222-动物细胞融合与单体克隆抗体高中生物人教版选修3-现代生物科技专题7846ppt-PPT课件.pptx

神州四号神州四号无人飞船无人飞船举行了两场举行了两场别开生面的别开生面的“集体婚礼集体婚礼”太空上的太空上的“集体婚礼集体婚礼”第一批第一批“新人新人”：黄花烟草黄花烟草叶肉细胞和叶肉细胞和革新一号烟草革新一号烟草叶肉细胞叶肉细胞(1)(1)(2)(3)(4)(5)太空烟草太空烟草第二批第二批“新人新人”：小鼠小鼠B淋巴细胞淋巴细胞和和骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 一、动物细胞融合一、动物细胞融合物理法：电激物理法：电激化学法：聚乙二醇（化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：生物法：灭活的灭活的病毒病毒 1、概念：动物细胞融合也称、概念：动物细胞融合也称_,是指是指_或或_动物细胞结合形成动物细胞结合形成_细胞细胞的过程的过程.成功的标志：形成成功的标志：形成 细胞细胞细胞杂交细胞杂交两个两个多个多个一个一个 2、诱导方法、诱导方法单核单核用用灭活的病毒灭活的病毒诱导动物细胞融合诱导动物细胞融合病毒为什么要病毒为什么要灭活灭活？诱导融合的诱导融合的原理原理是什么？是什么？仙台病毒仙台病毒疱疹病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒新城鸡瘟病毒紫外线紫外线丧失感染性丧失感染性（不感染细胞）（不感染细胞）保留融合活性保留融合活性（诱导细胞融合）（诱导细胞融合）3、动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同、动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同植物体细胞杂交植物体细胞杂交 动物细胞融合动物细胞融合是否需要去除是否需要去除细胞壁细胞壁诱导融合的方诱导融合的方法法是否需要筛选是否需要筛选是否将杂种细是否将杂种细胞培育成完整胞培育成完整个体个体理论基础理论基础意义意义是是否否物理法、化学法物理法、化学法物理法、化学法、物理法、化学法、生物法（灭活的病毒）生物法（灭活的病毒）是是是是是是否否细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、植物细胞的全能性植物细胞的全能性细胞膜的流动性细胞膜的流动性打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能1、传统制备抗体的方法及缺点、传统制备抗体的方法及缺点v方法方法 v缺点缺点产量低产量低纯度低纯度低特异性差特异性差二、单克隆抗体要提高产量和纯度怎么办？要提高产量和纯度怎么办？让产生所需抗体的让产生所需抗体的B淋巴细胞淋巴细胞大量增殖大量增殖但正常情况下但正常情况下B淋巴细胞不能大量淋巴细胞不能大量增殖，怎么办？什么细胞能大量增增殖，怎么办？什么细胞能大量增殖，甚至无限增殖？殖，甚至无限增殖？瘤细胞（癌细胞）瘤细胞（癌细胞）二、单克隆抗体二、单克隆抗体B淋巴细胞：淋巴细胞：优点优点_ 缺点缺点_骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞:优点优点_ 缺点缺点_第二批第二批“新人新人”小鼠小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞淋巴细胞和骨髓瘤细胞有幸被送上有幸被送上太空，举行太空，举行“婚礼婚礼”能产生特异性抗体能产生特异性抗体不能无限增殖不能无限增殖能无限增殖能无限增殖不能产生特异性抗体不能产生特异性抗体利用这两利用这两种细胞的种细胞的优点，如优点，如何才能制何才能制备出备出纯度纯度高，特异高，特异性强性强的单的单克隆抗体克隆抗体？以制备抗以制备抗以制备抗以制备抗流感病毒流感病毒流感病毒流感病毒的单克隆抗体为例，的单克隆抗体为例，的单克隆抗体为例，的单克隆抗体为例，结合教材结合教材结合教材结合教材P53P53P53P53图图图图2-242-242-242-24单克隆抗体的制备过单克隆抗体的制备过单克隆抗体的制备过单克隆抗体的制备过程示意图程示意图程示意图程示意图,完成学案中表格的完成学案中表格的完成学案中表格的完成学案中表格的填写填写填写填写，并与，并与，并与，并与同桌讨论同桌讨论同桌讨论同桌讨论每一步骤后面的问题每一步骤后面的问题每一步骤后面的问题每一步骤后面的问题免疫小鼠免疫小鼠培养骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合融合骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞B B淋巴细胞淋巴细胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋白选择培养基上培养选择培养基上培养专一抗体专一抗体检验阳性检验阳性既能无限增殖又能既能无限增殖又能产生特异性抗体产生特异性抗体专一抗体专一抗体检验阳性检验阳性注射到小鼠体内注射到小鼠体内体外培养体外培养纯度高、特异性强，并可大量制备纯度高、特异性强，并可大量制备单克隆抗体单克隆抗体克隆杂交细胞克隆杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞专一抗体，检验阳性细胞多种杂交细胞多种杂交细胞杂交瘤细胞有何特点？杂交瘤细胞有何特点？抗原要灭活使其失去感抗原要灭活使其失去感染性而保持抗原特性染性而保持抗原特性（只考虑两两融合）培养（只考虑两两融合）培养液中有几种融合细胞？液中有几种融合细胞？2 2、单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程与传统制备的抗体相比与传统制备的抗体相比具有什么特点？具有什么特点？B-B B-瘤瘤 瘤瘤-瘤瘤免疫小鼠免疫小鼠培养骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合融合骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞B B淋巴细胞淋巴细胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋白选择培养基上培养选择培养基上培养专一抗体专一抗体检验阳性检验阳性专一抗体专一抗体检验阳性检验阳性注射到小鼠体内注射到小鼠体内体外培养体外培养单克隆抗体单克隆抗体克隆杂交细胞克隆杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞专一抗体，检验阳性细胞多种杂交细胞多种杂交细胞本过程利用的那些技术？本过程利用的那些技术？动物细胞融合动物细胞融合动物细胞培养动物细胞培养2 2、单克隆抗体制备过程、单克隆抗体制备过程 依据的理论基础是什么？依据的理论基础是什么？动物细胞融合、细胞增殖动物细胞融合、细胞增殖免疫小鼠免疫小鼠培养骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合融合骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞B B淋巴细淋巴细胞胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋白筛选筛选注射到小鼠体内注射到小鼠体内体外培养体外培养单克隆抗体单克隆抗体克隆克隆多种杂交细胞多种杂交细胞3 3、单克隆抗体的概念、单克隆抗体的概念由一个由一个_进行进行_产生的产生的_的抗体的抗体B淋巴细胞淋巴细胞无性繁殖无性繁殖纯度高、特异性强纯度高、特异性强筛选筛选4、单克隆抗体的应用、单克隆抗体的应用作为诊断试剂作为诊断试剂用于治疗疾病和运载药物用于治疗疾病和运载药物一、动物细胞融合（细胞杂交）一、动物细胞融合（细胞杂交）本课小结本课小结1、原理：、原理：2、诱导方法：、诱导方法：3、意义：、意义：4、应用：、应用：细胞膜的流动性、细胞增殖细胞膜的流动性、细胞增殖物理法、化学法、生物法物理法、化学法、生物法 （灭活的病毒）（灭活的病毒）打破生殖隔离、克服远缘杂交不亲打破生殖隔离、克服远缘杂交不亲和的障碍和的障碍制备单克隆抗体制备单克隆抗体二、单克隆抗体1、制备过程：2、所运用的技术手段：3、依据的原理：4、优点：5、应用：动物细胞融合、动物细胞培养动物细胞融合、动物细胞培养细胞膜的流动性、细胞增殖细胞膜的流动性、细胞增殖纯度高、特异性强、可大量制备纯度高、特异性强、可大量制备（注射抗原的目的、两次筛选的目的）（注射抗原的目的、两次筛选的目的）作为诊断试剂作为诊断试剂用于治疗疾病和运载药物用于治疗疾病和运载药物【当堂巩固当堂巩固】完成学案单选题和双选完成学案单选题和双选 题题【作业布置作业布置】课时作业课时作业P15-16谢谢 谢谢！