3M-ATP荧光检测仪-表面蛋白检测棒资料.pdf

2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety3M Clean-Trace ATP荧光检测仪荧光检测仪(3M Clean-Trace NG Luminometer)1 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food SafetyFor the food and beverage industry,the goal is to deliver a safe,high-quality product.In a marketplace where food-borne illness can make or break your reputation,cleaning and sanitation are critical to protecting your business.Take afresh lookat food safetytechnology 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety荧光素(Luciferin)/荧光素酶(Luciferase)3在细胞中，在细胞中，ATP通过脱去磷酸基来释放能量通过脱去磷酸基来释放能量荧光素获得荧光素获得ATP释放的能量后发光释放的能量后发光检测原理检测原理 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety微生物或食物残留量的增加微生物或食物残留量的增加ATP 水平的增加水平的增加发光强度发光强度(RLU)检测原理检测原理4 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety关于关于 ATP ATP量与活细胞量成一定正比5大肠杆菌悬浊液的ATP 浓度和细菌数 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety关于关于 ATP ATP 含量与菌的种类、大小和细胞所处的生长周期有关6 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety关于关于 ATP ATP对热稳定，加工后的原料中或残渣中ATP 仍然存在7 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food SafetyATP荧光检测与微生物检测的关系8 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food SafetyClean-Trace表面采样棒9 用于检测表面卫生的简单用于检测表面卫生的简单，完备的测试工具完备的测试工具 专门用作专门用作清洁后表面的洁净程度清洁后表面的洁净程度 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety3MTMClean-Trace ATP荧光检测系统10采样采样15秒秒+激活激活5秒秒+检测检测10秒秒=结果结果30秒秒采样棒采样棒高效高效ATP提取剂提取剂液态稳定荧光素液态稳定荧光素/荧光酶荧光酶 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety涂抹采样涂抹采样11采集有代表性代表性的样品对于获得被测表面卫生状态的真实和准确信息非常关键 采样头与表面的充分接触充分接触、整个采样头被接触以确保污物的高效负载非常关键 所有操作者要执行统一一致统一一致的涂抹方式以得到可重复的结果可重复的结果 避免涂抹过于潮湿的区域过于潮湿的区域，因为这样会稀释样品和采样头上的ATP提取剂 对于非平整表面非平整表面比如管内壁，确保有足够的采样面积足够的采样面积，并且保持统一统一一致一致的涂抹方式 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety采样方法 每次涂抹操作保证一致12用食指和拇指握住涂抹棒手柄，以便旋转涂抹棒不要碰触采样头向下压涂抹中不断旋转涂抹棒使采样棒与待测表面成30度夹角度夹角，用力轻压采样棒致其弯曲，使采样头紧贴待测位点紧贴待测位点。来回涂抹2次。应根据结构和形状，采取相应的有效涂抹手法。各点涂抹手法可以不同，但：同一位点每次涂抹时手法要一致。同一位点每次涂抹时手法要一致。2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety采样程序采样程序 10cm x 10cm/4”x 4”平整表面131.从一边到另一边水平涂抹2.持续上述操作直至划过整个区域3.由上向下垂直重复上述涂抹4.持续上述操作直至涂抹完整个表面1234 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety检测检测145.完成涂抹后，将采样棒放回试管中6.打开检测仪并让其进行背景检测7.通过将蓝色手柄向下压入管内，激活3M Clean-Trace Surface 系统 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety检测检测158.激活后，快速来回振荡采样棒约5秒钟，充分混合试剂9.立即将3M Clean-Trace 表面ATP涂抹棒插入到检测仪中进行检测10.测得结果表示为相对光单位(RLU)2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety检测检测 注意点注意点16一旦采样完，在激活采样棒以前，允许最多4个小时后进行检测 在准备进行检测时，再向下压入蓝色手柄激活反应。一旦激活后，检测必须在30秒内进行 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety注意点注意点/储存储存17确保3M Clean-Trace ATP表面涂抹棒在过期日期前使用 确保 3M Clean-Trace ATP表面涂抹棒正确的储存 不要接触3M Clean-Trace ATP表面涂抹棒的内表面和待测表面，否则将带来污染，造成假阳性或“不合格”的结果 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety注意点注意点/储存储存18长时间 保持 3M Clean-Trace ATP表面涂抹棒在2-8 oC下冷藏 使用前，将试剂从冰箱取出后放置至少5分钟以使其平衡至室温 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety要点要点 灵敏度 2x 背景浓度 1飞摩尔 ATP 6 x 108个ATP分子“平均”一个真菌约含1飞摩尔约需 1000 个“平均”细菌引起3M Clean-Trace Surface 检测的阳性反应不能证明无菌.实际情况中没有“平均”19 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food SafetyRLU 和和 CFU20相对光单位不等于菌落形成单位相对光单位不等于菌落形成单位RLU =CFU 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety要点要点 RLU不等于CFU 对于实验室的纯菌培养，两者有很好的相关性！在“现实环境”里，实际为混合培养大的细胞含有更多的ATP环境中某些细菌不在菌落总数平板上生长絮凝菌群/生物膜结块=1 CFU 检测的是清洁清洁而并非CFU21 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety检测温度检测温度22 15-25 C 为最佳温度 温度的一致性是关键 试剂从冰箱取出后放置5-10分钟再使用(某些客户在使用阳性对照时会忘记这一点)室内温度低影响不大，只要确保温度一致性或使试剂平衡一段时间(15-20 分钟)检测开始前，用于Clean-Trace ATP水质采样棒检测的水样最好保持温度在30 C以下 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety不同的残留物不同的残留物23 不同的产品含有不同水平的ATP(比如牛奶vs 橙汁)检测结果足够显著 根据实际情况，适当调节合格/不合格水平线 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety不太适合的应用不太适合的应用24 这些食品含有很少的ATP 蛋白(全蛋除外)精制油品 黑巧克力 燃烧过的残渣 生产干燥产品(如粉末类)的企业：清洁后残留有有大量的ATP 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety鱼鱼/甲壳类动物甲壳类动物/海产品海产品25 ATP含量非常高 难以清洗 检测结果相对较高!2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety高度污染的表面高度污染的表面26 谨慎通过此种表面的采样来展示较高的结果 结果可能偏低 最适合于轻度污染的检测 高度的污染会“淬灭”检测信号 适合于预清洗后的表面 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety消毒剂的淬灭作用消毒剂的淬灭作用27 一般，标准浓度下使用的消毒剂没有影响 高浓度下使用的消毒剂会降低（淬灭）信号 高浓度的氯制剂会将采样棒变为粉红色，并且使结果偏高（化学发光）上述情况表明清洗不完全 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety检测的激活检测的激活28 简单的规则 一旦激活反应，应立即振荡并开始检测 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety阳光阳光29 不宜在阳光的直射下进行检测 磷光会使结果偏高 若在户外采样，应带到室内并停顿一段时间后（等磷光衰退）再进行检测 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food SafetyClean-Trace水质采样棒30 专门检测专门检测难以用涂抹棒采样的区域清洁后的冲洗水样难以用涂抹棒采样的区域清洁后的冲洗水样。主要应用于在位清洁主要应用于在位清洁(CIP)系统系统 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety采 样31用无菌容器采集水样用无菌容器采集水样取出采样棒取出采样棒采样棒浸入到样品液采样棒浸入到样品液中，确保采样头的上中，确保采样头的上领口与液面齐平领口与液面齐平 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety激 活32轻轻地在容器内壁轻轻地在容器内壁敲击采样敲击采样棒以除气泡棒以除气泡，然后将其放回，然后将其放回试管中试管中立即通过推压红色手柄将立即通过推压红色手柄将采样棒插入到试管中，激采样棒插入到试管中，激活荧光反应。活荧光反应。2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety检 测33反应启动后，振荡反应启动后，振荡5秒充分混合秒充分混合立即放入仪器检测立即放入仪器检测读结果（读结果（RLU）2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety3M Clean-Trace 水质水质ATP涂抹棒涂抹棒为以下场合检测设计食品工业:原位清洗（CIP）清洗水快速&较脏的水质检测其他:工业工艺用水,冷却塔等.34 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety采样和检测采样和检测351.采集待测区域的水样.注意注意:必须用无菌瓶盛装并确保至少20ml 的体积,小心避免污染2.打开检测仪并让其进行背景检测。振荡，确保容器中没有气泡 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety检测检测363.将 3M Clean-Trace ATP水质采样棒从试管中拿出4.将 3M Clean-Trace ATP水质采样棒浸入到样品液，至水面与领口齐平 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety检测检测375.轻轻敲击采样棒手柄，使液体液体中中采样头上的气泡去除，然后将采样棒放回到试管中6.向下挤压红色手柄，立即激活3MClean-Trace WaterATP 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety检测检测387.快速来回振荡采样棒约5秒钟，充分混合试剂8.将3M Clean-Trace ATP 水质采样棒插入到仪器中开始检测样品9.检测结果表示为RLUs 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety注意注意 检测中检测中39 用3M Clean-Trace ATP水质采样棒检测前，确保样品的充样品的充分混合分混合 不要用3M Clean-Trace ATP 水质采样棒搅拌样液搅拌样液，因为这样会冲淡采样头上的ATP提取剂 不要将采样头浸入到领口以下领口以下，这样会影响取样体积和检测结果的可重复性 采样棒从样液中取出后不要甩动不要甩动，这样会导致取样体积的损失 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety注意注意/储存储存40长时间 在冰箱内2-8oC下冷藏 使用前，将试剂从冰箱取出后放置至少5分钟以使其平衡至室温 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety要点要点 灵敏度 1-2 飞摩尔 1000 细菌/采样 10,000 细菌/ml不能验证无菌不能证明饮水的安全性 若阳性?.10,000 细菌/ml 保质期 4oC，1年 可重复性 CV 17%41 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety423M Clean-Trace 表面蛋白检测表面食品残留和微生物中的蛋白质、蛋白质、糖和其它化合物。最低可检测 50 g 蛋白。半定量半定量 颜色越深、颜色变化越快=蛋白等越多3M Clean-Trace 表面蛋白快速检测棒表面蛋白快速检测棒 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety概述概述433M Clean-Trace 表面蛋白涂抹棒是检测蛋白、糖和其它与食品或微生物表面蛋白涂抹棒是检测蛋白、糖和其它与食品或微生物污染相联系的化合物水平污染相联系的化合物水平3M Clean-Trace 表面蛋白涂抹棒表面蛋白涂抹棒能检测低至能检测低至50 g的蛋白的蛋白半定量半定量 深色深色/快速变色快速变色=有较多蛋白存在有较多蛋白存在 绿色绿色 清洁清洁 灰色灰色 小心小心 紫色紫色 污染污染 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety44化学原理 目前世界上最常用蛋白浓度检测方法之一（目前世界上最常用蛋白浓度检测方法之一（BCA 法法）基于蛋白对二价铜离子的还原性基于蛋白对二价铜离子的还原性双缩脲反应双缩脲反应。Cu+2 Cu+1Cu+1+2 bicinchoninic acid(BCA)BCA2Cu+1BCA 绿色绿色;BCA2Cu+1深紫色深紫色 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety45化学原理 由于是基于氧化还原反应，因此检测也对除蛋白以外的其它还原性物质敏感。如：还原性糖(葡萄糖、果糖)还原性化合物(亚硫酸钠)2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety涂抹手法涂抹手法46食指与母指握住采样棒上端，确保采样棒可以被旋转不要接触采样头及其周围轻轻向下施压涂抹中不断转动采样棒 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety采样程序采样程序 10cm x 10cm/4”x 4”平整表面471.从一边到另一边水平涂抹2.持续上述操作直至划过整个区域3.由上向下垂直重复上述涂抹4.持续上述操作直至涂抹完整个表面1234 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety要要 点点48 采样头与表面的充分接触充分接触、整个采样头被接触以确保污物的高效负载非常关键 所有操作者要执行统一一致统一一致的涂抹方式以得到可重复的结果可重复的结果 对于非平整表面非平整表面比如管内壁，确保有足够的采样面积足够的采样面积，并且保持统一统一一致一致的涂抹方式 对于干燥表面，按照说明书的指导使用润湿液使用润湿液对表面或采样棒进行润湿。2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety1.涂抹待测表面涂抹待测表面2.将采样棒放回试管将采样棒放回试管3.用力将紫色手柄压入试管，用力将紫色手柄压入试管，激活检测激活检测检检 测测49 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety504.迅速来回振荡至少5秒钟，以确保试剂的充分混合。5.5.室温放置室温放置10分钟后，观察试管底部的溶液颜色，并对比管壁标签上的指示。若采样中污染水平较高，则溶液颜色将迅速变为紫色紫色；若采样很清洁，则溶液颜色将由无色变为绿色绿色。检测绿绿 清洁清洁灰灰 警惕警惕紫紫 污染污染?2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety查看采样棒标识上的颜色对照表查看采样棒标识上的颜色对照表 绿色绿色 清洁清洁 灰色灰色 警惕警惕(轻度污染轻度污染)紫色紫色 污染污染 深紫色深紫色 严重污染严重污染检测为紫色的表面应该重新清洗，然后再次检测检测为紫色的表面应该重新清洗，然后再次检测忽略任何忽略任何10分钟以后的颜色变化。任何样品在检测的分钟以后的颜色变化。任何样品在检测的10分钟以后，都将最终逐渐变为紫色分钟以后，都将最终逐渐变为紫色检检 测测51?2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety 确保确保 3M Clean-Trace 表面蛋白涂抹棒表面蛋白涂抹棒处于保质期内并且正处于保质期内并且正确储存确储存 不要接触不要接触3M Clean-Trace 表面蛋白涂抹棒的内表面或待测表表面蛋白涂抹棒的内表面或待测表面面，否则将污染检测，带来假阳性否则将污染检测，带来假阳性储存条件储存条件 可以在室温下储存可以在室温下储存.无需冷藏无需冷藏.最佳储存温度为最佳储存温度为 2 _25 C,18个月26 _35 C，2周周注意注意/储存储存52 2012 3M.All Rights Reserved.3M Food Safety3M Food Safety products are at work in more than 60 countries around the globe,to help keep businesses like yours moving forward.Our passion is to work with you to discover new food safety solutions that protect your brand,mitigate your risk and improve your operations.And every day,our 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