西林瓶轧盖气密性再验证方案.doc

冻干粉针剂生产线
西林瓶轧盖气密性再验证方案

文件编号：VAL-工-301-Ⅰ

编制人： 编制日期：

审核部门
审核人
审核日期
生产运营部

设备工程部

制剂车间

质量保证部

批准人： 批准日期:

目录
1、 引言
1.1 验证概述…………………………………………………………………………（3）
1.2 验证目的…………………………………………………………………………（3）
1.3 验证范围…………………………………………………………………………（3）
2、 验证准备
2.1 验证人员及职责…………………………………………………………………（3，4）
2.2仪器仪表校验………………………………………………………………………（5）
2.3参考文件……………………………………………………………………………（5）
2.4相关文件……………………………………………………………………………（5）
2.5相关条件的确认……………………………………………………………… （5，6）
3 、验证实施
3.1验证步骤……………………………………………………………………………（6-9）3.2测试方法……………………………………………………………………………（9）
3.3可接受标准…………………………………………………………………………（9）

1. 引言
1.1 验证概述
冻干箱顶部安装有液压油泵站，油缸等。油缸在油压泵站的驱动下使板层在箱内上下升降。冻干粉针经冻干箱真空冷冻干燥结束后，在冻干箱内启动液压系统将瓶塞完全压入瓶口内。出箱后，用轧盖机（ZG400型）轧铝盖，以保证西林瓶的气密性。西林瓶灌装药液冻干后，在冻干的终点为了确保瓶内的无菌条件，并使胶塞完全压入瓶内，在冻干箱内进行全压塞以前，使瓶内保持一定的负压状态。由于制品从出箱到轧盖完毕，中间要有一定的暂存时间，制品西林瓶的负压有利于维持瓶塞的气密性。事实上这个负压（真空）在全压塞，轧铝盖后，一直将持续到制品的使用。
工艺过程
冻干后西林瓶制品
→
真空全压塞
→
出箱
→
轧盖

在负压状态下该验证共分三批共同完成，通过对西林瓶压胶塞的压力试验和对灌装后的样品进行细菌挑战性试验（微生物侵入试验）以验证压塞及轧盖后西林瓶的密封完整性。实施时间为2015年2月份,确定验证批号为P、Y1、Y2，批量分别为6000支、500支、500支，每支装量1ml，其中每批准备400支灌装培养基的样品，在与产品相同的贮存条件下贮存。在贮存一定的时间间隔（如 12、24个月）后，取出部分样品，按上述方法进行检测，以确定密封系统在贮存期内的有效性。
1.2 验证目的
西林瓶的气密性除与西林瓶轧盖强度有关外，还与冻干箱内压胶塞油泵的设置压力，胶塞在此压力下的弹性和塑性变形等因素相关，通过西林瓶压塞和轧盖密封后瓶密封试验和细菌挑战性试验验证密封完好性，确认西林瓶压塞、轧盖工艺对冻干产品质量的可靠性。
1.3 验证范围
适用于西林瓶压塞、轧盖气密性验证。
2 、 验证准备
2.1 验证人员及职责

部 门
姓 名
岗位或职务
负责项目

制剂车间

主任助理
验证小组组长，负责验证中本部门的协调工作，以保证验证方案规定项目的顺利实施，对整个验证项目负责。
质量保证部

总经理助理
负责验证方案和验证报告的审核，与中心化验室有关工作的协调，现场监督保证整个过程按照验证方案进行。
生产运营部

经 理
负责验证过程技术指导，配合制剂车间进行生产设备验证方案的起草、修订、初审，协调、确定验证生产时间。
生产运营部

经理助理
负责验证过程技术指导，配合制剂车间进行生产设备验证方案的起草、修订、初审，协调、确定验证生产时间。
设备工程部

副经理
协调设备部门进行安装、运行、性能确认的审核及仪器仪表校验。
制剂车间

工艺员
负责制定验证方案及验证的实施。
制剂车间

班组长
负责本岗位验证相关操作及记录的填写。
制剂车间

操作人员
负责本岗位验证相关操作及记录的填写。
制剂车间

操作人员
负责本岗位验证相关操作及记录的填写。
制剂车间

操作人员
负责本岗位验证相关操作及记录的填写。
制剂车间

班组长
负责本岗位验证相关操作及记录的填写。
制剂车间

操作人员
负责本岗位验证相关操作及记录的填写。
制剂车间

操作人员
负责本岗位验证相关操作及记录的填写。
制剂车间

操作人员
负责本岗位验证相关操作及记录的填写。
制剂车间

操作人员
负责本岗位验证相关操作及记录的填写。
设备工程部

主 管
设备安装、运行、性能确认的审核及仪器仪表校验。
质量保证部

职 员
1.进行验证方案、验证报告的审核；
2.监督验证实施过程并按照验证方案对检测数据进行整理归档。
质量控制部

主 管
负责验证中本部门的协调工作，验证中样品的取样，验证项目的检测工作并按照验证方案对检测数据进行整理归档。
质量控制部

职 员
负责验证中样品的取样，细菌内毒素、无菌等项目的检测工作并按照验证方案对检测数据进行整理归档。
2.2 仪器仪表校验
2.2.1 验证使用的仪器
仪表名称
仪器型号
生产厂家
设备编号
使用人
高压蒸汽灭菌锅
LD2X-4011
-------
WJ-001

生化培养箱
LRH-250-A
韶关泰宏医疗器械厂
PYX-003

霉菌培养箱
LRH-250-M
韶关泰宏医疗器械厂
PYX-004

生化培养箱
LRH-250-A
广东省医疗器械厂
PYX-001

霉菌培养箱
LRH-250-M
广东省医疗器械厂
PYX-002

生化培养箱
BD-SPX-600型
南京贝帝实验仪器有限公司
PYX-007

霉菌培养箱
BD-SPX-600型
南京贝帝实验仪器有限公司
PYX-008

恒温培养箱
LDHP-420
天津市中环实验电炉有限公司
PYX-003

净化工作台
SW-CJ-2FD
-------
CJT-003

2.2.2 验证使用的仪表
仪表名称
数量
仪器
型号
准确度
测量范围
生产厂家
校 验
日 期
检定
周期
确认人
压力表
2块
YTNP-63HF6
0.02MPa
0～0.6 MPa
BRIGHTY
2015.3
半年

压差计
2块
2000-60A
2Pa
0～60Pa
MAGNEHELIC
2015.3
1年

压差计
1块
2000-60A
2Pa
0～125Pa
MAGNEHELIC
2015.3
1年

2.3 参考文件
《2010版GMP实施指南》
《2003版药品生产验证指南》
2.4 相关文件
《冻干粉针剂轧盖岗位标准操作规程》
《冻干粉针剂冻干岗位标准操作规程》
《轧盖机(ZG400型)标准操作规程》
《真空冷冻干燥机标(LYO-15型)标准操作规程》
《洁净区容器具清洁标准操作规程》
2.5 相关条件
验证项目
所在环境
设施
设备
工艺条件
B级背景下A级
灌装空调系统
直线式灌装加塞机(KGS10A型)
模拟生产无菌灌装
B级背景下A级
灌装空调系统
真空冷冻干燥机 (LYO-15型)
模拟冻干生产、真空压塞
C级背景下A级
轧盖空调系统
轧盖机(ZG400型)
模拟生产无菌灌装后产品压塞
2.5.1 公用设施及主要设备的验证情况
验证名称
是否完成
验证结论
确认人
厂房空调净化系统验证
已完成
冻干车间空调净化系统各项指标达到GMP要求

清洁验证
已完成
清洁效果达到验证要求

（2） 主要生产设备的验证情况
验证名称
是否完成
验证结论
确认人
LYO-15（SIP、CIP）型真空冷冻干燥机性能？
已完成
满足冻干粉针剂生产的需求

ZG400型轧盖机性能？
已完成
满足冻干粉针剂生产的需求

（3） 验证前必须对设备的仪表进行校验并在有效期内。
（4） 系统检查：试验前检查真空冷冻干燥机真空系统，液压系统，电控系统运转是否正常。
（5） 验证前必须确认本验证所用的西林瓶、胶塞和铝盖按相关操作规程清洗、灭菌并符合规定要求。
（6） 人员培训
培训项目
培训人数
培训日期
培训课时
培训人
GMP无菌制剂
29
2014.6.30
29

人员进入洁净区培训
11
2014.7.14
2

洁净室行为规范培训
11
2014.7.11
2

防止污染与交叉污染
11
2014.7.10
2

职业卫生知识
30
2014.6.5
2

制剂车间应急处置方案演练
27
2014.7.8
2

3 、 验证实施
3.1 验证步骤
3.1.1 西林瓶轧盖后负压保持试验
（1） 真空冷冻干燥机油压系统设置压力为4～6Mpa。
（2） 取5ml西林瓶100支，进行模拟作业，按《直线式灌装加塞机(KGS10A型)标准操作规程》操作，将西林瓶半加塞后和托盘支架一起放入冻干箱内，按《真空冷冻干燥机标(LYO-15型)标准操作规程》抽真空至880mbar，在设定油压下全压塞，然后升高干燥箱压力后出箱。
（3 出箱后目检压塞后外观。
（4） 为保证压塞后产品风险控制，将3.1.1（3）项下经压塞合格产品100支放置2小时后放入色水中进行浸泡，检查是否有进入色水情况。
3.1.2 细菌挑战性试验
（1） 试验样品的制备
（a） 在生产线上取足够量的西林瓶，灌装经最长灭菌程序灭菌的 SCDM/2(大豆胰蛋白胨肉汤)培养基，在冻干机内自动压塞后经轧盖机轧盖后将西林瓶密封。
（b） 将每一试样倒转，使培养基与西林瓶内表面充分接触，在 30～35℃下竖放培养14 天。
（c） 小心去除60 个试样的铝盖，注意不要破坏其密封口。将去铝盖时不慎损坏容器密封性的所有试样剔除。按31.2（1）（b）要求培养样品（在培养期内，当试验中发现任何带盖试样长菌时，则试验无效，须弃去全部试样，重新从头开始试验）。
（2） 确认培养基促菌生长能力——营养性试验
（a） 所有试样培养14 天均不长菌时，随机取20 个带盖试样，每个试样内接种0.1ml的大肠埃希菌（Escherichia coli），菌液浓度：10～100CFU/0.1ml。
（b） 在30～35℃下培养7 天，或培养至所有试样都呈阳性结果。
（c） 若7 天内，所有接种大肠埃希菌的试样中，微生物生长良好，则容器内培养基的促菌生长能力可判为合格。
使用紫外灯下观察肉汤呈蓝白色荧光的现象，来鉴定并确认试样容器内生长的菌为大肠埃希菌。
（3） 挑战菌悬浮液的制备
（a） 从大肠埃希菌（Escherichia coli）的新鲜斜面上取一整环培养物，分别接入含lOml 无菌培养基的试管中，在30～35℃下培养16～18h。
（b） 将每管的培养物分别转入含1000ml 相同培养基(SCDM ／2)的容器内，于30～35℃下培养22～24h。在培养结束时，明显见容器内培养基出现浑浊。
（c） 培养结束后的菌悬液即可用来作容器／密封系统完好性试验。
（4） 微生物侵入试验操作步骤
将3.1.2（1）（a）生产后的容器倒置并将瓶口完全浸没于高浓度（如大于105个/ml）的运动型菌液中，如大肠埃希菌、铜绿假单胞菌或黏质沙雷菌，4小时后，将容器外表面消毒并培养，看是否有挑战性细菌在容器中生长。
（a） 将新鲜的大肠埃希菌（Escherichia coli）的菌悬液倒入合适的盆中，将试样西林瓶倒置在菌悬液中。
（b） 将50 个灌装有经最长灭菌程序灭菌的 SCDM/2(大豆胰蛋白胨肉汤)培养基的试样倒置，并浸入菌悬液中。该组试样为A 组。
试样西林瓶内的无菌培养基应充分接触封口内表面，样品的颈部及封口的外表面应完全浸泡在菌悬液中，见图4-54 。

（c） 同时将25 个去铝盖的试样容器倒置入菌悬液中，该组试样为B 组。
（d） 试验开始时取一份菌悬液，平板计数每毫升所含的活菌数。按3.1.2（2）（c） 确认试验用微生物是大肠埃希菌（Escherichia coli）。
（e） 将A 组和B 组试样容器在菌悬液中持续浸泡约4h。
（f） 浸泡结束时，再用平板计数菌悬液的浓度。
（g） 从菌悬液中取出试样，擦干试样容器外残余的菌悬液，然后用含0.5％过乙酸的70％异丙醇消毒容器外表面。
（h） 取装满培养基有铝盖和去铝盖的样品各两个，作阳性对照。阳性对照用样品制备方法同试样，但不经菌悬液浸泡，其外表用含0.5％过乙酸的70％异丙醇消毒。此后，接种入10～100CFU大肠埃希菌（Escherichia coli），按6.6.2进行培养基的营养试验。
（i） 将消毒后的容器放在塑料袋中，置30～35℃培养7天。操作中应特别注意不要损坏B组无铝盖试样胶塞的密封性。
（j） 挑战试验用菌悬液经灭菌后丢弃。
（k） 将挑战试验用的试样培养7 天，观察试样容器内培养基中微生物的生长情况。
Ⅰ 对每一试样进行观察，有生长记作+，无生长计作－。
Ⅱ 如果试样容器长菌，按3.1.2（2）（c） 方法确认生长菌是挑战微生物——大肠埃希菌。
Ⅲ 如果所有西林瓶都不长菌，则从浸过菌悬液的A 组取10 个试样，B 组取5 个试样，分别按31.2（2）进行培养基的营养检查。
3.2 测试方法
3.2.1 西林瓶压塞后负压保持试验
（1） 出箱后目检压塞后外观，胶塞与西林瓶是否配套。
（2） 为保证压塞后产品风险控制，将3.1.1（3）项下经压塞产品100支不进行轧盖，放置2小时后，将西林瓶倒置于色水中，通过观察西林瓶内是否有色水，最终验证西林瓶与胶塞的气密性。
（3） 本验证试验连续进行三次。
3.2.2 细菌挑战性试验
（1） 结果评价
（a） 步骤3.1.2（2）、步骤3.1.2（4）（h）、步骤3.1.2（4）（k）Ⅲ 中进行的营养试验都合格，试样的挑战试验才有效。
（b） 在挑战试验开始时，挑战用菌悬液浓度(活菌数)必须达到1×106 CFU/ml。
（c） 挑战试验中A 组和B 组如有长菌，需记录长菌的试样数。在A 组中如出现长菌试验，则需按下述要求作进一步调查。
Ⅰ 仔细去除微生物生长的容器的盖和塞，检查容器封口是否有缺损，造成微生物侵入。
Ⅱ 将观察到试样西林瓶封口的缺陷，采用拍照或及其他适当详细记录。
Ⅲ 如果任何挑战试验中长菌的容器不是由于容器封口明显的物理性缺损所致，容器／密封系统挑战试验作失败论处。
（2） 贮存稳定性
Ⅰ 将剩余未经过挑战试验的容器放入箱中，保存在室温，黑暗处。
Ⅱ 在适当的时间间隔(12 个月、24 个月)后取出一些容器，重复挑战试验。
3.3 可接受标准
3.3.1 西林瓶压塞后负压保持试验：检查有真空西林瓶内没有色水，即符合要求。
3.3.2 细菌挑战性试验：培养基澄清不浑浊。