急性髓性白血病分化抗原表达与临床表现及疗效的关系.docx

急性髓性白血病分化抗原表达与临床表现及疗效的关系
【摘要】 目的 探讨急性髓性白血病(AML)分化抗原表达与临床表现和疗效的关系。 方法 用流式细胞术检测111例AML细胞的分化抗原,分析其与临床表现和疗效的关系。 结果 (1)髓系抗原在AML中阳性表达率依次为%(CD13),%(CD33),%(CD34),%(CD15),%(HLA-DR),%(CD14),CD13及CD33在AML各亚型中均有较高的阳性表达率。CD14在M5阳性表达率较高,HLA-DR在M3为阴性。淋系相关抗原在AML中的表达以CD7为主。(2)AML患者中CD15表达与外周血白细胞数以及血幼稚细胞百分比相关;CD7+AML患者更常肝脾肿大。(3)CD34-组CR率高于CD34+组,且达完全缓解时间少于CD34+组。CD7-组CR率高于CD7+组,但达CR时间两组间无明显差别。CD19+组CR率高于CD19-组,而达CR时间无明显差别。CD7+CD34+组CR率少于非CD7+CD34+组,有显着差别。 结论 CD7，CD19及CD34表达与AML的临床表现和疗效有一定关系,可作为AML预后判断的指标。
【关键词】 急性白血病; 抗原; 临床表现; 预后
　ABSTRACT: Objective To analyze expression of differentiation antigen of acute myeloid leukemia(AML) and its relationship with clinical characteristics and prognosis. Methods The expression of differentiation antigen of 111 cases of AML was investigated by flow cytometry assay. Results (1)The frequency of antigen expression on blast cells in AML were %(CD13), %(CD33), %(CD34), %(CD15), %(HLA-DR) and %(CD14) respectively. HLA-DR was negative in M3 patients. CD7, one of the lymphoid antigens, was found to be expressed frequently in the AML blast cells. (2)The expression of CD15+ of AML was related with the blasts‘ count and white blood cell count. Those patients with CD7 usually had spleno-hepatomegaly. (3)The CR rate in the cases with CD34+ was significantly lower than those with CD34-, but the time to CR was longer. CR rate in CD7+ cases was significantly lower than those with CD7-. However, patients with CD19- had lower CR rate than those with CD19+. But interestingly, CR rate in cases with CD7+CD34+ was significantly lower than those with CD7-CD34-. Conclusion CD7, CD19 and CD34 are relating with the clinical characteristics and prognosis of AML, and could be the one of important factors in predicting prognosis.
KEY WORDS: acute leukemia; immunophenotype; prognosis; clinical presentations
急性髓细胞白血病(AML)是一种高度异质性的恶性血液病,临床表现多种多样,抗原表达不一,部分病例诊断分型困难,给AML临床诊治带来一定的困难。随着分子生物学技术的进展,越来越多单克隆抗体(McAb)应用,新一代流式细胞仪广泛使用,现已能够区分大部分白血病细胞来源及分化阶段,为临床诊断分型提供帮助。笔者应用流式细胞术对111例未治疗的AML成人患者进行免疫分型,观察AML细胞免疫表型的特点,探讨其与临床表现以及治疗效果的关系。
　　1 对象与方法
　　对象
　　1999年1月-2006年1月住院的初治AML患者111例,男性62例,女性49例,年龄中位数岁(14~83岁),根据临床表现、血象、髓象及细胞化学染色等确诊。FAB分型:M0 1例,M1 14例,M2 16例,M3 12例,M4 2例,M5 65例,M7 1例。
　　免疫分型
　　化疗前取外周血或骨髓抗凝血标本,常规方法分离与制备细胞标本,单克隆抗体包括:髓系相关单抗CD13，CD14，CD15，MPO，CD33;T淋巴细胞相关单抗CD2，CD3，CD4，CD5，CD7，CD8，CyCD3;B淋巴细胞相关单抗CD10，CD19，CD20，CD22，CyCD22;其他单抗CD34，HAL-DR单抗,应用免疫荧光技术、流式细胞计数仪(FAC Scan,美国Becton Dickinson公司)检测。
　　结果判断
　　淋系抗体染色阳性率≥30%为阳性诊断指标,髓系抗原、细胞质抗原、CD34及HLA-DR抗体染色阳性率≥20%为阳性诊断指标。
　　化疗方案
　　给予DA或DAH等方案化疗(D:柔红霉素,A:阿糖胞苷,H:高三尖杉酯碱)。M3采用全反式维甲酸口服等治疗。疗效判断标准参照文献［1］。
　　统计学处理
　　使用SPSS 统计软件,计数资料用t检验,计量资料用χ2检验。
　　2 结 果
　　FAB各亚型分化抗原表达
　　CD13、CD33在AML各亚型均有较高的表达。CD14在M5表达较高,而在其他各亚型CD14阳性表达率均较低。CD15在M2，M3，M5均有所表达,在M5达%。CD34在M1，M2、M5也有较高表达,分别为%,%和%。HLA-DR在M3不表达。淋系相关抗原在M3不表达,在其余FAB亚型中的表达介于10%~20%；淋系相关抗原表达以CD7为主,在M1阳性表达率最高,达64%(表1)。M0，M4，M7由于病例太少,需进一步积累病历分析。表1 AML各亚型中分化抗原表达情况
　　分化抗原表达与临床表现的关系
　　CD13，CD14，CD33，CD34，HLA-DR等抗原阳性组与阴性组就诊时的临床表现未见明显差别。CD15+和CD15-组外周血白细胞数以及血幼稚细胞百分比有着明显差别,初诊时前者少于后者(),其余临床表现的差别无统计学意义。CD7+组比CD7-组更常出现肝和/或脾肿大,差别有统计学意义(),其他临床表现未见明显差别(表2,3)。表2 分化抗原阳性和阴性AML者临床特征表3 分化抗原阳性和阴性AML者外周血象
　　分化抗原表达与治疗效果的关系
　　111例AML经联合化疗后达完全缓解(CR)者为66例,CR率为%,在各型中分布为:M0 1例,M1 3例,M2 10例,M3 12例,M4 2例,M5 37例,M7 1例。在AML中,CD13,CD14,CD15,CD33等组在达CR时间上和CR率上均未见明显差别。CD34-组与CD34+组在CR率、达CR时间差别有统计学意义(),前者达CR率高于后者,而达CR时间少于后者。CD7-组CR率高于CD7+组(),而达CR时间无明显差别。CD19+组CR率高于CD19-组(),而达CR时间无明显差别。CD7+CD34+组CR数少于非CD7+CD34+组,差别有统计学意义(),而达CR时间上未见明显区别(表4)。表4 AML分化抗原表达与治疗效果的关系
　　3 讨 论
近年来,免疫分型已成为诊断AML不可缺少的重要标准,但是AML免疫表型与AML临床表现、预后的关系尚有争议。免疫表型分析是AML分型诊断的重要手段之一。在髓系抗原标记中,最常见的是CD33及CD13,其次为CD15及CD14本研究中AML抗原的阳性表达频率依次为CD13CD33CD15CD14,与报道相近［2］。因此,AML免疫分型时,单克隆抗体的选择一般为CD33，CD15联合CD13和/或CD14。HLA-DR多在分化较差的M0、M1及M5中表达。本组显示,HLA-DR在M1及M5中表达较高(%及%),在较分化的M3中未见表达,与一般国内外结果相近,这是确诊M3的一个重要指标［3］。此外,本组资料表明,淋系抗原在AML中表达,以CD7(%)为主,主要分布在M1、M5中,分别占%及%,而在M3中无分布。有研究指出,AML CD7抗原表达与FAB亚型有一定的联系,CD7+ AML多见于不成熟的亚型,如M1及M5等预后较差的亚型,而预后较好的亚型如M3则较少见,这与林慧君等报道相一致［4］。但也有研究表明,CD7在成人AML不同的FAB亚型中均可表达［5］。因此,CD7的表达与AML分型的关系仍有待进一步研究。
笔者资料表明,AML免疫表型与患者临床表现及血象特点的关系不尽相同。CD13，CD14，CD33，CD34，HLA-DR等抗原和AML患者临床表现无特殊相关性。CD15抗原表达与AML患者外周血白细胞数以及外周血幼稚细胞百分比的相关性明显,这种相关性的临床意义还不太清楚。CD7+组AML比CD7-组AML更易出现肝和/或脾肿大,可能与预后有关。笔者的资料说明,急性髓性白血病免疫表型与临床表现的关系尚不明确。因此,目前有学者提出可根据年龄、白细胞数等临床表现以及多个免疫分型指标建立一个积分系统,以更好地判断免疫表型和临床表现之间的关系［5］。
　　AML分化抗原表达与化疗效果的关系也是一个有争议的问题。比较免疫表型和化疗效果的关系,主要观察CR率和达CR时间。笔者资料表明,CD34，CD7，CD19可能与AML的化疗效果存在一定的相关性。CD34是造血干/祖细胞的特征性标志,多数学者认为AML中CD34表达与AML的低缓解率及短生存期有关,仅少数认为CD34+AML与CD34-AML病例的缓解率、无病生存期无差异［6］。本组结果表明,CD34+AML者CR率明显低于CD34AML者,而且达CR的时间大于CD34-AML组,是预后不良的指标之一,和Chang等研究相符合［7］。CD34+AML患者预后差的原因,可能与CD34+AML细胞恶性克隆分化受阻于细胞较早期阶段,对化疗药物敏感性较差,还可能与CD34+AML细胞的多药耐药基因以及基因移位有关 ［8-10］。CD7是低分化AML的一个常见淋系标记,与预后的关系各家报道不一,本组资料显示CD7+AML组预后较差,与国内外报道相近［11-12］。本组资料还表明,CD34与CD7在AML同时表达的病例预后差,CR率下降明显,进一步说明了CD34与CD7可作为预后判断的指标之一。本组资料显示,表达CD19的AML患者CR率较高,国外有报道,AML同时伴有CD19抗原表达者常提示存在t(8;21),是预后较好的标志［13］,因此CD19也可以作为预后较好的指标之一。
综上所述,笔者认为CD7，CD19，CD34表达与AML的临床表现和疗效有一定关系,但作为AML预后判断的明确指标还需要进一步研究。
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