2免疫球蛋白.pptx

抗体抗体B细胞增殖分化为浆细胞后产生的一种球蛋白，具有免疫功能。抗体最早用于白喉的治疗。贝林和北里柴三郎因此获得诺贝尔医学和生理学奖。抗体的产生部位抗体的产生部位p13由脾脏和淋巴结的B细胞产生，主要是IgGp23由粘膜相关淋巴组织的B细胞产生，主要是IgAp70Kg的成年人每天产生的抗体的量是3gpIgG的半衰期是3周p记忆B细胞主要存在于骨髓免疫球蛋白免疫球蛋白具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。分泌型：存在于体液中，即抗体膜型：存在于细胞膜，即B细胞的抗原受体第一节第一节 免疫球蛋白的结构免疫球蛋白的结构一.Ig的基本结构（一）四肽链 糖蛋白，由 2条相同的重链（H）和轻链（L）组成，重链间、重链和轻链间以二硫键相连。（二）可变区（V）和恒定区（C）高变区 骨架区可变区N端C端抗原的互补决定区（抗原的互补决定区（CDR）与）与抗原表位结合示意图抗原表位结合示意图 高变区序列与抗原表位在空间上互补，又称为互补决定区。（三）（三）Ig 的型、类，亚型、亚类的型、类，亚型、亚类1.根据CL分子量和等电点不同轻链分成两型：、，亚型:142.根据CH分子量和等电点不同重链分成5类：H链 对应Ig IgM IgG IgA IgD IgE亚类：IgG14，IgA12二二.Ig 功能区功能区 Ig的每条链内还有二硫键，这些链内二硫键圈住了110个氨基酸，形成的环称为结构域。含有Ig结构域的蛋白质分子的集合称为免疫球蛋白超家族。该家族成员多数为细胞膜表面分子，与细胞之间相互接触有关，但没有酶活性。免疫球蛋白超家族免疫球蛋白超家族二二.Ig 功能区功能区（一）功能区（结构域）L链：VL，CLH链：VH，CH1，CH2，CH3，（CH4）铰链区：位于CH1和CH2之间，含有大量脯氨酸，有弹性，有利于V区结合抗原，V区暴露补体结合位点。二二.Ig 功能区功能区（二）各功能区的主要功能VL，VH：特异性结合抗原CL，CH：Ig 遗传标记IgG的CH2，IgM的CH3：结合补体IgG的CH3，IgECH2，CH3：亲细胞活性三三.J链和分泌片链和分泌片J链：浆细胞合成的糖蛋白，将Ig单体连接成二聚体或多聚体。单体：IgG，IgE，IgD二聚体：分泌型IgA五聚体：IgM分泌片：粘膜上皮细胞合成的糖蛋白，是分泌型IgA的辅助成分，有抵抗蛋白酶的水解、介导IgA转运的作用。四四.IgG的水解片段的水解片段1.木瓜蛋白酶的水解片段裂解部位：H链链间二硫键近N端裂解片段：两个Fab 段（抗原结合段），一个Fc段（在低温下可结晶段）2.胃蛋白酶水解片段裂解部位：H链链间近C端裂解片段：一个F（ab）2，一个Fc（继续水解成pFc）五五.免疫球蛋白的立体结构免疫球蛋白的立体结构X 射线晶体衍射分析 Ig 结构域具有-桶状立体结构：两组片层通过分子内二硫键连接。抗体结合价 Ig结合抗原表位的数目。抗体单体是两价。分泌型IgA是四价，而IgM是十价。第二节免疫球蛋白的功能第二节免疫球蛋白的功能（三结合，一进入）（三结合，一进入）一.IgV区的功能 识别并特异性结合抗原，发挥中和作用达到中和毒素、阻止病原菌入侵的免疫效应。中和作用：封闭病原体或其产物的结合位点使其不再感染细胞的效应。中和抗体：能发挥中和作用的抗体。中和作用中和作用二二.IgC.IgC区的功能区的功能（一）结合补体，将补体激活（二）结合细胞表面Fc受体（三）抗体调理作用（四）穿过胎盘和粘膜（一）激活补体经典途径，溶解抗原靶细胞（一）激活补体经典途径，溶解抗原靶细胞结合细胞表面Fc受体1.调理作用 抗体（IgG、IgA）的Fc段与中性粒细胞、巨噬细胞表面的Fc受体结合，促进吞噬细胞吞噬细菌等颗粒性抗原的作用。抗体介导的调理作用抗体介导的调理作用2.抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用（ADCC）2.抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用（ADCC）具有杀伤活性并表达Fc受体的细胞（NK细胞、巨噬细胞、中性粒细胞）通过识别抗体的Fc段直接杀伤被抗体包被的靶细胞。ADCC3.介导I型超敏反应3.介导I型超敏反应 IgE的Fc段与肥大细胞、嗜碱性粒细胞表达的Fc受体结合，介导I型超敏反应。4.穿过胎盘与粘膜穿过胎盘与粘膜 IgG 与胎盘滋养层细胞表面的FcRn结合，主动进入胎儿的血循环。分泌型IgA与粘膜上皮细胞表面PIgR结合，穿过粘膜上皮细胞到达粘膜腔。个体发育过程中抗体的发育个体发育过程中抗体的发育1.34月胎儿B细胞表面有IgM、IgD。2.出生后随年龄的增加依次形成IgM、IgG和IgA。3.大约到7岁，IgG达到成人水平。牛初乳争议背后：牛初乳争议背后：产品毛利可超十倍产品毛利可超十倍p3月6日，盈力国际称，广东全面暂停牛初乳复合粉的进口，大批进口企业面临倒闭风险。p有无营养？p广告效应p牛初乳的成本和普通牛奶差不多，主要成本就在冻干制法上。1.IgG是再次免疫应答的主要抗体u出生后三个月开始合成u血清中含量较高（75%）u半衰期23天u有活化补体、调理吞噬和ADCC作用u是唯一能通过胎盘的抗体2IgM在早期感染中发挥重要作用u分子量最大u结合抗原的能力最强u活化补体能力最强u在体液免疫应答中产生最早3.分泌型IgA可有效抵御病原体经由粘膜上皮的感染u分为两型：分泌型和血清型uSIgA为二聚体，有J链和分泌片uSIgA是粘膜局部免疫的主要抗体uSIgA可通过母乳传递给婴儿4.IgD是是B细胞发育分化成熟的标志细胞发育分化成熟的标志主要存在于成熟B细胞的表面5.结合在肥大细胞上的结合在肥大细胞上的IgE会引发强会引发强烈的细胞反应烈的细胞反应血清中含量最低可介导I 型超敏反应人工制备抗体人工制备抗体 人工制备抗体多克隆抗体多克隆抗体（研究和体外诊断）单克隆抗体单克隆抗体（研究和体外诊断基因工程抗体基因工程抗体（作为治疗药物）一一.多克隆抗体多克隆抗体 由多个B细胞克隆产生的针对多种抗原表位的抗体混合物。抗原 免疫动物 抗血清优点：容易制备，作用全面缺点：抗原用量大、抗体质量不好控制、抗体用于检测有交叉反应二.单克隆抗体 由同一B细胞克隆所产生的抗单一抗原表位的特异性抗体。优点：结构均一，纯度高，效率高，特异性强。缺点：可诱导产生人抗鼠抗 体单克隆抗体的制备1.免疫小鼠免疫小鼠 用带有多种抗原决定基的天然抗原给小鼠注射。2.细胞融合细胞融合小鼠脾细胞+骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞3.筛选、克隆化筛选、克隆化 将杂交瘤细胞有限稀释。基因工程抗体基因工程抗体三三.基因工程抗体基因工程抗体 应用分子生物学技术，在基因水平对Ig分子进行切割、拼接或修饰，并导入受体细胞表达的新型抗体。主要类型主要类型（一）改造鼠源性抗体（一）改造鼠源性抗体（二）基因工程抗体衍生技术（二）基因工程抗体衍生技术人鼠嵌合抗体人鼠嵌合抗体1.人鼠嵌合抗体人鼠嵌合抗体 从杂交瘤细胞基因中分离功能性V区基因，与人免疫球蛋白C区基因连接起来。2.人源化抗体人源化抗体 用鼠源单抗V区中的高变区（CDR）序列取代人源抗体相应CDR序列。