设计方案设计方案 1.仪器与材料（1）仪器 高效液相色谱仪（紫外检测器）（安捷伦 1260，安捷伦科技有限公司），电子分析天平（梅特勒 ME104E，深圳林涛仪器有限公司）（2）材料 阿司匹林片（100mg/片），由实习单位提供；阿司匹林对照品（来自中国食品药品检定研究院，纯度：99.8%），乙腈（色谱纯，国药集团工业股份有限公司），甲醇（色谱纯，国药集团工业股份有限公司），四氢呋喃（分析纯，国药集团工业股份有限公司），冰醋酸（分析纯，霍韦尔贸易（上海）有限公司），水为纯净水。2.溶液的制备（1）供试品溶液的制备 取某批次的阿司匹林片20片，精密称定，用研磨研细，取供试品细粉适量（约相当于阿司匹林10mg），精密称定，置于100ml容量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液适量，振摇使供试品溶解完全，加1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度线，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液，室温放置备用。（2）对照品溶液的制备 取阿司匹林对照品约10mg，精密称定，置于100ml容量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液适量使对照品溶解，继续加1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度线，摇匀，即得每1ml含阿司匹林约0.1mg的对照品溶液，室温放置备用。（3）空白溶液的制备 按阿司匹林片的处方，称取不含阿司匹林的辅料适量，研细，充分研磨均匀，取细粉适量，精密称定，置于100ml容量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液适量，振摇使辅料完全溶解，加1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度线，摇匀，滤过，取续滤液，即得不含阿司匹林的空白溶液，室温放置备用。3.色谱条件 色谱柱：ODS柱（4.6mm150mm，5m）。流动相：乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70），可根据试验结果调整流动相比例。流速：1.0ml/min。检测波长；276nm（可根据实验结果选择合适的检测波长，尽量选择在阿司匹林的最大吸收波长处）。进样体积：10l。进样室温度：室温。柱温：30。4.仪器操作步骤 先把高效液相色谱仪开机；更换流动相，并设置相关参数；按色谱条件要求设置流动相比例，逐渐将流速增大为1.0ml/min，设置色谱柱柱温为30，检测波长为276nm。流动相平衡色谱柱30min左右，待压力线和信号线平整，准备实验；将配制好的空白溶液、供试品溶液、对照品溶液依序放置于样品架；新建分析序列，选择其对应的采集方法和图谱处理方法，编辑样品信息并复核；样品信息包括进样顺序、样品名、样品架位置、采集方法名、图谱处理方法名、进样量等。所有样品分析完后，关闭检测器；用甲醇-水（1090）冲洗30分钟，改用纯甲醇冲洗30分钟，将流速降为零，再关机。5.方法学考察（1）取适量按上述方法制备的空白溶液、阿司匹林片的供试品溶液和阿司匹林对照品溶液，按上述色谱条件的方法进样分析，分别得到色谱图。空白溶液色谱图中应无阿司匹林检出，供试品溶液色谱图中在对应位置应有阿司匹林的色谱峰，且阿司匹林峰与相邻杂质峰应达到基线分离，理论板数按阿司匹林峰计算应不低于5000。（2）线性关系试验 取阿司匹林对照品约20mg，精密称定，置于20ml容量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液适量使对照品溶解，继续加1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度线，摇匀，即得每1ml含阿司匹林约1mg的对照品储备液。分别精密吸取制备的阿司匹林对照品储备液1.0 ml、2.0 ml、4.0 ml、6.0 ml、8.0 ml、10.0ml，分别置于25ml容量瓶中，每个容量瓶中1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度线，摇匀，即得系列浓度的阿司匹林对照品溶液。按上述色谱条件的方法，依次按浓度从低到高注入色谱仪进行分析，分别记录测定不同浓度溶液得到的色谱图中阿司匹林的峰面积，以阿司匹林的浓度（C）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标，绘制标准曲线，求得线性回归方程，相关系数R如果大于0.999，则表明本方法线性关系良好。（3）精密度试验 取适量阿司匹林对照品溶液，按照前述色谱条件，连续进样6次测定，记录各次阿司匹林的色谱峰峰面积。六次测得的阿司匹林色谱峰峰面积的相对标准偏差（RSD）如果不大于2.0%，则表明本方法精密度良好。（4）回收率试验 按阿司匹林片的处方，称取不含阿司匹林的辅料适量，研细，充分研磨均匀，取细粉适量，精密称定，置于100ml容量瓶中，精密加入浓度约为1mg/ml的阿司匹林对照品储备液10.0ml，加1%冰醋酸的甲醇溶液适量，振摇使样品完全溶解，加1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度线，摇匀，滤过，取续滤液，作为回收率试验用溶液。按此方法平行制备六份溶液。依上述色谱条件的方法，将6份回收率试验用溶液依次进样分析，分别记录阿司匹林的峰面积，计算阿司匹林的回收率，回收率应在95.0%-105.0%，RSD值不大于2.0%。（5）稳定性试验 取阿司匹林片20片，精密称定，研细，取粉末适量（约相当于阿司匹林10mg），按“2.溶液的制备”项下供试品溶液的制备方法，制备稳定性试验用溶液，并于室温放置的1、2、4、8、10、12小时按色谱条件的方法进样分析，测得阿司匹林峰面积，计算峰面积的RSD值，如果RSD值不大于2.0%，则表明供试品溶液在室温放置12小时内稳定。（6）重复性实验 取阿司匹林片20片，精密称定，研细，取粉末适量（约相当于阿司匹林10mg），按“2.溶液的制备”项下供试品溶液的制备方法，制备供试品溶液，按色谱条件的方法连续测定六次，记录色谱图，阿司匹林峰面积的RSD值应不大于20%。6样品的测定 分别取三批次的阿司匹林片20片，按“2.溶液的制备”项下供试品溶液的制备方法，制备供试品溶液，每批次样品平行制备两份供试品溶液，按上述色谱条件的方法进行测定，求得每批次阿司匹林片的标示百分含量。四四、设计小结设计小结 按照以上设计方案配制相关样品溶液和对照品溶液，设定色谱条件，进行方法学考察，对样品进行测定，最终求得阿司匹林片的标示百分含量，本品含阿司匹林应为标示量的95.0%-105.0%。本方案仅为预实验方案，若阿司匹林的分离度达不到试验预期的要求，可通过优化色谱条件提高分离效果，如调整乙腈的比例，改用其他长度的色谱柱等。五五、参考资料参考资料 1 国家药典委员会.中华人民共和国药典（第二部）M.北京：中国医药科技出版社，2020.666.2欧阳卉，唐倩.药物分析(第三版)M.北京:中国医药科技出版社,2017.3葛炜炜.高效液相色谱法测定复方阿司匹林片剂的含量J.临床医药文献电子杂志,2019,6(30):169.4董文珠.HPLC法测定金羚感冒片中阿司匹林含量分析J.中外女性健康研究,2019(24):180-181.5韦静.阿司匹林的药理学和临床应用J.饮食科学,2017(22):16.