复方中药对实验小鼠抗疲劳效果的研究.docx

复方中药对实验小鼠抗疲劳效果的研究【摘要】目的研究复方中药对实验小鼠抗疲劳效果高低。方法以昆明种雄性小鼠为实验对象研究复方中药对游泳小鼠的抗疲劳效果。结果药物组小鼠游泳至力竭后血红蛋白、血乳酸、乳酸脱氢酶、血尿素和超氧化物歧化酶、丙二醛等测试指标的浓度与对照组相比均有明显变化，呈非常显着性差异。结论复方中药的抗疲劳效果是很显着的。 【关键词】复方中药 运动性疲劳 氧自由基 随着 体育科学 援救和竞技体育的飞速，配合先进的实验条件，以复方中药作为抗疲劳效果的研究已成为当前研究的重点课题。自二十世纪七八十年代起我国运动能力的实验研究，取得了可喜的成效。而根据中药的配伍方法及原则将不同药物配制成复方中药用于体育科学领域抗疲劳的研究仍有广阔的研究前景。本研究就是在此基础之上，结合我国丰富的中药资源，开发复方中药的抗疲劳效果，一方面为充分挖掘我国丰富的药物资源做基础，另一方面也为更好地服务于体育事业贡献力量。1 对象与方法研究对象本实验选用昆明种雄性8周龄小鼠40只，体重为(25)g，由制药厂实验动物中心提供。研究方法中药的配制1本方以人参和绞股蓝为主药，而配以当归、枸杞子等臣药组成。将中药按一定配伍比例配好后，研碎制成粉，装入蒸馏器，以50%的乙醇，用KDM型调温电热套加热40 min左右，温度控制在70左右，趁热过滤，药渣再经过如上处理910次，直到滤出液基本上呈清水状态，然后将滤出液装入蒸馏器恒温加热蒸发制成浓缩液，随后定容成每毫升液体中含生药 g，罐装消毒，密封保存。动物的饲养和灌胃整个实验过程中，动物均在室温(242)，相对湿度为%的实验室内饲养，光照时间同 自然 变化，自由饮食。实验前一周为适应期。适应期过后小鼠按体重随即分组，分为安静对照组、运动对照组、安静服药组和运动服药组4组，并按每笼10只分笼饲养。在进行小鼠灌胃时，用复方中药浓缩液再加蒸馏水稀释成相应容积的液体，服药组小鼠按生药30 g/的剂量进行灌胃2。对照组灌胃相应剂量的生理盐水作为安慰剂。运动训练方案运动组小鼠在进行适应性的为期1周的饲养后，采用递增负荷式游泳训练手段以训练时间为变量进行训练，即第1周采用20 min递增至60 min的训练，每两天一个递增时间段，周日休息；第二周采用60 min递增至100 min的训练，每两天1个递增时间段，周日休息；第3周采用由100 min至140 min的训练，每两天一个递增时间段，第4周共计训练两次，首先采用负重6%训练直至力竭一次，然后休息1 d，随后采用负重6%力竭游泳训练致使被训练小鼠达到疲劳状态后，即刻取样测验。取样方法小鼠在取样前为不影响实验结果的有效性不采用任何麻醉方法。采用断头取血，然后解剖其尸体取出肝脏样本。指标的选择根据复方中药的功能作用，对小鼠进行测定时选择血红蛋白、血乳酸、血尿素、超氧化物歧化酶和丙二醛作为测试指标，对实验组和对照组进行对比测试，并对所测试指标进行显着性检验。数据所有结果以s表示，用统计进行统计分析，差异显着性水平为P。以指标的变化为影响因素，进行多因素分析，相关组间比较用t检验。2 结果复方中药对小鼠血液指标的影响结果见表1。表1 复方中药对小鼠血液生化指标的影响由表1可看出，两安静组血液Hb相比较无差异；游泳力竭即刻，两个运动组的血液Hb均有所下降，但服药运动组的下降幅度显着小于运动对照组的下降幅度，具有显着性意义。两安静组全血LD浓度都较低，且服药安静组稍低于安静对照组，但不呈显着性差异；游泳至力竭即刻，运动对照组与服药运动组全血LD浓度都急剧升高，服药运动组与安静对照组和运动对照组相比都具有显着性差异。安静状态下，小鼠血清LDH保持在较低的正常水平范围内，两安静组之间无差异，游泳至力竭即刻，两运动组小鼠血清LDH高于两个安静组；且运动对照组血清LDH升高的幅度明显大于服药运动组，呈非常显着性差异。两安静对照组血清BUN相比无显着性差异；游泳至力竭即刻两运动组的血清BUN均增加，但运动对照组的增加幅度远高于服药运动组，具有非常显着性差异。复方中药对小鼠肝脏超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的影响结果见表2。表2 复方中药对小鼠肝脏线粒体SOD和MDA的影响由表2表明，经1个月的饲养后，服药安静组肝脏线粒体中SOD活性要高于安静对照组，但是不存在显着性差异；游泳至力竭即刻，运动对照组与服药运动组小鼠肝脏组织中SOD活性均高于两个安静组，相比之下，服药运动组肝脏SOD活性升高幅度远高于运动对照组。MDA含量两服药组均低于其对照组，虽然两安静组都处于较低水平，但服药安静组肝脏组织中MDA含量低于对照组。游泳至力竭即刻，小鼠肝脏组织中MDA均明显低于运动对照组，且明显高于安静组。显然这与复方中药对小鼠机体组织清除运动产生过剩自由基的作用有关，从而能减少组织中脂质过氧化的损伤。3 讨论复方中药对小鼠抗自由基氧化损伤效果的影响实验结果表明：游泳至力竭即刻，小鼠肝脏中SOD活性明显高于两个安静组，相比之下服药运动组升高的幅度明显高于运动对照组升高的幅度；而MDA含量升高的幅度则显着低于运动对照组的升高幅度。由于SOD是清除超氧阴离子自由基的特异性酶，是机体内清除活性氧自由基的第一道防线，同时具有抗衰老、抗氧化、抗肿瘤、抗辐射、抗炎症等重要作用3。其活力是反映机体清除氧自由基能力的重要指标之一。而MDA则是氧自由基攻击不饱和脂肪酸，导致脂质过氧化的终末产物，它含量的多少直接反映生物膜被脂质过氧化造成破坏的程度大小4。因此，从上述数据可以看出，该复方中药对小鼠的抗氧化具有良好的效果。其机理可能是：复方中药中的人参和绞股蓝的有效成分能够防止运动过程中产生的自由基氧化这种不稳定的因素，减少对细胞膜的氧化损害，从而维持膜的完整性和正常功能。复方中药对小鼠抗疲劳能力的影响从小鼠的实验数据指标中可以充分显示出，复方中药对抗疲劳效果十分显着。实验结果显示：小鼠服药运动组血红蛋白指标明显高于运动对照组，全血乳酸、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、血尿素氮等的血液指标明显低于运动对照组。血红蛋白的主要功能是运载氧，运动力竭组即刻指标明显增高，说明该组小鼠的运氧和载氧功能得到提高；同样，血液的LD，LDH，CK，BUN等指标升高的幅度与对照组相比较低。有研究证实5，小鼠在力竭运动时，血浆pH值显着下降，血乳酸值显着升高，是引起疲劳的重要原因之一。运动可使骨骼肌LDH活力降低，这也可能是造成血清LDH活力升高的一个原因，骨骼肌与心肌中LDH在运动后大量进入血液，血清中LDH升高，而骨骼肌中的LDH活力却下降，从而血液中的pH值升高，致使了血乳酸浓度的积累6。同时CK浓度的变化也说明了该复方中药对大强度运动后的CK增加具有一定的缓解作用。这是因为人体骨骼肌、心肌、脑、平滑肌中都含有CK，以骨骼肌含量最多。CK是骨骼肌能量代谢的关键酶之一，其作用是催化三磷酸腺苷和磷酸肌酸之间高能磷酸键可逆性的转移7。它是短时间激烈运动时能量补充和运动后ATP恢复反应的催化酶，与运动时、运动后能量平衡及转移的关系密切。而且在长时间的剧烈运动中，肌肉能量平衡遭到破坏，肌糖元大量消耗，蛋白质分解代谢加速，致使BUN增加8。因此，BUN的变化也充分显示了其抗疲劳的效果。复方中药的抗疲劳作用机理复方中药中的主药人参和绞股蓝中所含的多种皂苷都具有明显的抗疲劳和抗氧化作用的效果；臣药当归的主要成分当归多糖可能通过促进机体分析粒细胞系、单核细胞系集落刺激因子增加红细胞、白细胞、血红蛋白和骨髓有核细胞；枸杞子的主要成分枸杞子多糖对四氯化碳引起的小鼠肝细胞损伤有保护作用，能降低物理应激引起的脑与脾中的MDA的升高9。中药还可以使运动小鼠血睾酮升高，但是不具有显着性意义。4 小结经4周复方中药灌胃后，可使服药组小鼠的肝脏MDA显着性降低，同时也使肝脏SOD活性显着增强，因而，有测试指标可以看出此方具有较好的抗氧化作用。复方中药具有补肾活血、强筋健骨、疏通经络等作用，在疲劳情况下，能够提高一些血液指标的活性，同时对消除运动性疲劳，恢复体力和提高运动成绩都具有良好的效果。从实验数据CK值可以初步看出，该复方中药可以影响其值的变化较为明显。而又有研究发现，高强度肌肉负荷后，肌肉酸痛与血清CK水平存在高度相关，因此，该复方仍可以用于运动损伤的防治方面，预计其效果也可能会很突出。 【 参考文献 】 1李世成，张爱萍，傅建强.参归补血精对少年游泳运动员运动能力影响的初步研究J. 体育 学刊，1997，1：22.2韩雨梅,邸慧君.动物实验在抗疲劳中药研究中的现状J.首都体育学院学报,2003,15(1):93.3王银萍大豆皂苷和人参茎叶皂苷对糖尿病大鼠血SOD和LPO的影响J.白求恩医科大学学报，1993(19)：122.4于飞，刘照涌，吴中量S863天然果蔬饮料对力竭运动小鼠肝脏自由基代谢及超微结构的影响J.湖北体育科技，2002，21：408.5赵光.蜂王浆对大鼠力竭运动能力的影响J.体育学刊，2003，10：33.6冯连世，冯美云，冯炜权.优秀运动员身体机能评定方法M.北京：人民体育出版社,2003:75.7张 强，杨 明.群刚生命源对速滑运动员身体机能影响的研究J.冰雪运动，2002，4:48.8王颜刚,许 凤,陈新焰,等.复方中药生芪降糖颗粒对糖尿病大鼠血清生化指标影响的量效关系J. 中国 康复,2006,10(35):75.9冯连世，冯美云，冯炜权.优秀运动员身体机能评定方法M.北京：人民体育出版社,2003:71