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仙人掌总皂苷提取条件的优化
【摘要】 　　目的 确定仙人掌总皂苷的最佳提取条件。方法采用单因素实验设计优选仙人掌总皂苷的提取条件，仙人掌中所含有的总皂苷经5%的香草醛冰醋酸和高氯酸混合液处理后显色，用紫外分光光度计在波长560 nm处测定吸光值。结果与结论确定仙人掌总皂苷的最佳提取条件为以70%乙醇为提取溶剂，温度70℃,提取时间6 h，固液比1∶15。　
【关键词】 仙人掌； 皂苷； 提取； 优化
　　AbstractObjectiveTo optimize the extraction coditions of the total saponins from Opuntia　conditions(ethanol concentration, extraction temperature, extraction time, the ration of solid to liquid of extraction system) were determined by the experiments of odd factor, after the total saponins in the Opuntia dillenii were dealt with mixed liquid of 5% vanillin-acetic acid and perchlorate(1∶4), absorption value of total saponins was determined with Ultrospec 2000 spectrophotometer at 560　and ConclusioThe optimum condition is as follows: the solvent is 70% ethanol, the temperature is 70℃, the extracting time is 6h and Solid-liquid ration is 1∶15.
　　Key wordsOpuntia dillenii； Saponin； Extraction； Optimization
仙人掌是仙人掌科仙人掌(Opuntia dillenii Haw) 的根及茎。具有行气活血、清热解毒的作用。主治心胃气痛、痞块、痢疾、痔血、咳嗽、喉痛、乳痛、疔疮、烫火伤、蛇伤［1］。仙人掌属植物含有多种较为复杂的化学成分，主要含有有机酸类、甾醇类、生物碱类、黄酮类、糖类、萜类等［2］。仙人掌中的皂苷化合物是其有效成分之一［3］，其三萜皂苷具有明显的镇痛作用［4］。林爱琴等［5］采用紫外分光光度法，用硫酸-乙醇显色，对仙人掌皂苷化合物进行了提取和含量测定。本文采用单因素试验研究仙人掌总皂苷的提取条件，利用紫外分光光度计测定仙人掌总皂苷的吸光值，确定最佳提取工艺，为仙人掌资源的深度开发利用打下一定的基础。
　　1 器材1 仪器
　　Ultrospec 2000型紫外－可见分光光度计；离心机(BECKMAN公司)；R501型升降恒温水浴锅；R501型旋转蒸发器(上海申科机械研究所)。2 原料及试剂
　　仙人掌；香草醛(AR)；甲醇(AR)；高氯酸(AR)；正丁醇 (AR)；乙醇(工业酒精)；冰醋酸(AR)；石油醚(AR)。3 试剂的配制 水饱和正丁醇溶液［6］
　　在150 ml的分液漏斗中加入21 ml水和100 ml正丁醇，振摇3 min后，静置分层，除去下层，上层则为水饱和正丁醇溶液。 显色剂的配置［7］
　　取香草醛 g加冰醋酸2 ml，再加入8 ml高氯酸，溶解摇匀，配成5%香草醛－冰醋酸和高氯酸混合溶液。4 方法 样液制备
　　称取仙人掌粗粉5 g，置250 ml三口烧瓶中，加入一定量提取剂 ，在一定温度的水浴中回流提取一定时间，经减压抽滤后离心分离，将上层清液转入圆底烧瓶减压浓缩，转入分液漏斗中用石油醚萃取，弃去醚层，将提取液蒸发至干，用25 ml蒸馏水溶解，转入250 ml分液漏斗，用正丁醇萃取，萃取液蒸干，用甲醇溶解，转入25 ml容量瓶中定容备用。
　　单因素设计
　　以不同的提取剂、料液比、提取温度、提取时间为影响因素作单因子实验，确定最佳的提取条件。 分析方法
　　精确吸取 ml定容后的提取液，置于10 ml具塞试管中，置水浴中挥干溶剂，立即取出，流水冷却，精密加入新配置的5%香草醛－冰醋酸和高氯酸混合溶液1 ml，加塞摇匀，置于60℃水浴中加热15 min，取出，流水冷却至室温后再加入冰醋酸5 ml，摇匀于560 nm处测定吸光值，随行试剂作空白对照［8］。
　　2 结果
　　提取剂的选择
　　分别以100 ml的蒸馏水，95%乙醇，85%乙醇，75%乙醇，70%乙醇，65%乙醇，50%乙醇作为提取剂，在80℃水浴中回流提取2 h。结果见图1。
结果表明，不同提取剂提取对仙人掌总皂苷吸光值影响显着，70%乙醇作为提取剂时其吸光值最高，从而确定提取出的仙人掌总皂苷含量最高。
　　料液比的选择
　　分别以5，8，10，15，20倍量的70%乙醇作为提取剂，在80℃水浴中回流提取2 h。结果见表1。表1 不同料液比提取仙人掌总皂苷的吸光值及其平均值料液比测定
结果表明，采用料液比1∶15时，提取率最高，故采用料液比1∶15提取。
　　提取时间的选择
　　用70%乙醇100 ml作为提取剂，分别在80℃水浴中回流提取2，4，6，8 h。结果见图2。
由图2可知，随着提取时间的延长，提取率也随之升高，但超过6 h以后，提取率不再升高，表明提取已近饱和或杂质的溶出率增加，考虑时间和用料的原因，确定6 h是最佳的提取时间。
　　提取温度的选择
　　用70%乙醇100 ml作为提取剂，分别在50，60，70，80℃水浴中回流提取2 h。结果见表2。表2 不同提取温度提取仙人掌总皂苷的吸光值及其平均值
温度测定值
由表2可看出，随着温度的升高，提取率也随之上升，但当达到70℃以后，提取液开始沸腾，温度再上升，提取率也不再上升，故 70℃是最适宜的提取温度。
　　3 结论
通过单因素试验研究仙人掌总皂苷的提取条件，用香草醛冰醋酸高氯酸试剂显色，利用紫外分光光度计在560 nm处测定仙人掌总皂苷的吸光值，得出了仙人掌总皂苷的最佳提取条件为：用70%乙醇为提取剂，料液比为1∶15 ，在70℃下回流提取6 h。
【参考文献】
　　［1］江苏新医学院.中药大辞典，上册 ［M］.上海：上海科技出版社，1986，1, 663..
　　［2］Pieters E P．Fatty acids of opuntia engelmannnii［J］.Phytochemistry，1992，11(8)：2623.
　　［3］陈朝银，赵声兰，曹建新. 仙人掌茎有效成分分析［J］.中国野生植物资源，1997，16：25.
　　［4］覃特营，韦国锋. 仙人掌三萜皂甙镇痛作用的研究［J］.右江民族医学院学报，1995，17(4)：399.
　　［5］林爱琴，方幼兰，林曦. 仙人掌皂甙化合物的提取与含量测定［J］.福建师范大学学报，2003，19：116.
　　［6］任凤莲，邱昌桂，连 琰. 百合总皂甙的提取工艺［J］.中南大学学报，2005，36：69.
　　［7］秦民坚，吴靳蓉，黄 芸，等. 匙羹藤叶总皂苷提取工艺研究［J］.现代中药研究与实践，2003，17:39.
　　［8］徐洁昕，周方钦，江放明，等. 白花败酱总皂苷提取工艺研究［J］.山东中医药大学学报，2005，29：227.