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当归对血虚小鼠抗疲劳作用的研究
【摘要】 　　目的　研究当归对血虚小鼠的抗疲劳作用。方法通过环磷酰胺造小鼠血虚模型，给予当归水煎液2周后，对血虚小鼠体重、外周血象、游泳时间、运动后血乳酸和尿素氮的影响。结果当归水煎液能明显增加血虚小鼠体重、升高红细胞总数、白细胞总数和血红蛋白含量； 6 g/的当归水煎液组还能显着延长游泳时间、降低运动后的LAC及BUN。结论当归水煎液能提高血虚小鼠的抗疲劳作用。
【关键词】 当归； 血虚； 抗疲劳
　　Abstract:ObjectiveTo observe the anti-fatigue effect of Angelica sinensis (Oliv.) Diels on the blood-deficient model mice. MethodsAfter the blood-deficient mice model was induced by injecting cyclophosphamide，mice were given Angelica sinensis (Oliv.) Diels for two weeks, then Angelica sinensis (Oliv.) diels was established with forced swimming test and the changes of body weight, levels of RBC,WBC,HGB, exhaustive swimming time，lactic acid, urea nitrogen were　sinensis (Oliv.) diels could increase body weight and obviously promote the levels of RBC,WBC,HGB in blood-deficient model mice. The swimming time of mice in 6 g/group was significantly prolonged compared with model group. The levels of blood lactic acid and urea nitrogen were decreased. ConclusionAngelica sinensis (Oliv.) Diels has anti-fatigue effect on the blood-deficient model mice.
　　Key words:Angelica sinensis (Oliv.); Blood-deficient; Anti-fatigue
疲劳属中医“虚损”范畴，中医认为精血为体力产生的物质基础，它的生化和运行与中医脾、肾、肝、心有密切关系，人的耐力亦由此而生。尽快消除疲劳，提高机体体质，中医药有很大优势。当归Angelica sinensis (Oliv.) Diels的干燥根具有补血活血、调经止痛、润燥滑肠等功效。本文采用化学药物损伤法造成小鼠血虚模型，研究当归对血虚模型小鼠的影响。
　　1 器材1 药品与试剂
　　当归Angelica sinensis (Oliv.) Diels，生品，购于北京崇光饮片厂，产地甘肃，取当归500 g，加10倍量的水，开始煎煮。第1次1 h，第2次30 min，第3次30 min。合并煎液，过滤蒸发浓缩，然后放入烘箱烘干成粉末。 最终1 g当归粉末相当于原药材 g。

　　全血乳酸试剂盒，南京建成生物工程研究所产品，批号20050615；尿素氮试剂盒，南京建成生物工程研究所产品，批号20050615；环磷酰胺，上海华联制药有限公司产品，批号031205。2 仪器
　　SWELAB血球计数仪，Boule Medical AB 公司产品；瑞典stockholmUV757CRT紫外可见分光光度计，上海精密科学仪器有限公司产品。3 动物KM种小鼠，雌雄各半，体重g，由中国医学科学院动物中心提供，合格证号：SCXK (京) 2004-0001。
　　2 方法
小鼠自然饲养3～4 d，随机分成5组：正常对照组、血虚模型组、当归水煎液低剂量组 g/kg、当归水煎液中剂量组3 g/kg、当归水煎液高剂量组6 g/kg，每组12只。给药组按给药剂量连续灌胃14 d，1次/d，对照组和模型组则灌胃给予相等体积的生理盐水。除正常对照组外，其余4组小鼠于第5 d开始给药1 h后，分别经腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg，连续注射3 d［1］。正常对照组同时注射等量的生理盐水。
　　外周血象测定
　　于末次给药后30 min，眼眶取血，测定小鼠红细胞总数、白细胞总数和血红蛋白含量。
　　小鼠负重游泳实验
　　末次给药后30 min后，鼠尾根部负荷6% 体重的铅丝，置于游泳箱中游泳，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间。以小鼠10 s内无法再浮出水面为依据，来判断动物死亡［2，3］。
　　血乳酸的测定
　　末次给药30 min后小鼠尾部负重, 然后将其放入水深35 cm, 水温(30±)℃游泳箱中游泳10 min。休息15 min后，用毛细玻璃管眼球采血20 μl，用全血乳酸测定试剂盒进行血乳酸测定。
　　血尿素氮的测定
　　末次给药30 min后, 将小鼠放入水深35 cm, 水温(±)℃游泳箱中不负重游泳90 min，休息60 min后，拔眼球采血 ml(不加抗凝剂)，依照血清尿氮素试剂盒说明书操作。于520 nm下，30 min内测定各管吸收度，换算为血尿素氮含量，依照试剂盒说明书操作测定BUN含量。
　　3 结果
　　体征与体重造模小鼠非常行动迟缓，眼睛暗淡无光、血色暗红。正常对照组和给药组小鼠活动灵活, 皮毛光泽, 鼠尾粉红。

　　当归水煎液对血虚小鼠体重的影响表1所示，给药7 d后，各组间体重仍无差异。但第14天，与正常组比较，模型组小鼠体重明显下降()；与模型组比较，低，中，高剂量组动物的体重均有显着性增加。表1 当归水煎液对血虚小鼠体重的影响(略)
　　当归水煎液对血虚小鼠RBC，WBC和HGB的影响
　　血象的改变是血虚最明显的症状。当归活血补血，能明显改善血虚小鼠的外周血象。结果见表2。表2 当归水煎液对血虚小鼠血象的影响(略)

　　从表2可看出，与正常对照组比较，模型组小鼠血象显着降低，说明造血虚模型成功；与模型组比较，当归水煎液低、中、高剂量组能显着升高血虚小鼠RBC水平()，当归水煎液中剂量组能显着升高血虚小鼠的WBC水平()，低、高剂量组能明显升高WBC水平()；当归水煎液低、中、高剂量组水煎液组均能显着升高血虚小鼠HGB水平()。
　　当归水煎液对血虚小鼠游泳时间的影响
　　实验结果如表3所示，血虚小鼠体力下降, 与正常组比较，游泳时间明显缩短。当归水煎液高剂量组能显着延长血虚小鼠游泳时间, 且与模型组比较, 有非常显着性差异(P )。表3 当归水煎液对血虚小鼠游泳时间的影响(略)
　　当归水煎液对血虚小鼠LAC的影响
　　LAC是评价剧烈运动时机体疲劳程度最常用的生化指标。当归水煎液对小鼠负重4%游泳10 min，休息15 min后LAC的影响如表4所示，与正常组对比，血虚小鼠在游泳后LAC显着性增加(P )。与模型组比较，当归水煎液高剂量组能明显降低血虚小鼠运动后的LAC(P )。表4 当归水煎液对血虚小鼠LAC的影响(略)
　　当归水煎液对血虚小鼠BUN的影响
　　BUN与机体机能、疲劳程度以及负荷量的大小呈密切正相关，因此可作评定运动量的指标［4］。当归水煎液对小鼠不负重游泳90 min，休息60 min后BUN的影响如表5所示，与正常组对比，血虚小鼠在游泳后BUN显着性增加(P )。与模型组比较，当归水煎液高剂量组能明显降低运动后的BUN (P )。表5 当归水煎液对血虚小鼠BUN的影响(略)
　　4 讨论
中医认为，经脉失于濡养，心血不足为血虚。当归具有补血活血之功效。本研究证明当归水煎液能明显改善环磷酰胺所致血虚小鼠的体征，并使小鼠体重增加，同时明显升高血虚小鼠RBC，Hb，WBC水平，即具有补血作用。
血虚是慢性疲劳综合征的病机之一。中华人民共和国保健食品检验和评价技术规范2004版中缓解体力疲劳功能检测方法中指出：负重游泳实验结果阳性，且血乳酸、血尿素氮、肝糖原/肌糖元三项生化指标中任两项指标阳性，可判定该受试样品具有缓解体力疲劳功能的作用。 运动耐力的提高是抗疲劳能力加强的表现，游泳时间的长短可以反映动物运动疲劳的程度［5］。在肌肉剧烈收缩时，因供氧不足单靠有氧氧化不能满足能量的要求，必须加速糖酵解的供能过程。在无氧情况下，肌肉在通过糖酵解反应得到能量的同时，也产生了大量的乳酸，乳酸解离生成的氢离子占肌肉中酸性物质解离的85%以上。乳酸的增加使肌肉中氢离子浓度上升，pH下降，进而引起一系列生化变化，是导致疲劳的重要原因［6］，本实验结果表明，6 g/高剂量当归水煎液能显着延长小鼠游泳时间和降低运动后小鼠的乳酸累积。机体在长时间运动不能通过糖、脂肪分解代谢获得足够的能量时，蛋白质和氨基酸代谢加强，从而产生血尿素氮，血清尿素氮的含量与运动呈直线关系，其在体内的蓄积是引起运动性疲劳的一个重要原因。本实验结果表明，6 g/高剂量当归水煎液能显着降低血清尿素氮含量。本实验证实了当归提高血虚小鼠的抗疲劳能力。
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