采用ISQ测定食品中的邻苯二甲酸酯.pdf

ApplicationNote:CM0061关键词 邻苯二甲酸酯 ISQ采用ISQ测定食品中的邻苯二甲酸酯 邓桂凤 朱曼洁 叶芳挺（Thermo Fisher Scientific,Shanghai,China）1.前言2011年5月24日，台湾发生了不法商家在食品添加剂（起云剂，又名混浊剂、乳浊剂、增浊剂）中非法添加有毒有害成分邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）的事件，造成极其恶劣的影响，导致一些使用了该商家生产的起云剂的一些食品间接受到污染，该事件引起了世界卫生组织以及我国政府的高度重视，目前国家质检总局已经采取行动阻止这些有毒食品继续流通，并且对一些食品进行召回销毁，同时也会开展对食品添加剂和食品中邻苯二甲酸酯（尤其是DEHP成分）的检测。邻苯二甲酸酯（phthalate acid esters,PAEs）是世界上生产量大，应用面广的人工合成的有机化合物之一，是一类全球性的环境污染物，广泛存在于空气、水体、土壤及生物体内，该类化合物与我们的日常生活密切相关，可通过饮水、进食、皮肤接触（化妆品）和呼吸进入人体，对人群健康产生不同程度的危害作用1。DEHP属于邻苯二甲酸酯的一种，是一种普遍用于塑胶材料的塑化剂和软化剂，因其与塑料基质间未形成化学共价键，呈游离态，当接触到所包装食品中水、油脂等时，极易溶出，更遑论直接在食品添加剂中添加。吸入和食入DEHP后会引起呼吸急促和心率的加快,如大量被吸收后可能引起中央神经系统的紊乱和肠胃不适，如长期接触，有生殖发育毒性，可能致癌、致畸2。在台湾被确认为第四类毒性化学物质，为非食用物质，不得用于食品生产加工。本文在采用GB/T 21911-2008中样品前处理的方法，介绍了用赛默飞世尔（Thermofisher）气质联用仪ISQ分析食品中的邻苯二甲酸酯，旨在为该类物质的气质检测提供一套高效合理的解决方案。2实验方法2.1 试剂和仪器方法赛默飞世尔气质联用仪(ISQ)，配置有Triplus三位一体的自动进样器（液体进样），色谱柱为TR-5MS(30m,0.25mm,0.25m)。Trace GC Ultra气相进样口温度：250；进样模式：不分流进样；0.8min开始分流，流速50ml/min程序升温：60(1min)-15/min-230(1min)-5/min-280(4mins)色谱柱：TR-5MS(30m,0.25mm,0.25m)柱流速：1mL/min 恒流模式；ISQ质谱仪具体条件如图1：2.2 样品制备32.2.1 不含油脂的液体试样分别量取混合均匀的果汁液体试样5.0ml（含有二氧化碳气的试样需先除去二氧化碳），加入正己烷2.0ml，振荡1min，静置分层（如有必要时盐析或于4000r/min离心5min），取上清液进行GC-MS分析。2.2.2含油脂试样分别称取混合均匀含油脂试样奶油0.5g（精确至0.1mg）于两个具塞三角瓶中，加入20ml石油醚涡旋混合2min，静置后提取石油醚层，再用石油醚重复洗涤三角瓶中的残渣三次，每次10ml，合并提取液经无水硫酸钠（10g）过滤，将滤液减压浓缩至干，用乙酸乙酯：环己烷（体积比1:1）定容至10.0ml，涡旋混合2min，0.45m滤膜过滤，滤液经凝胶渗透色谱装置净化，收集流出液，浓缩至2.0ml，进行GC-MS分析。图2 浓度为25ng/ml的16种邻苯二甲酸酯的选择离子图注：邻苯二甲酸二甲酯（DMP）、邻苯二甲酸二乙酯（DEP）、邻苯二甲酸二异丁酯（DIBP）、邻苯二甲酸二丁酯（DBP）、邻苯二甲酸二(2-甲氧基）乙酯（DMEP）、邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯（BMPP）、邻苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯（DEEP）、邻苯二甲酸二戊酯（DPP）、邻苯二甲酸二己酯（DHXP）、邻苯二甲酸丁基苄基酯（BBP）、邻苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯（DBEP）、邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）、邻苯二甲酸二环己酯（DCHP）、邻苯二甲酸二苯酯（diphenyl phthalate）、邻苯二甲酸二正辛酯（DNOP）、邻苯二甲酸二壬酯（DNP）2.2.3空白试验本实验中取正己烷作为空白，进行GC-MS分析3实验结果与讨论3.1 色谱分离由于邻苯二甲酸酯类物质广泛存在于溶剂及试剂瓶中，所以每次做样一定要做溶剂对照，以便排除溶剂中的干扰效应。此外，由于16种邻苯二甲酸酯的中很多组分的碎片离子相同，所以尽可能让16种邻苯二甲酸酯色谱分离，从而使定性定量更加准确。本实验中选用的色谱条件可使16种化合物的有效分离，详见图2。3.2 标准曲线及精密度配制6个梯度浓度的的混标溶液，图3为16种邻苯二甲酸酯各个浓度点的线性方程，浓度设置分别为1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml；各组分1ng/ml均能检出，取5ng/ml的点作为各组分的最低定量限，R2均大于0.995，表明线性良好（图3）。取5ng/ml的样品重复进样5次检测精密度，最终各化合物的精密度在3.69-5.26%之间（表1），方法学验证表明此方法稳定可靠。表1.16个邻苯二甲酸酯的定性定量离子及RSD序号 缩写中文名CAS分子式定量离子定性离子 RSD%1DMP邻苯二甲酸二甲酯113-11-3C10H10O4163774.762DEP邻苯二甲酸二乙酯84-66-2C12H14O41491773.693DIBP邻苯二甲酸二异丁酯84-69-5C16H22O41492234.564DBP邻苯二甲酸二丁酯84-74-2C16H22O41492234.465DMEP 邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯117-82-8 C14H18O659149,1934.666BMPP 邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯146-50-9 C20H30O41492514.977DEEP 邻苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯605-54-9 C16H22O645724.218DPP邻苯二甲酸二戊酯131-18-0 C18H26O41492375.269DHXP 邻苯二甲酸二己酯84-75-3C20H30O4149104,765.1110BBP邻苯二甲酸丁基苄基酯85-68-7C19H20O4149913.8411DBEP 邻苯二甲酸二（2-丁氧基）己酯117-83-9 C20H30O61492234.2912DCHP 邻苯二甲酸二环己酯84-61-7C20H20O41491675.1213DEHP 邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯117-81-7 C24H38O41491675.0014邻苯二甲酸二苯酯84-62-8C20H14O4149774.9515DNOP 邻苯二甲酸二正辛酯117-84-0 C24H38O42252794.1716DNP邻苯二甲酸二壬酯84-76-4C26H42O414957,715.17图3.16种邻苯二甲酸酯的线性图4从上到下分别是果汁、奶油粉末香精扣除正己烷背景后得到的色谱图3.3 样品结果本次实验使用的不含油脂样品为果汁，按照2.2.1的处理方法处理后，进样，由于前处理过程中只用到正己烷，所以需要进正己烷做溶剂对照，以扣除溶剂中的邻苯二甲酸酯类干扰物质。实中验使用的含油脂样品为奶油粉末香精，按照2.2.2的处理方法，得到基质样品进行检测。同时，将溶剂正己烷也按照2.2.2的处理方法得到溶剂对照，以扣除溶剂中的邻苯二甲酸酯干扰。具体见图4。从图中可以看出，虽然果汁中能检出DMP、DEP、DIBP、DBP、DEHP；奶油粉末香精中检出DEP、DIBP、DBP、DEHP；但各峰峰面积均低于对应的标准曲线中5ng/ml的点，故产品合格。5.参考文献1刘慧杰 舒为群.邻苯二甲酸酯类化合物的毒理学效应及对人群健康的危害.第三军医大学学报.2004,26(19):1778-17812上海烟草协会http:/xh.sh- 21911-20014.结论Thermo Fisher新款的ISQ单四级杆气质联用仪，拥有超高的抗污染能力和超高的灵敏度，本文即采用ISQ单四级杆气质联用仪检测16种PAEs，方法简便、高效、快速、准确、灵敏度高、实用性强。由于邻苯二甲酸酯样品的特殊性，其在塑料制品中的存在不可避免，所以在样品采集以及处理过程中尽使用玻璃容器。并且尽可能的选择干扰小的溶剂，从而使检测结果更加准确。Page 4 of 8Page 3 of