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小孢子淀粉测定.doc

1、中文文献: 1、花蕾中淀粉及可溶性糖含量的测定: 3,5-二硝基水杨酸法——用体积分数80%乙醇提取可溶性糖,酸水解法将淀粉水解为还原糖。提取或水解的产物与3,5-二硝基水杨酸试剂供热后在520nm波长下测定光密度值,通过计算还原性糖含量来算出可溶性糖及淀粉含量。 2、 乙醇提取硫酸蒽酮法: 称取 50 ~ 100 mg 粉碎过 100 目筛的烘干样品,置于 15 mL 刻度试管中,加入 6 ~ 7 mL 80 %乙醇,在 80 ℃水浴中提取 30 min ,取出离心( 3000 rpm ) 5 min ,收集上清液。重复提取两次(各 10 min )同样离心,收集三次上清液合并于烧杯

2、置于 85 ℃恒温水浴,使乙醇蒸发至 2 ~ 3 mL , 向沉淀中加蒸馏水 3 mL ,搅拌均匀,放入沸水浴中糊化 15 min 。冷却后,加入 2 mL 冷的 9.2 mol/L 高氯酸,不时搅拌,提取 15 min 后加蒸馏水至 10 mL ,混匀,离心 10 min ,上清液倾入 50 mL 容量瓶。再向沉淀中加入 2 mL 4.6 mol/L 高氯酸,搅拌提取 15 min 后加水至 10 mL ,混匀后离心 10 min ,收集上清于容量瓶。然后用水洗沉淀 1 ~ 2 次,离心,合并离心液于 50 mL 容量瓶用蒸馏水定容供测淀粉用。 英文文献: 1、Sucrose

3、 and starch catabolism in the anther of Lilium during its development a comparative study among the anther wall, locular fluid and microsporepollen fractions 分别在花粉的不同发育阶段的不同部分测定淀粉含量。除Xuid室外,用研钵将不同组分在氮气预冷液研磨均匀。对于每个样品,取0.1g粉末放入1.5ml离心管中,并加入1mL的0.1M(?)的磷酸钠盐缓冲液(pH约为7.5),4℃、1000转离心15min。吸取上清液用于测定可溶性糖(见下

4、沉淀物用1mL的二甲基亚砜:8N(?)盐酸(4:1)再次悬浮,然后60℃水浴加热30min,并不断搅拌。离心(1200转)15min后,吸取100微升上清液,加入100微升Lugol酸性碘溶液(0.06%(w/v)的钾化碘和0.003%(w/v)碘的005N的盐酸溶液)和1mL的重水。将样品放置室温下约15min后在600nm的吸光度下检测。 另一方面,在花粉发育的各个时期葡萄糖、果糖和蔗糖通过德国造的Scil Diagnostics GmbH, Viernheim装置检测。这样,上清液和Xuid室中所含的可溶性糖便可检测出。淀粉和可溶性糖的单位均为mg/g(花粉鲜重)。 2、Anth

5、er starch variations in Lilium during pollen development 新鲜花粉和同花的花芽在室温下用Fontainebleau砂和二甲基亚砜:8N盐酸(8:2)的混合物研磨2分钟,然后60℃加热30分钟并不断搅拌使花粉完全溶解。用30ml蒸馏水冷却后,过滤并将滤液稀释至100ml。吸取100微升的样品用于淀粉含量的检测。在淀粉葡萄糖苷酶的作用下,淀粉水解为葡萄糖。葡萄糖被己糖激酶磷酸化葡糖-6-磷酸,接着在NADP的作用下氧化为葡糖-6-磷酸盐,同时通过葡糖-6-磷酸脱氢酶的作用形成NADPH。NADPH是数量可在340nm吸光度下测得。同时做一个无淀粉葡糖糖苷酶的空白试验。花药发育的每个时期至少检测三次。 3 / 3

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