新疆疏花蔷薇果不同极性部位的体外抗肿瘤活性研究_张珊滋.pdf

化学与生物工程 ，科学研究 基金项目：国家自然科学基金项目（），新疆维吾尔自治区“十四五”高等学校重点学科基金项目（中医学）收稿日期：作者简介：张珊滋（），女，新疆乌鲁木齐人，硕士研究生，研究方向：中药新制剂的研究与开发，：；通讯作者：田莉，教授，：。：张珊滋，王春燕，丁文欢，等 新疆疏花蔷薇果不同极性部位的体外抗肿瘤活性研究 化学与生物工程，（）：，（）：，新疆疏花蔷薇果不同极性部位的体外抗肿瘤活性研究张珊滋，王春燕，丁文欢，贺元，李安林，郭瑛，田莉（新疆医科大学中医学院，新疆 乌鲁木齐 ；新疆名医名方与特色方剂学实验室，新疆 乌鲁木齐 ）摘要：采用 法研究了新疆疏花蔷薇果 乙醇部位（）、乙醇部位（）、乙醇部位（）、乙醇部位（）、水部位（）对人胃癌细胞 、人食管癌细胞 、人肺癌细胞 及 、小鼠腹水瘤细胞 、人慢性髓原白血病细胞 、人组织细胞淋巴瘤细胞 和人乳腺癌细胞 体外增殖的抑制作用。结果表明，与空白对照组相比，疏花蔷薇果不同极性部位对各肿瘤细胞的体外增殖均具有不同程度的抑制作用，其中 对各肿瘤细胞增殖的抑制作用最明显，对 细胞的抑制作用尤为显著，值为（）；对 细胞的增殖有一定抑制作用，值为（）；对 细胞的增殖有一定抑制作用，值为（）；对 细胞的增殖有明显的抑制作用，值为（）。关键词：疏花蔷薇果；提取物；体外抗肿瘤活性；法中图分类号：，（.，；.，）：（），（），（），（），（），（）；（）；（）；（）：；张珊滋，等：新疆疏花蔷薇果不同极性部位的体外抗肿瘤活性研究 年第期 全球恶性肿瘤的发病率和死亡率不断升高，严重威胁着人类健康。癌症的病因复杂，现有化疗药物易产生耐药性并伴有严重不良反应，导致癌症易转移、易复发。研究表明，在西药治疗时介入中药可明显增强疗效，减轻毒副作用，逆转药物耐药。同时，中药具备多成分、多靶点、多通路的作用特点，在防治癌症方面呈现协同作用优势，尤其药食同源的中药成为抗肿瘤新药研发的热点。疏花蔷薇（）为蔷薇科（）灌木，广泛分布于新疆海拔 的平原荒漠、戈壁荒地、干沟或河谷旁，抗逆性强，资源丰富。疏花蔷薇果为疏花蔷薇的干燥果实，属药食同源，富含黄酮、三萜酸、维生素、多糖、氨基酸等多种化学成分。疏花蔷薇果收载于 中华人民共和国卫生部标准（维吾尔药分册）和 哈萨克药志，具有固精止泻、消肿疗疮、益肾明目、通经止痛等功效。研 究 发 现，疏 花 蔷 薇 果 具 有 抑 菌、抗 氧化、调节脂质代谢 等作用。目前，尚未见关于疏花蔷薇果抗肿瘤作用研究的报道，基于此，作者采用 法研究新疆疏花蔷薇果 乙醇部位（）、乙醇部位（）、乙醇部位（）、乙醇部位（）、水部位（）对人胃癌细胞 、人食管癌细胞 、人肺癌细胞 及 、小鼠腹水瘤细胞 、人慢性髓原白血病细胞 、人组织细胞淋巴瘤细胞 和人乳腺癌细胞 体外增殖的抑制作用，为疏花蔷薇果开发为天然抗肿瘤药物提供依据。实验材料、试剂与仪器疏花蔷薇果，购自新疆和田地区，经新疆医科大学徐海燕教授鉴定为疏花蔷薇（）的干燥果实。人胃癌细胞 、人食管癌细胞 、人肺癌细胞 及 、小鼠 腹水瘤 细 胞 、人慢性髓原白血病细胞 、人组织细胞淋巴瘤细胞 、人乳腺癌细胞 ，由中科院细胞库提供。胰 蛋 白 酶（批 号 ）、胎 牛 血 清（，批号 ），美国 公司；磷酸盐缓冲液（，批号 ），北京希诺因子科技有 限 公 司；完 全 培 养 基（批 号 ）、高 糖 培 养 基（批 号 ）、青霉素链霉素溶液（批号 ），美国 公司；细胞增殖及毒性检测试剂盒（批号 ），北京博奥森生物技术有限公司；二甲基亚砜（），北京索莱博科技有限公司；氟尿嘧啶（纯度，批号 ），上海源叶生物科技有限公司；树脂，沧州宝恩吸附材料有限公司；无水乙醇；实验用水为蒸馏水。型二氧化碳培养箱，德国 公司；洁净工作台、型全波长酶标仪，美国 公司；型电热恒温水槽，上海博迅实业有限公司；型倒置显微镜；型离心机，德国 公司；型电子分析天平，梅特勒托利多仪器有限公司。方法不同极性部位的提取称取干燥疏花蔷薇果，粉碎过 目筛，即得疏花蔷薇果粗粉；按料液比（，下同）用 乙醇回流提取次，每次，合并提取液，减压浓缩后干燥，即得粗浸膏；取粗浸膏适量，加蒸馏水配制成每毫升含原药材的溶液，并按原药材与树脂质量比上样，依次用 、乙醇洗脱，分别收集洗脱液，浓缩后冷冻干燥，分别得到 乙醇部位（）、乙醇部位（）、乙醇部位（）和 乙醇部位（）。粗提后药渣按料液比 用蒸馏水煎煮提取次，每次，合并提取液，浓缩后冷冻干燥，得到水部位（）。供试品的制备分别精密称取上述疏花蔷薇果不同极性部位 ，用 配制成质量浓度为 的溶液，给药前采用相应的培养基配制成质量浓度为 的母液，经 滤膜过滤除菌，分装，储存备用，临用前现配。细胞培养细胞复苏后分别接种于装有培养基的培养瓶中，其 中 、和 细胞接种于含 胎牛血清和青霉素链霉素的 完全培养基，细胞接种于 高糖培养基，置于、的培养箱中培养。隔天换液，及时传代，取对数生长期的细胞进行后续实验。不同极性部位体外抗肿瘤活性的测定分别取对数生长期的 、细胞，用 清洗次后，加入 胰蛋白酶消化 ，然后加入 完全培养基终止消化，离心 ，弃上清液，再加入张珊滋，等：新疆疏花蔷薇果不同极性部位的体外抗肿瘤活性研究 年第期 完全培养基吹打均匀，制成单细胞悬液后计数，调整细胞终浓度为 个，接种至 孔板中，每孔接种 细胞悬液，置于细胞培养箱中培养 后弃去培养基，加入 不同浓度的含药培养基，实验组加入终浓度（）分别为 、的疏花蔷薇果不同极性部位溶液；阳性对照组加入终 浓 度（）分别为 、的氟尿嘧啶（）溶液；空白对照组仅加入相同体积的培养基。每组设置个复孔，置于、细胞培养箱中继续培养，弃上清液，避光加入 溶液，在细胞培养箱中继续孵育，采用酶标仪测定 处吸光度（）。按式（）计算样品对细胞增殖的抑制率，并运用 软件计算半数抑制浓度（），以 值作为评价疏花蔷薇果不同极性部位对不同肿瘤细胞的毒性指标。抑制率 空白对照组 实验组或阳性对照组 空白对照组 （）数据处理和分析采用 统计软件进行数据分析，多组间比较采用单因素方差分析，表示有统计学意义。计量描述统计采用均数标准差（?）表示。结果与讨论 疏花蔷薇果不同极性部位对肿瘤细胞形态的影响在倒置显微镜下观察，与空白对照组相比，给予不同浓度的疏花蔷薇果不同极性部位后，低浓度条件下出现肿瘤细胞增殖速度变慢，细胞变圆、涨大的现象；高浓度条件下出现细胞皱缩破裂，细胞间隙明显增大，细胞碎片增多，细胞呈沙粒状空泡的现象，在 、浓度条件下，大部分肿瘤细胞均无法维持完整的细胞形态。疏花蔷薇果不同极性部位对肿瘤细胞增殖的抑制作用疏花蔷薇果不同极性部位对肿瘤细胞增殖的抑制率见表，对肿瘤细胞的 值见表。表疏花蔷薇果不同极性部位对肿瘤细胞增殖的抑制率（，?）（，?）组别浓度抑制率 张珊滋，等：新疆疏花蔷薇果不同极性部位的体外抗肿瘤活性研究 年第期 续表组别浓度抑制率 注：与空白对照组比较，表示差异显著（），表示差异极显著（）。表疏花蔷薇果不同极性部位对肿瘤细胞的 值（，?）（，?）组别 （）注：同列中不同小写字母表示不同极性部位间差异显著（）。由表、表可知，与空白对照组相比，给予疏花蔷薇果不同极性部位、作用 后，各肿瘤细胞的增殖均受到不同程度的抑制，并呈浓度依赖性。其中，对各肿瘤细胞增殖的抑制作用最明显，值为（）（）；、对 细胞的增殖均有明显抑制作用，值分别为（）、（）；对 、细胞具有一定的抑制作用，值分别为（）、（）；对 、细胞的增殖有较弱的抑制作用，值分别为（）、（）、（）；可 明 显 抑 制 、细胞的增殖，值分别为（）、（）。讨论蔷薇属植物富含的多糖、类胡萝卜素、类黄酮和酚酸等活 性 成 分 与抗 肿瘤活性具 有 潜 在 联 系。肖 辉等 研究发现，野蔷薇果的乙醇提取物可诱导人宫颈癌细胞（）、人乳腺癌细胞（）、人卵巢癌细胞（）和人膀胱癌细胞（）的早期凋亡，并可抑制小鼠 实体瘤的生长，延长腹水瘤小鼠的生存时间。黄俞龙等 研究发现，从金樱子提取物中分离获得的黄酮类成分槲皮素、芦丁及多糖类成分，能有效抑制人肝癌细胞（）的增殖，且对正常肝细胞（）的毒性较低。等 研究发现，犬蔷薇的甲醇提取物中含有的原花青素可以防止豚鼠皮肤和小鼠黑色素瘤细胞中黑色素的生成。等 研张珊滋，等：新疆疏花蔷薇果不同极性部位的体外抗肿瘤活性研究 年第期 究发现，犬蔷薇提取物可抑制人结肠癌细胞（、）、细 胞、细 胞 和 人 肝 癌 细 胞（）的生长，并且在正常肝细胞原代培养中无毒性。疏花蔷薇果中主要含有黄酮、多酚、多糖等化学成分，已有研究表明，植物中含有的黄酮、多酚成分具有一定的抗肿瘤作用，能抑制胃癌细胞增殖，多糖类成分能促进 细胞凋亡、抑制动物 实体瘤的生长。本研究采用 法初步考察了疏花蔷薇果不同极性部位的体外抗肿瘤活性，发现不同极性部位对种肿瘤细胞的增殖均有不同程度的抑制作用，抑制率与提取物浓度呈明显的量效关系。其中，对各肿瘤细胞增殖的抑制作用强于其它极性部位，对 细 胞 的 抑 制 作 用 尤 为 显 著，值 为（），表明疏花蔷薇果 乙醇部位富集了较多抗肿瘤活性成分；对 细胞增殖的抑制作 用 显著，值 为（），对 细胞也具有较好的抑制作用，值为（），可能与水部位中含有多糖等极性较大的化学成分有关；除 对 细胞增殖的抑制作用较弱外，其余极性部位对该细胞均有一定的抑制作用，这与其同属植物野蔷薇果的抗肿瘤活性部位相一致。结论采用 法研究了新疆疏花蔷薇果 乙醇部位（）、乙醇部位（）、乙醇部位（）、乙醇部位（）、水部位（）对人胃癌细胞 、人食管癌细胞 、人肺癌细胞 及 、小鼠腹水瘤细胞 、人慢性髓原白血病细胞 、人组织细胞淋巴瘤细胞 和人乳腺癌细胞 体外增殖的抑制作用。结果表明，与空白对照组相比，疏花蔷薇果不同极性部位对各肿瘤细胞的体外增殖均具有不同程度的抑制作用，其中 对各肿瘤细胞增殖的抑制作用最明显，对 细胞的抑制作用尤为显著，值为（）；对 细胞的增殖有一定抑制作用，值为（）；对 细胞的增殖有一定抑制作用，值为（）；对 细胞的增殖有明显的抑制作用，值为（）。疏花蔷薇果具有开发为天然抗肿瘤药物的潜在价值，疏花蔷薇果发挥抗肿瘤作用药效成分的分离、纯化及其作用机制有待后续进一步研究。参考文献：田劭丹，陈信义中医药治疗恶性肿瘤特色与优势现代中医临床，（）：，（）：谭婉燕，熊枝繁中药抗肿瘤临床应用的相关思考山西医科大学学报，（）：邢蓓蓓，程海波，沈卫星药食同源中药在肿瘤预防中的应用探讨四川中医，（）：，（）：刘士侠，丛者福 新疆蔷薇 新疆：新疆科技卫生出版社，：李庆典，李颖，张彦海 疏花蔷薇果实营养成分分析 营养学报，（）：，（）：杨逢玉，杨帆，隋云吉，等新疆种驯化蔷薇果实的主要经济性状及果实营养成分含量分析西部林业科学，（）：，（）：，徐新，巴哈尔古丽黄尔汗，贾晓光哈萨克药志（第一卷）北京：民族出版社，：田莉，史红，田树革，等维药材疏花蔷薇果提取物的体外抑菌作用研究安徽农业科学，（）：，（）：，王东东，汤紫薇，党稳梅，等疏花蔷薇果总多酚抗氧化活性安徽农业科学，（）：，（）：，（）：肖辉，张月明，朱功兵，等 野蔷薇果提取物对不同肿瘤细胞抑制作用中国公共卫生，（）：黄俞龙，刘焱 金樱子提取物中黄酮类物质的初步抗肿瘤活性研究 基因组学与应用生物学，（）：，（）：（下转第 页）谷铭瑞，等：含磷聚苯并噁嗪树脂对水中铁（）和铬（）的吸附性能研究 年第期 ，（）：，：，：，（）：，：，（）：，：，（）：，（）：，：（），：潘沛玲电感耦合等离子体发射光谱法检测废水中重金属离子 化学与生物工程，（）：，（）：，韩梅，韩占涛，张辰凌，等活性炭纤维毡对水中六价铬的吸附性能研究 化学与生物工程，（）：，（）：邵悦纳，谷铭瑞，花胜权，等 含磷聚苯并噁嗪树脂的制备及对污水中 和 的吸附性能研究 化工新型材料，（）：，（）：，（）：，（）：（上接第 页）黄俞龙，刘焱金樱子提取物中多糖的体外抗肿瘤活性研究基因组学与应用生物学，（）：，（）：，（），（）：，：，（）：王雪，刘景楠，夏顺利，等 中药总黄酮抗肿瘤活性及机制的研究现状中国临床药理学杂志，（）：，（）：，王永胜，杨丽霞，周思彤，等富硒黄芪多糖对白血病 细胞凋亡诱导作用中医临床研究，（）：，（）：程婷婷，陈贵元植物多糖提取及抗肿瘤研究进展亚太传统医药，（）：，（）：版权声明为适应我国信息化建设的需要，扩大本刊及作者知识信息交流渠道，本刊已许可 中国学术期刊网络出版总库、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社、中国知网（）系列数据库、万方数据 数字化期刊群、中文科技期刊数据库（全文版）、超星域出版平台等以数字化方式复制、汇编、发行、信息网络传播本刊全文。作者著作权使用费与本刊稿酬一次性给付。如作者不同意论文被收录，请在来稿时向本刊声明，本刊将做适当处理。化学与生物工程 编辑部