PTEN基因蛋白与Ⅰ型子宫内膜癌预后的关系.docx

PTEN基因蛋白与型子宫内膜癌预后的关系【摘要】 目的 研究PTEN基因蛋白在型子宫内膜癌中的表达，探讨其与型子宫内膜癌预后的关系。 方法 应用现代免疫组化SP染色法检测PTEN基因蛋白在35例型子宫内膜癌组织中的表达，采用Kaplan-Meier生存率曲线描述型子宫内膜癌中PTEN表达组和未表达组的术后生存率，并采用Log-Rank检验分析组间差异。 结果 35例型子宫内膜癌PTEN蛋白表达缺失率为%。14例患者随访资料完整，其中PTEN未表达组患者的中位生存期天，PTEN表达组患者的中位生存期天。PTEN表达组的生存率明显高于PTEN未表达组。 结论 PTEN可能是型子宫内膜癌中突变率较高的基因，PTEN蛋白表达是I型子宫内膜癌患者预后良好的标志。 关键词 型子宫内膜癌 PTEN 预后 免疫组织化学SP法 Prognostic correlation of tumor-suppressor gene PTEN in type I endometrial carcinoma. 【Abstract】 Objective To determine the potential role of PTEN expression in the prognosis of type I endome-trialExpression of PTEN was detected by immunohistochemical staining SPWe detected loss of PTEN protein expression in23cases of35type I endometrialmedian survival time of PTEN-positive cases was918days，while that of PTEN-negative casessurvival rate of PTEN-positive cases was significantly higher than that of PTEN-negativeThe loss of PTEN expres-sion is relatively frequent in type I endometrialstaining is a significant prognostic indicator of favorable survival for patients with typeendometrial carcinoma. Key words type I endometrial carcinoma PTEN prognosis immunohistochemistry SP method 子宫内膜癌是女性生殖道最常见的三大恶性肿瘤之一，其确切病因尚不清楚。根据子宫内膜癌的病理及临床特征，可分为两型:雌激素相关型与非雌激素相关型。前者分化较好，预后良，发病年龄相对年轻;后者分化差，子宫内膜多萎缩，发病年龄相对较大 15 。随着分子生物学技术的发展，人们认识到癌是一种基因病，有3种特殊的基因参与癌的发生、发展。其中抑癌基因PTEN与I型子宫内膜癌的关系是目前研究的热点。PTEN基因与I型子宫内膜癌预后的关系，目前国内尚未见这方面的报道。我们用SP免疫组化法对型子宫内膜癌组织中PTEN蛋白表达情况进行研究，旨在探讨PTEN蛋白表达与型子宫内膜癌患者预后的关系。1 材料与方法 病例和标本 选取1998年1月2003年8月我院病理科存档处手术切除的型子宫内膜癌患者35例的石蜡标本，35例患者年龄2673岁，平均岁，术前均未接受放疗、化疗及性激素类药物治疗。其中14例患者随访资料完整，死亡9例，存活5例。同时选取同期因其它原因行子宫切除的10例正常子宫内膜组织作对照，年龄3262岁，平均岁。 试剂和方法 鼠抗人PTEN单克隆抗体、SP试剂盒及DAB KIT染色剂均购自福州迈新公司。石蜡切片常规脱蜡至水，高压抗原修复，血清封闭，滴加1200PTEN鼠抗人单克隆抗体4过夜，生物素标记的第二抗体室温下孵育10min，再以链霉菌抗生物素过氧化物酶溶液室温下孵育10min，最后用DAB显色，苏木素复染，酒精梯度脱水，二甲苯封片，每一步骤间均用PBS缓冲液冲洗3次，每次3min。每批均设阴性对照和阳性对照，阳性对照为正常的子宫内膜组织切片，阴性对照为未加一抗的PBS缓冲液，实验条件严格一致。 结果判断和分析 高倍镜下综合染色强度和阳性细胞所占比例进行半定量测定。染色强度评分标准:不着色0分，黄色1分，棕黄色2分，黄褐色3分。阳性细胞所占比例评分标准:阳性细胞数10%者0分，10%40%者1分，40%70%者2分，70%者3分。两种评分相加，01分为阴性，2分为弱阳性，34分为阳性，56分为强阳性。统计学处理采用Kaplan-Meier描绘生存率曲线，Log-Rank检验组间差异。2 结果 1 PTEN蛋白在各类组织中的分布 PTEN蛋白定位于正常子宫内膜腺上皮细胞胞浆，阳性细胞呈弥漫性或局灶性分布;恶性变的细胞表现为PTEN蛋白表达减弱或缺失。35例型子宫内膜癌中，23例阴性表达，11例弱阳性表达，1例阳性表达，表达缺失率为%。 PTEN蛋白表达与型子宫内膜癌预后的关系 型子宫内膜癌组织中，PTEN未表达组患者的平均生存天数天，中位生存期天;PTEN表达组患者的平均生存天数天，中位生存期天。PTEN未表达组的生存率曲线较PTEN表达组差，经 Log-rank检验，示两组间生存率差异有显着性。详见表1，图1。 表1 14例型子宫内膜癌术后生存天数略图1 型子宫内膜癌PTEN表达组与PTEN未表达组的生存率曲线图略 3 讨论 PTEN基因是1997年Li等 6，7 在人染色体10q分离得到一个新的具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因。PTEN基因突变或缺失导致磷酸酶活性丧失，使细胞发生恶性转化。PTEN蛋白水平与子宫内膜癌预后的关系，是近几年许多学者关注的问题。Kanamori等 8，9 对98例I型子宫内膜癌患者进行术后随访发现，PTEN蛋白表达阳性组的生存率明显高于PTEN蛋白表达阴性组分别为%和%，提示PTEN蛋白表达水平有预测预后的价值。I型子宫内膜癌PTEN蛋白表达提示预后良好，可能与PTEN基因的下列作用机制有关:PTEN通过对细胞内第二信号分子磷脂酰肌醇-三磷酸去磷酸化 10 ，抑制依赖PIP 3 的磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白磷酸激酶B信号传导通路的活性，影响其下游通路的作用靶的磷酸化水平，从而诱导凋亡，并介导G 1 期停滞，影响基因的表达，对细胞生长具有负性调节作用 1113 。PTEN氨基酸序列与张力蛋白和辅助蛋白高度同源，PTEN基因可能通过调节细胞聚集粘附功能，影响肿瘤细胞的浸润和转移 14，15 。本研究也同样发现，35例I型子宫内膜癌中，PTEN表达组的中位生存期为天，PTEN未表达组的中位生存期为天。同时Kaplan-Meier生存率曲线也非常直观的反映PTEN表达组的生存率明显高于PTEN未表达组。提示PTEN蛋白表达水平可以作为判断I型子宫内膜癌预后的分子标志物，为临床治疗提供指导。 参考文献 1 BoydBiology in the Clinicopathologic Assessment Of En-dometrial CarcinomaOncol，1996，61:163-165.2 Matias-Guiu X，Catasus L，Bussaglia E，etPathology Of Endometrial Hyperplasia andPathol，2001，32:569-577. 3 ShermanOf Endometrial Carcinogenesis:a Multidisci-plinary ，2000，13:295-308. 4 苏勤.妇科肿瘤分子病理研究进展的启示.中华病理学杂志，2003，32:305-307.5 乐杰.妇产科学，第6版.北京:人民卫生出版社，2004，298-303.6 Li J，YenC，Liaw D，et ，aPutative Protein Tyrosine Phosphatase Gene Mutation in Human Brain，Breast，and Prostate ，1997，275:1943-1946. 7 Li DM，Sun ，Encoded by a Candidate Tumor Suppressor Locus，is a Novel Protein Tyrosine Phosphatase Regulated by Transforming Growth Factor Res，1997，57:2124-2129. 8 Kanamori Y，Kigawai J，Itamochi H，etExpression is Associ-ated with Prognosis for Patients with Advanced Endometrial Carcinoma Undergoing PostoperativeJ Cancer，2002，100:686-689. 9 Terakawa N，Kanamori Y，Yoshidaof PTEN Expression FoIIowed by Akt Phosphorylation is a Poor Prognostic Factor for Patients with En-dometrialRelat Cancer，2003，10:203-208.10 Weng LP，Smith WM，Dahia PLM，etSuppresses Breast Can-cer Cell Growth by Phosphatase Activity-Dependent G1Arrest Fol-lowed by CellResearch，1999，59:5808-5814. 11 Matsushima-Nishiu M，Unoki M，Ono K，etand Gene Ex-pression Profile Analyses Of Endometrial Cancer Cells Expressing Ex-ogenous ，2001，61:3741-3749. 12 AnHJ，Lee YH，Cho NH，etof PTEN Expression in En-dometrial Carcinoma is Associated with Down-Regulation of Cyclin-Dependent Kinase lnhibitor，2002，41:437-445. 13 Hu X，Kwon CH，Schlosshauer PW，etInduces GCell Cycle Arrest and Decreases Cyclin D3Levels in Endometrial Carcinoma ，2001，6l:4569-4575.14 Tamura M，Gu JG，Matsumoto K，etOf Cell Migration，Spreading，and Focal Adhesions by Tumor Suppressor ，1998，280:1614-1617.15 Tamura M，Gu JG，takinoT，etsuppressor PTEN inhibition of cell invasion，migration，and growth:differential involvement of focal adhesion kinase andRes，1999，59:442-449.