影响血液凝固的因素及其红细胞渗透脆性.pptx

实验目的实验目的 观察某些因素对血液凝固的影响观察某些因素对血液凝固的影响 异物（棉花、纱布、石蜡油）异物（棉花、纱布、石蜡油）温度（水浴、冰浴）温度（水浴、冰浴）抗凝物（肝素、草酸钾）抗凝物（肝素、草酸钾）熟悉红细胞溶血现象熟悉红细胞溶血现象实验原理：生理止血功能实验原理：生理止血功能血管损伤血管损伤血管内皮下组织暴露血管内皮下组织暴露血小板激活血小板激活粘附、聚集、释粘附、聚集、释放放血小板止血栓形成血小板止血栓形成（初步止血）（初步止血）血凝块形成血凝块形成（有效止血）（有效止血）凝血系统激活凝血系统激活纤维蛋白形成纤维蛋白形成影响生理止血的因素影响生理止血的因素（1）影响凝血酶活性：）影响凝血酶活性：肝素肝素（2）物理因素：）物理因素：接触面（纱布、石蜡油）接触面（纱布、石蜡油）温度（温度（37、冰浴）、冰浴）（3）化学因素：）化学因素：抗凝剂：与抗凝剂：与Ca2+结合的草酸钾结合的草酸钾实验步骤实验步骤1.取取7支试管，按表支试管，按表5-3处理试管，并在各试管上处理试管，并在各试管上 做好标记。做好标记。2.家兔耳缘静脉注射家兔耳缘静脉注射3戊巴比妥钠戊巴比妥钠1.0mL/kg，气管插管，一侧颈总动脉插管（动脉插管内气管插管，一侧颈总动脉插管（动脉插管内 先充满先充满0.2肝素生理盐水）。肝素生理盐水）。3将动脉插管内血液及生理盐水将动脉插管内血液及生理盐水放净放净，向试管，向试管 内各注入内各注入2mL左右新鲜兔血（试管上标号编左右新鲜兔血（试管上标号编 号和刻度），开始计时，并用拇指堵住管口号和刻度），开始计时，并用拇指堵住管口 倒转倒转2次次，使血液与试管内容物相混。，使血液与试管内容物相混。4 4自血液注入试管后每隔自血液注入试管后每隔60s60s将各试管轻轻倾斜将各试管轻轻倾斜 一次（倾斜一次（倾斜4545度角），观察其中的血液是否度角），观察其中的血液是否 已凝固，发现其中的血液已呈凝胶状而不再已凝固，发现其中的血液已呈凝胶状而不再 流动时记录其时间。如超过流动时记录其时间。如超过3030分钟血液仍未分钟血液仍未 凝则视为凝则视为“不凝不凝”。5 5以第一管的凝血时间为对照，比较其余各管以第一管的凝血时间为对照，比较其余各管 的凝血时间有何变化。的凝血时间有何变化。6 6最后向第最后向第7 7管内加入管内加入10%10%氯化钙溶液氯化钙溶液1 1滴，观滴，观 察管内血液是否凝固。察管内血液是否凝固。实验步骤实验步骤表表5-3 影响血液凝固的理化因素实验结果影响血液凝固的理化因素实验结果序号序号实验条件实验条件凝血时间（凝血时间（min）1干燥空白试管干燥空白试管4分分30秒秒2加纱布少许加纱布少许4分钟分钟3用石蜡油润滑用石蜡油润滑4分分30秒秒437水浴水浴3分分50秒秒50冰浴冰浴14分钟分钟6肝素肝素100ul不凝不凝7草酸钾草酸钾100ul不凝，加不凝，加CaCl2后后10分钟分钟2.比较不同处理因素对血液凝固的影响，比较不同处理因素对血液凝固的影响，结合思考题（结合思考题（p91p91）分析原因，写实验报）分析原因，写实验报告。告。1.填写表填写表5-3实验后处理实验后处理1.1.实验前试管上做好实验标记、刻度标记。做好实验前试管上做好实验标记、刻度标记。做好 分工（放血、接血、计相互配合好）。分工（放血、接血、计相互配合好）。2.2.取血前，要先将动脉插管内的血液及生理盐水取血前，要先将动脉插管内的血液及生理盐水 放净，再取新鲜血液进行后续试验。放净，再取新鲜血液进行后续试验。3.3.血液加入试管后立即混匀、计时。血液加入试管后立即混匀、计时。4.4.判定凝血的标准以试管倾斜判定凝血的标准以试管倾斜4545度，试管内血液度，试管内血液 不流动为准，仔细观察结果，记录凝血时间。不流动为准，仔细观察结果，记录凝血时间。5.5.各试管应保持基本条件（试管口径、血量、温各试管应保持基本条件（试管口径、血量、温 度）一致。不要人为地手握加温或反复摇动，度）一致。不要人为地手握加温或反复摇动，以防外部条件影响实验结果。以防外部条件影响实验结果。注意事项注意事项红细胞渗透溶血实验红细胞渗透溶血实验家兔动脉血家兔动脉血2ml2ml，按表按表5-45-4滴入滴入红细胞悬红细胞悬液液1-21-2滴，轻轻摇匀滴，轻轻摇匀 1 1 1010 1010支不同浓度支不同浓度NaClNaCl溶液试管（低溶液试管（低 高）高）静置静置3030分钟分钟 实验步骤实验步骤教师示教教师示教 完全溶血完全溶血 管内液体完全管内液体完全红色透明红色透明 部分溶血部分溶血 上层上层红色透明红色透明 下层下层红色不透明红色不透明(混浊混浊)不溶血不溶血 上层上层浅黄色浅黄色或无色透明或无色透明 下层下层红色不透明红色不透明记录刚开始出现部分溶血及完全溶血时记录刚开始出现部分溶血及完全溶血时NaClNaCl溶液浓度溶液浓度结果观察结果观察下次实验下次实验:家兔呼吸运动的调节家兔呼吸运动的调节预习要点：预习要点：1.1.掌握呼吸运动的实验方法掌握呼吸运动的实验方法,各种理化因素各种理化因素 对呼吸运动的影响及其原理。对呼吸运动的影响及其原理。2.2.熟悉熟悉MedlabMedlab生物信号采集处理系统的实验生物信号采集处理系统的实验 记录和实验结果处理方法。记录和实验结果处理方法。预习要求预习要求PF3 Ca2+V内源性凝血内源性凝血外源性凝血外源性凝血XII XIIa接触异物接触异物XI XIaIX IXaPF3 Ca2+VIIIX Xa Ca2+组织损伤释放组织损伤释放X凝凝血血酶酶原原激激活活物物形形成成凝凝血血酶酶形形成成纤纤维维蛋蛋白白形形成成II IIa纤维蛋白原纤维蛋白原 纤维蛋白纤维蛋白稳定的纤维蛋白多聚体稳定的纤维蛋白多聚体XIIIa4ML离心试管200UL一次性枪头在试管2ML处划一条黑线避免放血时不好操作试管内放碎布样本注意大概数量冰浴示意图