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1、第22章 免疫诊断 第一节 抗原或抗体的检测 一、抗原抗体反应的原理抗原抗体的结合实质:抗原表位与抗体超变区中抗原结合点之间的结合。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原与抗体的结合具有高度的特异性。这种特异性如同钥匙和锁的关系。一、抗原抗体反应的原理(一)抗原抗体反应的特异性 一种抗原一般只能与由它刺激所产生的抗体结合。抗原抗体结合力的大小表示:亲和力:抗体分子单一抗原结合部位与一个相应抗原表位间互补结合的强度。一、抗原抗体反应的原理(一)抗原抗体反应的特异性 影响抗原抗体结合的因素:抗原抗体空间构象的互补程度 温度 酸碱度 离子强度一、抗原抗体反应的原理(二)抗原抗体反应的可见

2、性二、抗原或抗体的检测方法(一)凝集反应 细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集团快。1.直接凝集 玻片凝集试验 试管凝集试验 2.间接凝集二、抗原或抗体的检测方法(二)沉淀反应 可溶性抗原与相应抗体结合后出现沉淀物.1.单向免疫扩散 2.双向免疫扩散 3.免疫电泳 4.免疫比浊二、抗原或抗体的检测方法(三)补体参与的反应 1.补体结合试验 2.溶血空斑试验(四)用抗体或抗原标记的抗原抗体反应 1.免疫荧光法 直接荧光法 间接荧光法二、抗原或抗体的检测方法(四)用抗体或抗原标记的抗原抗体反应 双抗体夹心法 间接法 2.酶免疫测定 BAS-ELISA 酶联免疫斑点试验 免疫组化技术二、

3、抗原或抗体的检测方法(四)用抗体或抗原标记的抗原抗体反应 3.放射免疫测定法 4.化学发光免疫分析 5.免疫印迹法 6.免疫PCR第二节 免疫细胞的测定一.淋巴细胞的分离与类型鉴定 1.免疫荧光法 2.磁珠分离法 3.淘选法 4.流式细胞术 5.抗原肽-MHC分子四聚体技术(p236)第二节 免疫细胞的测定二.白细胞功能测定 (一)T细胞功能测定 1.T细胞增殖试验 3H-TdR掺入法 MTT法(p237)2.细胞毒试验 51Cr释放法 乳酸脱氢酶释放法 凋亡细胞检查法第二节 免疫细胞的测定二.白细胞功能测定 (一)T细胞功能测定 3.细胞因子检测 免疫学检测法 生物活性测定法 PCR 4.皮

4、肤试验 第二节 免疫细胞的测定二.白细胞功能测定 (二)B细胞功能测定 1.B细胞增殖试验 2.抗体形成细胞试验第二节 免疫细胞的测定二.白细胞功能测定 (二)吞噬细胞功能测定 1.趋化功能测定 Boyden小室法 琼脂糖凝胶法 过氧化物酶测定法 2.吞噬功能测定 NBT试验 荧光标记物试验第三节 免疫学检测方法的应用一.免疫学检测方法的评估与选择 特异性真阴性特异性真阴性/(真阴性假阳性)(真阴性假阳性)100100 敏感性真阳性敏感性真阳性/(真阳性假阴性)(真阳性假阴性)100100第三节 免疫学检测方法的应用二.疾病的诊断 1 感染性疾病 2 免疫缺陷病 3 自身免疫病 4 超敏反应性疾病 5 肿瘤三.免疫学鉴测

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