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白细胞计数(j sh)-Neubauer(牛鲍)板计数法长治市第二人民医院(yyun)检验科：薛彬彬第一页，共十六页。第二页，共十六页。1、目的：掌握显微镜法白细胞计数的原理 及方法。2、原理：用白细胞稀释液将血液稀释一定 倍数，同时破坏(phui)溶解红细胞。将稀释的血 液注入血细胞计数板，在显微镜下计数一定体积的白细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。第三页，共十六页。3、器材：显微镜、改良牛鲍计数板、试管、吸管、微量吸管、吸头等。4、试剂(shj)：白细胞稀释液：2%冰乙酸2ml,10g/L结晶紫（或亚甲蓝）3滴，加蒸馏水到100ml。5、标本：新鲜 全血或末梢血。第四页，共十六页。改良(giling)的牛鲍 计数板。第五页，共十六页。第六页，共十六页。操作步骤1、加稀释液：用吸管吸取白细胞稀释液 0.38ml于小试管中。2、吸取血液：用微量吸管吸取新鲜(xn xin)全血或 末梢血20ul，擦去管尖外部 余血。将吸管插入试管中白 细胞稀释液的底部，轻轻放 出血液，并吸取上层白细胞 稀释液清洗吸管2-3次。第七页，共十六页。3、混匀：将试管中血液与稀释液混匀，待 细胞悬液完全变为棕褐色。4、充池：再次将小试管中的细胞悬液混 匀，用微量吸管吸取7ul左右充 入改良牛鲍计数(j sh)板的计数(j sh)池中，室温静置2-3分钟，待白细胞完 全下沉。第八页，共十六页。5、计数(j sh)：在低倍镜下计数(j sh)四角4 个大方格的白细胞总数。6、计算:WBC=N/41020106=N/20109 其中N为4个大方格的白细胞总数。第九页，共十六页。7、细胞计数、细胞计数(j sh)原则原则大方格大方格(fn)四四边压线细胞数边压线细胞数左不数右，数左不数右，数上不数下，上不数下，弓形移动弓形移动第十页，共十六页。8、考核评价、考核评价(pngji)a.常规考核标准常规考核标准 （RCS）RCS=100%评价：评价：白细胞白细胞 4.0109/L者，者，RCS30%白细胞在（白细胞在（4.1-14.9）109/L者者 RCS20%白细胞白细胞15.0 109/L者者 RCS15%超过上述标准者为不合格超过上述标准者为不合格 b.其他方法其他方法四大四大(s d)格所见白细胞最大值格所见白细胞最大值最小最小值值四大四大(s d)格所见白细胞数平均值格所见白细胞数平均值第十一页，共十六页。注意事项注意事项(1).稀稀释释液液密密封封保保存存，防防止止污污染染，小小试试管管、计计数数板板、盖盖片片均均须须清清洁洁，以以免免杂杂质质、微微粒粒等被误认为细胞。等被误认为细胞。(2).采采血血时时针针刺刺深深度度必必须须适适当当，不不能能过过度度挤挤压压，防防止止组组织织液液渗渗入入(shnr)或或采采血血时时间间太太长长引起血液凝固。引起血液凝固。(3).稀稀释释液液和和采采血血量量要要准准确确，充充分分混混匀匀，充充液液适适量量，无无不不足足、外外溢溢和和气气泡泡，细细胞胞分分布布均匀。均匀。第十二页，共十六页。(4).白白细细胞胞总总数数在在参参考考范范围围内内，大大方方格格间间的的细细胞胞数数不不得得相相差差10个个以以上上，两两次次重重复复计计数数(j sh)误差不得超过误差不得超过10。(5).白细胞数量过高时，可加大稀释倍数，白细胞数量过高时，可加大稀释倍数，白细胞数量过低时，可计数白细胞数量过低时，可计数8个大方格的白个大方格的白细胞数或取双倍血量。细胞数或取双倍血量。第十三页，共十六页。(6).一些贫血一些贫血(pnxu)患者血液中有核红细胞患者血液中有核红细胞增多，会计数在白细胞总数内，应校正。增多，会计数在白细胞总数内，应校正。校正公式：白细胞校正数校正公式：白细胞校正数/L=M（100/100+N）M为未校正前白细胞数，为未校正前白细胞数，N为在白细胞分为在白细胞分类时，计数类时，计数100个白细胞的同时计数到的有个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。核红细胞数。第十四页，共十六页。谢谢谢谢(xi xie)大家！大家！第十五页，共十六页。内容(nirng)总结白细胞计数-Neubauer(牛鲍)板计数法。1、加稀释液：用吸管吸取白细胞稀释液。2、吸取血液：用微量吸管吸取新鲜全血或。3、混匀：将试管中血液与稀释液混匀，待。(2).采血时针刺深度必须适当，不能过度挤压，防止组织液渗入或采血时间太长引起血液凝固。(6).一些贫血患者血液中有核红细胞增多，会计数在白细胞总数内，应校正(jiozhng)。谢谢大家第十六页，共十六页。