Prominence_UFLC技术及应用.pdf

11Prominence UFLC技术及应用岛津国际贸易（上海）有限公司岛津国际贸易（上海）有限公司2什么是UFLC?UFLC(Ultra Fast Liquid Chromatography)在提高分离效率的前提下缩短分析时间?在实现高分离度前提下实现快速分析?维持基本性能的前提下实现快速分析?低成本实现快速分析3UFLC特点分析时间的快速化?单次分析的时间?分析周期（包括进样及其清洗）?装置准备所需时间（自动启动、清洗、分析状态判断）?适用于整体色谱柱的快速化4UFLC特点装置的整体性能?重现性?分离度?交叉污染?灵敏度，噪音，信噪比?梯度准确性?系统的扩展性?分析方法通用性?维护频率及费用5为什么要使用UFLC?为了缩短分析时间为了提高分析方法开发的效率为了提高LC-MS分析的效率为了降低分析成本（节省溶剂等）6UFLC的理论基础H：理论塔板高度dp：填料粒径：线速度A dp：涡流扩散B/：分子扩散C H：理论塔板高度dp：填料粒径：线速度A dp：涡流扩散B/：分子扩散C dpdp2 ：传质阻力（A、B、C为常数）2 ：传质阻力（A、B、C为常数）理论塔板高度(H）线速度（理论塔板高度(H）线速度（）H=H=AdpAdp+B/B/+CdpCdp2 2合计的曲线合计的曲线Van Deemter公式：27UFLC的理论基础（2）涡流扩散涡流扩散在填料颗粒间的空隙，流动相的流动不均匀，因此，产生紊流。在填料颗粒间的空隙，流动相的流动不均匀，因此，产生紊流。分子扩散分子扩散沿着流动相的流向，分析样品扩散。沿着流动相的流向，分析样品扩散。传质阻力传质阻力分析样品在流动相与固定相之间传递时产生延迟。分析样品在流动相与固定相之间传递时产生延迟。个样品的距离变大。个样品的距离变大。8为减小理论塔板高度？（涡流扩散）H=H=AdpAdp+B/B/+CdpCdp2 2Adp:减小粒径。Adp:减小粒径。理论塔板高度(H）线速度（理论塔板高度(H）线速度（）涡流扩散变小涡流扩散变小9为减小理论塔板高度？（分子扩散）H=H=AdpAdp+B/B/+CdpCdp2 2B/：加大线速度。B/：加大线速度。理论塔板高度(H）线速度（理论塔板高度(H）线速度（）线速度慢时，纵向扩散变大线速度快时，纵向扩散变小线速度慢时，纵向扩散变大线速度快时，纵向扩散变小10为减小理论塔板高度？（传质阻力）H=H=AdpAdp+B/B/+CdpCdp2 2CdpCdp2 2：减小粒径。减小线速度。：减小粒径。减小线速度。粒径的贡献大粒径的贡献大理论塔板高度(H）线速度（理论塔板高度(H）线速度（）11UFLC的实现方法）填料的细微化理论塔板数与粒径成反比，可缩短色谱柱长度即使在高流量区域，色谱柱效率（分离）的降低也小）高温化即使在高流量区域，色谱柱效率（分离）的降低也小）填料的细微化理论塔板数与粒径成反比，可缩短色谱柱长度即使在高流量区域，色谱柱效率（分离）的降低也小）高温化即使在高流量区域，色谱柱效率（分离）的降低也小但是，通用性、操作性等基本要求很重要但是，通用性、操作性等基本要求很重要但是但是12实现快速分离的途径）填料的细微化313填料细微化的结果高柱效&高柱压快速，高分离，通用性？结果结果14填料粒径与理论塔板高度的关系 色谱柱填料的粒径越小，1)理论塔板高度可降低（峰变得尖锐）2)在高线速度区域，柱效的降低得以缓和线速度理论塔板高度曲线线速度理论塔板高度曲线分析条件流动相：水/乙腈（30/70,v/v）温度：40 检测：245nm样品：烷基苯酮分析条件流动相：水/乙腈（30/70,v/v）温度：40 检测：245nm样品：烷基苯酮0246810121416182005101520253035404550Interstitial Linear Velocity(cm/min)HETP5 um3 um2.2 um1.8 um0246810121416182005101520253035404550Interstitial Linear Velocity(cm/min)HETP5 um3 um2.2 um1.8 um150510152025303540450123456Particle Size(um)Column Pressure(MPa)0510152025303540450123456Particle Size(um)Column Pressure(MPa)填料粒径和压力的关系色谱柱填料的粒径变小使得柱压显著增大（柱压与粒径的二次方成反比，与流动相流量成正比）使用长色谱柱提高分离能力较困难有时不能在最佳线速度下使用色谱柱的柱压与粒径的关系（在最佳流量下，N12,000时）色谱柱的柱压与粒径的关系（在最佳流量下，N12,000时）分析条件流动相：水/乙腈（3/7,v/v）温度：40 分析条件流动相：水/乙腈（3/7,v/v）温度：40 16粒径的选择为将分析时间缩短5倍以上的条件最佳流动相流量是常规色谱柱（粒径5m）的2倍以上最小理论塔板高度是常规色谱柱（粒径5m）的1/2以下必须使用填料粒径2.5m以下的色谱柱为使用现有HPLC系统的条件理论塔板数与常规色谱柱（5m,4.6150 mm）同等或以上在大部分的分析条件下，柱压在30 MPa以下必须使用填料粒径2.0m以上的色谱柱考虑快速化、效率化和通用性兼备，岛津将2.2m填料色谱柱Shim-pack XR-ODSShim-pack XR-ODS产品化于是于是172.2m填料的特点（）粒径的最佳化综合判断：性能、柱压、耐用性选定2.2m*岛津2.2m填料的优点便于使用的高性能色谱柱1)与小于2m填料匹敌的分离性能2)通过使用均一填料抑制柱压1.8m填料柱压的1/2以下Chromatographic conditions;mobile phase:water/acetonitrile(3/7,v/v),temperature:40 C,detection:absorbance at 245 nm.Peaks:1:苯乙酮2:苯丙酮3:苯丁酮4:苯戊酮5:苯己酮6:苯庚酮7:苯辛酮0.000.250.500.751.001.251.501.752.002.252.50min050100150200250mAU1234567Shim-pack XR-ODS (3 mm i.d.75 mm,2.2 m)Flow rate:1.2 mL/minN for Peak 7(k=9.0):14,2000.02.55.07.510.012.5min01020304050mAU1234567Shim-pack VP-ODS (4.6 mm i.d.150 mm,4.6 m)Flow rate:1.0 mL/minN for Peak 7(k=8.4):148000.000.250.500.751.001.251.501.752.002.252.50min050100150200250mAU1234567Shim-pack XR-ODS (3 mm i.d.75 mm,2.2 m)Flow rate:1.2 mL/minN for Peak 7(k=9.0):14,2000.02.55.07510.012.5min01020304050mAU1234567Shim-pack VP-ODS (4.6 mm i.d.150 mm,4.6 m)Flow rate:1.0 mL/minN for Peak 7(k=8.4):148005.0182.2m填料的特点（2）粒径的最佳化：小于2m不适于同时实现快速化与高分离*岛津2.2m填料的优点与1.8m填料相比，以较短的分析时间得到相同的分离度1)采用长色谱柱，确保高理论塔板数2)提高流动相线速度，实现快速化Chromatographic conditions;mobile phase:100 mmol/L(potassium)phosphate /acetonitrile(upper:77/23,lower:84/16,v/v),temperature:50 C,detection:absorbance at 350 nm.Peaks;1:D-苯丙氨酸 衍生物2:L-苯丙氨酸 衍生物0.00.51.01.52.02.53.03.54.04.5min051015mAU0.00.51.01.52.02.53.03.54.04.5min0102030mAUShim-pack XR-ODS (2.0 mm i.d.100 mm,2.2 m)Flow rate:0.5 mL/minPressure:23 MPaN for Peak 1 and Peak 2(Rs=1.45):11,500,9600Column C (2.1 mm i.d.50 mm,1.8 m)Flow rate:0.6 mL/minPressure:27 MPaN for Peak 1&Peak 2(Rs=1.44):8,200,6.70012120.00.51.01.52.02.53.03.54.04.5min051015mAU0.00.51.01.52.02.53.03.54.04.5min0102030mAUShim-pack XR-ODS (2.0 mm i.d.100 mm,2.2 m)Flow rate:0.5 mL/minPressure:23 MPaN for Peak 1 and Peak 2(Rs=1.45):11,500,9600Column C (2.1 mm i.d.50 mm,1.8 m)Flow rate:0.6 mL/minPressure:27 MPaN for Peak 1&Peak 2(Rs=1.44):8,200,6.7001212419024681012141611.522.533.544.555.5Particle Size(um)Retention Time(min)Rs=2 unreachable zone024681012141611.522.533.544.555.5Particle Size(um)Retention Time(min)Rs=2 unreachable zone填料细微化的要点 考虑快速分离和高分离性能的平衡，在填料微细化时很重要有时色谱柱的理论塔板数低则得不到必要的分离度（Rs）。由于理论塔板数高，容易获得分离度，但因为色谱柱长而花费时间由于理论塔板数高，容易获得分离度，但因为色谱柱长而花费时间由于理论塔板数低，为得到分离度必须加长保留时间由于理论塔板数低，为得到分离度必须加长保留时间保留时间和粒径的关系（最佳流量下，压力为30MPa时得到保留时间和粒径的关系（最佳流量下，压力为30MPa时得到R Rs s=2所需时间）=2所需时间）20填料细微化的要点设定通用可使用的压力（a）的限制，则粒径2.2m程度的填料在不降低分离性能的状态下最可能实现快速分析。如果提高压力限制会怎样呢？1.7 1.8 m的填料，在理论上可实现快速分离，但是必须使用高压专用系统。因为是超细微粒子，所以压力损失变大，消耗零部件的寿命变短。色谱柱内发生因压力损失而生成的热量，此热量造成扩散，不能得到期望的分离性能，阻碍快速化。21实现快速分离的途径2)高温化22为什么高温LC引人注目？通过提高温度，提高物质的相间移动速度。即使是相同的粒径也可实现更高的理论塔板数即使高线速度也可保持低理论塔板高度通过提高温度，降低了流动相的粘性，可抑制高流量下的柱压上升。可直接使用现有HPLC系统。23色谱柱温度变化带来的H-曲线的变化456789101105101520253035404550Interstitial Linear Velocity(cm/min)HETP406080456789101105101520253035404550Interstitial Linear Velocity(cm/min)HETP406080Chromatographic conditions;column:Shim-pack XR-ODS(2.2m),mobile phase:water/acetonitrile(3/7,v/v),detection:absorbance at 245 nm.40 C60 C80 C24温度变化带来的压力变化降低1/3降低1/3011223344505101520253035404550Interstitial Linear Velocity(cm/min)Pressure(MPa/cm)40 deg.C60 deg.C80 deg.C011223344505101520253035404550Interstitial Linear Velocity(cm/min)Pressure(MPa/cm)40 deg.C60 deg.C80 deg.CChromatographic conditions;column:Shim-pack XR-ODS(2.2m),mobile phase:water/acetonitrile(3/7,v/v),detection:absorbance at 245 nm.40 C60 C80 C525温度与快速分析Chromatographic conditions;mobile phase:water/acetonitrile(3/7,v/v),detection:absorbance at 245 nm.Peaks:1:苯乙酮2:苯丙酮3:苯丁酮4:苯戊酮5:苯己酮6:苯庚酮7:苯辛酮45670.000.250.500.751.001.25min-300-250-200-150-100-50050100150mAU0.000.250.500.751.001.25min-150-100-50050100150200250300350mAU0.000.250.500.751.001.25min050100150200250300350400450500mAU123Shim-pack XR-ODS (3.0 mm i.d.50 mm,2.2 m)Flow rate:1.5 mL/minTemperature:80 C (Pressure:11.8 MPa)N for Peak 7:9,886Temperature:60 C (Pressure:14.0 MPa)N for Peak 7:9,426Temperature:40 C (Pressure:17.4 MPa)N for Peak 7:9,15445670.000.250.500.751.001.25min-300-250-200-150-100-50050100150mAU0.000.250.500.751.001.25min-150-100-50050100150200250300350mAU0.000.250.500.751.001.25min050100150200250300350400450500mAU123Shim-pack XR-ODS (3.0 mm i.d.50 mm,2.2 m)Flow rate:1.5 mL/minTemperature:80 C (Pressure:11.8 MPa)N for Peak 7:9,886Temperature:60 C (Pressure:14.0 MPa)N for Peak 7:9,426Temperature:40 C (Pressure:17.4 MPa)N for Peak 7:9,154随着色谱柱温度的升高，柱效增高1)理论塔板数的增加2)柱压的降低26温度对化合物的影响Chromatographic conditions;mobile phase:acetonitrile,detection:absorbance at 285 nm.Peaks1:生育酚(Vitamin E)2:生育酚醋酸盐 ODS色谱柱时，即使在高温下，化合物也意外地稳定在分离过程中，较少发生饱和化、重排反应、水分解但是，但是，色谱柱耐久性降低、受到流动相条件制约也是事实色谱柱耐久性降低、受到流动相条件制约也是事实0.01.02.03.04.05.0min0255075100125150175200225250275300325350mAU0.01.02.03.04.05.0min-100-75-50-250255075100125150175200225mAU12Shim-pack XR-ODS (3.0 mm Shim-pack XR-ODS (3.0 mm i i.d d.100 mm,2.2.100 mm,2.2 m mm)m)Flow rate:1.0 mL/minTemperature:80 CNfor Peak 7:1.19Nfor Peak 7:1.1612Temperature:40 CNfor Peak 7:1.12Nfor Peak 7:1.150.01.02.03.04.05.0min0255075100125150175200225250275300325350mAU0.01.02.03.04.05.0min-100-75-50-250255075100125150175200225mAU12Shim-pack XR-ODS (3.0 mm Shim-pack XR-ODS (3.0 mm i i.d d.100 mm,2.2.100 mm,2.2 m mm)m)Flow rate:1.0 mL/minTemperature:80 CAsfor Peak 1:1.19Asfor Peak 2:1.1612Temperature:40 CAsfor Peak 1:1.12Asfor Peak 2:1.1527Prominence UFLC系统岛津的超快速LC分析系统28Prominence概要柱温箱柱温箱 CTO-20A/C 对应CMD 可实现阀内置 最多可容纳12块MPT 可实现冷却 自动切换样品架快速自动进样器快速自动进样器 SIL-20A/C 世界最高速度的进样操作 完全抑制交叉污染 对应多清洗液世界最高速度！世界最高速度！系统控制系统控制CBM-20A/CBM-20Alite LAN连接器的标准装备 可实现 Web控制 可内置单元（CBM-20Alite）世界领先！世界领先！LC-20AD/B 低流量范围提高流量精度LC-20AD/T 可内置低压GE阀低容量排气装置低容量排气装置 DGU-20A 400L以下的小容量 鬼峰的抑制 降低噪音 降低漂移 温控池的标准装备 模拟输出标准装备 降低噪音 降低漂移 温控池的标准装备 低压Hg灯的标准装备世界最高灵敏度！世界最高灵敏度！泵低脉动泵泵低脉动泵LC-20AD常规泵常规泵LC-20AT二元泵二元泵LC-20AB样品架切换装置样品架切换装置NewNew高灵敏度高灵敏度PDA SPD-M20A高灵敏度高灵敏度UV-VIS SPD-20A/Prominence是拥有卓越性、先进性的新类型的是拥有卓越性、先进性的新类型的HPLC29Prominence UFLC快速分析特性（）流量分辨率高达3nL/min的送液单元LC-20AD/20AB，提高保留时间重现性具备高精度计量泵和高气密性流路的自动进样器SIL-20A，实现卓越的进样重现性0.0800.0870.0820.0650.0700.0720.076%RSD0.9140.8420.7630.6770.5870.4930.377Average Retention time0.13845277Valerophenone0.18646613Hexanophenone4897843975491994726049018AveragePeak Area0.2000.2050.0550.1670.193%RSDCompoundsOctanophenoneHeptanophenoneButyrophenonePropiophenoneAcetophenoneProminence快速分析的重现性快速分析的重现性分析条件色谱柱：分析条件色谱柱：Shim-Pack XR-ODS(3mm 50mm)流动相：A:水,B:乙腈0min(50%B)0.55min(95%B)0.70min(95%B)流量：1.5 mL/min温度：40 检测：吸光度245 nm样品：烷基苯酮流动相：A:水,B:乙腈0min(50%B)0.55min(95%B)0.70min(95%B)流量：1.5 mL/min温度：40 检测：吸光度245 nm样品：烷基苯酮0.00.20.40.61.00.80.00.20.40.61.00.830Prominence UFLC快速分析特性（）支持超快速梯度分析的SIL-20A通过“填料粒径的合理细微化”和“高温分析”，实现循环时间 33 sec！具有世界最快进样速度,在不单独使用清洗液的情况下可实现低交叉污染0.000.250.500.751.001.25min0100200300400500mAU1234567Shim-pack XR-ODS (3 mm Shim-pack XR-ODS (3 mm i i.d d.30 mm,2.2.30 mm,2.2 m)m)Pressure:max.21.5 MPa12345671234567stopstopstartstartinjectinjectstopstopstartstartinjectinjectinjectinjectstopstopChromatographic conditions;column:Shimpack XR-ODS(3 mm i.d.30 mm,2.2 m),mobile phase:water/acetonitrile(4/6 to 2/8 in 0.4 min,convex gradient),flow rate:3 mL/min,temperature:80 C,detection:absorbance at 245 nm,sample volume:4 L(each 800 nmolof 7alkylphenones),0.1 min delayed injection.Peak 1的半峰宽：240 msPeak 1的半峰宽：240 msPeak 1的半峰宽：240 msPeak 1的半峰宽：240 ms631Prominence UFLC快速分析特性（）支持高温分析的CTO-20A支持高温分析的CTO-20A使用高性能色谱柱，理论塔板数达到35,600！而且柱压不超过30MPa采用大容量柱温箱，容纳更多色谱柱，并可以进行“高温分析”0.00.51.01.52.02.5min050100150200250mAU1234567Shim-pack XR-ODS (3 mm Shim-pack XR-ODS (3 mm i i.d d.100 mm,2.2.100 mm,2.2 m)2 columns in seriesm)2 columns in seriesPressure:29.5 MPaNfor Peak 3(k=0.8):35,600Chromatographic conditions;column:two Shim-pack XR-ODS(3 mm i.d.100 mm,2.2 m)in series,mobile phase:water/acetonitrile(2/8,v/v),flow rate:1.2 mL/min,temperature:80 C,detection:absorbance at 245 nm,sample volume:4 L(each 400 nmol of 7 alkylphenones).32快速分析小结分析快速化的同时，满足以下特点也很重要HPLC分析原本应具有的重要事项分离度，重现性，灵敏度，交叉污染的抑制与高分离的平衡通过合理的填料粒径的细微化，提高色谱柱的“理论塔板数”分析方法的通用性开发的分析方法的适用性33Prominence UFLCApplications34PTC氨基酸的UFLC分析氨基酸分析有两种检测方法，其一是使用离子交换色谱柱分离之后，进行衍生化再检测的柱后衍生化法，另一种是先衍生化后，使用反相色谱柱进行分离的柱前衍生法。从快速分析的角度考虑，柱前衍生化法行之有效，在此，使用Shim-pack XR-ODS以更短的时间进行了氨基酸分析。使用异硫氰酸苯酯进行衍生化。柱后衍生法时需要1小时，柱前衍生化法使用常规色谱柱时需要25分钟的分析可缩短至4分钟。氨基酸分析有两种检测方法，其一是使用离子交换色谱柱分离之后，进行衍生化再检测的柱后衍生化法，另一种是先衍生化后，使用反相色谱柱进行分离的柱前衍生法。从快速分析的角度考虑，柱前衍生化法行之有效，在此，使用Shim-pack XR-ODS以更短的时间进行了氨基酸分析。使用异硫氰酸苯酯进行衍生化。柱后衍生法时需要1小时，柱前衍生化法使用常规色谱柱时需要25分钟的分析可缩短至4分钟。35PTC-氨基酸的UFLC分析1.Formaldehyde2.Acetoaldehyde3.Acetone4.Acrolein5.Propionaldehyde6.Crotonealdehyde7.2-Butanone8.Methacrolein9.n-Butylaldehyde10.Benzaldehyde11.Valeraldehyde12.m-Tolualdehyde13.Hexaldehyde(each 120 nL/4L)Chromatographic conditions;column:Shim-pack XR-ODS(2.2 m,3.0 mm i.d.75 mm),mobile phase:10 mmol/L(potassium)phosphate for A and acetonitrile for B(A/B:95/5 for 0.3 min then 95/5 to 60/40 in 3.4 min),flow rate:1.2 mL/min,temperature:40 C,detection:absorbance at 254 nm.0.00.51.01.52.02.53.03.5min050100150200250mAU1243515131411108796121617180.00.51.01.52.02.53.03.5min050100150200250mAU1243515131411108796121617181.Asp2.Glu3.Ser4.Gly5.His6.Arg7.Thr8.Ala9.Pro10.Ammonia11.Tyr12.Val13.Met14.Cys-Cys15.Ile16.Leu17.Phe18.Lys(each 400 pmol/1 L)36头孢唑啉中微量杂质的UFLC分析在纯度试验中，使用常规色谱柱分离构造比较接近的成分往往需要花费较长的时间。并且为了高精度测定微量杂质的含量，需要使用高灵敏度且线性范围广的检测器。使用Prominence 吸光度检测器SPD-20A的宽动态量程和快速高分离用色谱柱Shim-pack XR-ODS进行的唑啉头孢菌素中微量杂质的超快速分析结果。可高精度短时间地测定微量杂质。此分析使用常规LC分析时需要20分钟左右，若使用UFLC则需要约1/5的4分钟便结束了分析。737头孢唑啉中微量杂质的UFLC分析80mAU60402000123min1.71.9min0.00.51.01.52.0mAU0.0165%S/N=96.00.0168%S/N=97.9Cefazoline80mAU60402000123min1.71.9min0.00.51.01.52.0mAU0.0165%S/N=96.00.0168%S/N=97.9CefazolineAbsorbance at 272 nmDetection40 CTemperature2 LSample Volume1.2 mL/minFlow RateA)20mmol/L(Sodium)Phosphate Buffer(pH 2.5)B)AcetonitrileA/B)92/8 to 80/20 in 4 min50/50 for 3 min92/8 for 2.5 min and endMobile PhaseShim-pack XR-ODS(3.0 mm i.d.75 mm)Column38色素的UFLC分析添加在食品中的色素有合成化合物和天然化合物，这些色素水溶性高，多用HPLC进行分析。但在多个色素组合使用时，同时分析所需时间长。在此表示使用Shim-pack XR-ODS，移植到超快速LC进行的色素同时分析例。另外，表示使用LCMS的合成着色剂的分析。12种成分色素的同时分析的结果如下张色谱图。常规LC时所需分析时间为50分钟，而超快速LC时，约1/6的9分钟便结束了分析。39色素的UFLC分析500mAU400300200001234min123Peaks1:Yellow 47:Green 32:Red 28:Blue 13:Blue 29:Red 1064:Red 10210:Red 1045:Yellow 511:Red 36:Red 4012:Red 10510056456789101112500mAU400300200001234min123Peaks1:Yellow 47:Green 32:Red 28:Blue 13:Blue 29Red 1064:Red 10210:Red 1045:Yellow 511:Red 36:Red 4012:Red 10510056456789101112Maxplot at 300-600 nmMaxplot at 300-600 nmDetectionDetection40 C40 CTemperatureTemperature4 4 L LSample VolumeSample Volume1.2 mL/min1.2 mL/minFlow RateFlow RateA)50mmol/L(Anmonium)Acetate Buffer(pH 4.7)B)50mmol/L(Anmonium)Acetate Buffer(pH 4.7)/Acetonitrile(1/1)A/B)90/10 to 0/100 in 5.5 min0/100 for 1.5 min90/10 for 2 min and end A)50mmol/L(Anmonium)Acetate Buffer(pH 4.7)B)50mmol/L(Anmonium)Acetate Buffer(pH 4.7)/Acetonitrile(1/1)A/B)90/10 to 0/100 in 5.5 min0/100 for 1.5 min90/10 for 2 min and end Mobile PhaseMobile PhaseShim-pack XR-ODS(3.0 mm Shim-pack XR-ODS(3.0 mm i i.d d.75 mm).75 mm)ColumnColumn40合成着色剂的UFLC-LCMS分析Detector:LCMS-2010EVColumn:Shim-pack XR-ODS(50 mmL x 2.0 mmI.D.Particle size:2.2 m)Mobile phase:A;20mM ammonium acetate buffer(pH 4.7)B;20mM ammonium acetate buffer(pH 4.7)/acetonitrile=1/1Flow rate:0.5 mL/minInjection volume:5 LTime program:10%B(0 min)-100%B(5.0 min)DUIS,negative,Scan m/z 200-1200,1:tartrazine,2:amaranth,3:indigo carmine,4:new coccine,5:sunset yellow FCF,6:allura red AC,7:fast green FCF,8:brilliant blue FCF,9:acid red,10:phloxine B,11:erythrosine,12:rose bengal0.00.51.01.52.02.53.03.54.04.55.0min0.01.02.03.04.05.06.07.08.0(x1,000,000)123456789101112m/z 467m/z 537m/z 421m/z 407m/z 451m/z 763m/z 747m/z 557m/z 784.5m/z 834.5m/z 972.5TIC41多环芳烃（PAHs）的UFLC分析PAHs是一种判断车辆等废气污染大气环境程度的化学物质。PAHs具有强致癌性，所以这些物质的大气监测是重要的测定项目。PAHs显示强荧光，可以利用荧光检测器进行高灵敏度分析。对于此10种PAHs的分析，在不损失分离状态下，相对于常规LC（分析时间50分钟），UFLC实现了10倍速度的快速化分析（分析时间5分钟）。4201020304050min0255075100mAU0.01.02.03.04.05.0min0255075100mAU1234569Shim-pack XR-ODS (3 mm i.d.75 mm,2.2 m)Retention time of Peak 9:5.07 minN for Peak 9:11,90079Shim-pack VP-ODS (4.6 mm i.d.150 mm,4.6 m)Retention time of Peak 9:50.37 minN for Peak 9:10,60078123456801020304050min0255075100mAU0.01.02.03.04.05.0min0255075100mAU1234569Shim-pack XR-ODS (3 mm i.d.75 mm,2.2 m)Retention time of Peak 9:5.07 minN for Peak 9:11,90079Shim-pack VP-ODS (4.6 mm i.d.150 mm,4.6 m)Retention time of Peak 9:50.37 minN for Peak 9:10,600781234568Chromatographic conditions;mobile phase:water/acetonitrile(4/6,v/v),flow rate:2.0 mL/min(XR-ODS)1.0 mL/min(VP-ODS),temperature:60 C(XR-ODS)50 C(VP-ODS),detection:UV-210 nmPeaks;1:fluorene,2:phenanthrene,3:anthracene,4:fluoranthene,5:pyrene,6:chrysene,7:benzo(b)fluoranthene,8:benzo(k)fluoranthene,9:benzo(g,h,i)perylene.多环芳烃PAHs）的UFLC分析8432,4-DNP-醛/酮类的UFLC分析室内环境污染、车内环境污染已成为社会问题，从室内、车内涂料产生的醛、酮类是造成室内、车内污染的主要原因。通常，醛、酮类的UV吸收区域在nm左右，但吸收太弱，所以使用2，4-二硝基苯肼进行衍生化后以nm测定。此分析使用常规LC分析时需要30分钟左右，若使用UFLC则需要约1/6的5分钟便结束了分析。442,4-DNP-醛/酮类的UFLC分析0.01.02.03.04.05.0min0255075100mAU124351211131097680.01.02.03.04.05.0min0255075100mAU1243512111