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延胡索酸泰妙菌素掩味微囊的制备及其性质的研究【摘要】 目的 利用喷雾干燥法制备延胡索酸泰妙菌素掩味微囊，并对微囊的性质进行研究，为工业化生产提供最优的处方条件。方法 以包封率为考察指标，通过正交设计筛选出最优处方，并且对微囊的掩味效果、吸湿性、流动性等性质做了研究。本研究还以包封率、吸湿性、流动性等因素为指标，比较了喷雾干燥掩味法与传统溶剂法的掩味效果。结果 明胶与原料药质量比21时微囊的掩味效果最佳，并在乳液中加入2% 环糊精和1%蓖麻油改善其流动性。通过正交实验考察在特定的喷雾干燥设备条件下的最佳掩味工艺为进风温度170、雾化压力、进料速度600ml/h，并测得最佳处方的临界相对湿度为55%60%。结论 利用以上实验方法可以掩盖延胡索酸泰妙菌素的难闻性气味，提高动物服药顺应性，给服用带来便利。【关键词】 喷雾干燥； 掩味； 泰妙菌素 ABSTRACT Objective To prepare tiamulinfumarate masking microcapsule by spray drying, and study the characterization of microcapsule, and supply optima formula for industrialization. Methods The optimal formulation was selected by orthogonal design with entrapment efficiency as indicatrix. The hydroscopicity and flowability of the microcapsule were investigated carefully. The masking effect was investigated by comparing the spray drying to solvent method for the entrapment efficiency, hydroscopicity and flowability as indicatrix. Results The smell can be masked when the gelatin compared with drug was 21. The fluidity was improved by adding 2% of CD and 1% of castor oil. The optimal process is as follows: inlet airflow 170; atomization pressure ; feed material speed 600ml/h. The critical relative humidity of the best formulation is 55%60%. Conclusion The method can mask the smell of tiamulinfumarate, raise the complaiance of animal for taking medicine and provide convenience for disease. KEY WORDS Spray drying; Masking smell; Tiamulin 泰妙菌素(tiamulin，thiamutin，dynamutilin)结构式见，又称硫姆林、泰妙霉素、泰妙灵、枝原净、泰牧霉素，实际使用多为泰妙菌素延胡索酸盐。泰妙菌素为动物专用抗生素，其抗菌作用为抑制感受性细菌蛋白质的合成，作用于细菌体内的核糖体，主要表现为抑菌作用，在高浓度下才有杀菌作用。泰妙菌素对多种革兰阳性菌及支原体(Mycoplasma)有特效，特别是对金葡菌、链球菌、多种霉及某些螺旋体具有较强的作用1。泰妙菌素可有效预防和治疗猪的地方流行性肺炎(气喘病)、支原体关节炎、防线杆菌胸膜炎、猪痢疾、回肠炎、结肠炎、水肿病等疾病24。延胡索酸泰妙菌素有难闻性气味，影响动物服药顺应性，给疾病防治带来很大不便。 掩盖药品不良气味的技术包括添加矫味剂和麻痹剂、包衣、结合吸附和包合、改变药物结构等5，6。本研究通过喷雾干燥技术将延胡索酸泰妙菌素包合成微 Constitutional formula of tiamulin囊，以达到掩味，改变流动性的目的，并且将此法与传统溶剂矫味法7比较，测试其优越性。当喷雾干燥后的粉体粒径达到微米级别后，更容易与食物混合而不影响动物的口感，而且微囊制剂可以使药物在动物体内缓慢释放，达到持续抗菌的目的。 1 仪器与试药 仪器 喷雾干燥(WPG220济南奥诺能源科技有限公司)，电子天平(ALC北京赛多利斯仪器系统有限公司)，电热恒温鼓风干燥箱(DHG9070A上海精宏实验设备有限公司)，旋转蒸发器(ZFQ85A上海)。 试药 延胡索酸泰妙菌素(河北威远动物药业有限公司)，明胶、环糊精(天津市博迪化工有限公司)。 2 方法与结果 含量测定 空白微囊溶液的制备 精密量取喷雾干燥法制备的不载药微粉20mg，加入20ml水并加热，使辅料充分溶解进而破坏微囊，并用流动相容至100ml容量瓶中备用。 载药微囊溶液的制备 精密量取载药微粉20mg，加入20ml水并加热，使辅料充分溶解，药物溶出，并用流动相定容至100ml容量瓶中备用。 (1)色谱条件 色谱柱为DiamonsilTM C18色谱柱(200mm，5m，Dikma公司)；流动相为碳酸铵缓冲液(取碳酸铵10g，加水800ml溶解，加6%的高氯酸水溶液24ml，用水稀释至1000ml)乙腈甲醇(282349)；柱温30；流速/min；紫外检测波长212nm；进样量20l。取空白溶液和样品溶液，在上述色谱条件下进样。杂质峰与主成分峰分离良好，辅料和试剂对药物测定无干扰，延胡索酸泰妙菌素的保留时间约为。 (2)标准曲线的绘制 精密称取延胡索酸泰妙菌素对照品5mg，用甲醇溶解配制成浓度为1mg/ml的对照品贮备液溶液。分别量取延胡索酸泰妙菌素对照品贮备液、和至5个10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，m滤膜过滤，量取20l，注入色谱仪，记录色谱峰面积，在(1080)g/ml范围内浓度(C)与峰面积(A)呈良好线性关系 A=431410C-21221 R2= (3)准确度实验(加样回收率%) 精密称取空白微囊溶液5ml，加入延胡索酸泰妙菌素对照品适量，用甲醇定容至高、中、低三种浓度，延胡索酸泰妙菌素含量分别为、和，进样20l，计算回收率，结果见。 乳剂的制备及乳化剂用量的确定 精密秤取处方量延胡索酸泰妙菌素溶于定量乙醇中，以此作为有机相，将乳化剂Tween80及处方量囊材溶解于水中，在(655)下磁力搅拌形成水相，再将有机相溶液逐滴加入水相中，继续搅拌得到乳化液。 本研究选择Tween80作为水包油型乳化剂，其用量以成乳现象、喷雾干燥结果、包封率为指标做单因素考察。按照水相的2%、3%、5%、7%、9%(W/V)加入Tween80，结果发现当乳化剂用量为2%、3%时成乳现象不好，包封率较低；5%时水溶液pH68，HLB值为15，符和形成水包油型乳浊液条件(HLB值在816的乳化剂适于制备O/W型乳浊液)。当乳化剂用量大于5%时，喷雾干燥后有残留Tween80没有干燥完全，粉末成糊状，造成干燥器粘壁，难以收集到成品。所以本实验最终选择Tween80(5%)为乳化剂用量。 微囊包封率的测定 精密量取微粉，用50ml无水乙醇洗涤4次，使表面延胡索酸泰妙菌素溶解，然后真空抽滤，收集滤液并定容于250ml容量瓶中，用上述HPLC方法测定未被装载的药物。药物总含量测定同。 微囊包封率=(总药量-未被装载的药量)总药量100% 微囊的制备 (1)辅料的选择 考虑到药品的生产成本，本研究以价格便宜的明胶作为主要辅料，适当添加环糊精、蓖麻油增加其流动性。辅料的用量以喷雾干燥后微囊性质(吸湿性、含水量、流动性等)、掩味效果、生产成本为指标做单因素考察。按照辅料与原料药质量比12、11、21、31、41投料，结果处方用量在21时综合指标最优，并在乳液中加入2%环糊精和1%蓖麻油。 (2)掩味指标 通过测定掩味后的延胡索酸泰妙菌素微囊的气味评价掩味效果的优劣。分别取掩味后粉末适量，以10名健康志愿者的嗅觉敏感度(无气味、无刺激性、低刺激性、强刺激性气味)为指标评价延胡索酸泰妙菌素微囊的掩味效果。结果，志愿者对微囊的气味评价均为无明显气味及无刺激性气味，与延胡索酸泰妙菌素原料药的强刺激性气味形成鲜明对比。本研究将志愿者的反应及微粉性质相结合，发现包封率越高，掩味效果越好，所以进一步实验均以包封率为指标来代替掩味效果。微囊的包封率不仅取决于辅料用量，而且与喷雾干燥条件(如进风温度、雾化压力、进料速度)密切相关。根据以上结果，本实验以进风温度、雾化压力、进料速度为考察因素，以包封率(%)为指标，选取正交表L9(34)作正交分析，通过正交实验直观分析得出最佳工艺为：进风温度170、雾化压力、进料速度600ml/h。由方差分析知，这3个因素的影响程度依次为进风温度进料速度雾化压力。其中进风温度对喷雾干燥工艺有显着性影响，应作为工艺的关键因素。微粉的粉体学性质 (1)含水量 根据正交实验确定最佳干燥工艺为A2B2C3，利用烘干法8测定此工艺干燥后干粉的含水量为%。 (2)流动性 将漏斗固定在铁架台上，粉体自漏斗上自由落下，在半径为r的圆盘上形成堆集体，直到粉体堆积层斜边物料沿圆盘边缘自动流出为止，粉体停止注入，测定堆集体的高度为h，休止角计算公式为： tg=hr 利用此方法测得最佳工艺粉体休止角为。 (3)最佳处方的临界相对湿度 将8个已恒重的扁型称量瓶底部分别放入等量的微粉，然后分别置于所列的8种不同盐的过饱和溶液的干燥器中，于25保存24h，测定吸湿百分率，结果以吸湿量为纵坐标，相对湿度为横坐标作图，分别在曲线两端做切线，两切线交点的横坐标即为临界相对湿度(CRH)，得，最佳处方的临界相对湿度为55%60%。 (4)与传统矫味法比较 传统溶剂法是按质量比(12)分别称取延胡索酸泰妙菌素和明胶，分别溶于少量无水乙醇中，溶解明胶需要加热，缓慢将延胡索酸泰妙菌素溶液加入明胶溶液中，搅拌均匀，挥干乙醇，得共沉淀物，粉碎后过(250)mm目筛9。一般还要加入矫味剂，但为了与喷雾干燥实验对比，所以本研究中并未加入矫味剂。 同前述，由自愿者评定，结果传统溶剂法制备的掩味剂仍有低刺激性气味，与喷雾干燥制备的微粉形成鲜明对比，说明本研究工艺可靠，在掩味效果上有更大的优越性。 3 讨论 (1)乳剂的制备是喷雾干燥制备微囊的关键技术之一，在实验中发现除了乳化剂用量、油水体积比会对乳剂的形成产生影响外，乳化温度同样起着至关重要的作用。乳化温度会影响乳化剂的乳化能力，温度过高会破坏乳化效果，本研究通过单因素试验对乳化温度做了深入研究，结果在(655)时乳化效果最好。 (2)进风温度对喷雾干燥工艺有显着性影响，应作为工艺的关键因素。出风温度不宜过高，6080为宜，虽然此药熔点较高为143149，但出风温度高会造成更严重的粘壁现象；出风温度也不宜过低，否则会造成物料干燥不完全。但出风温度很难控制，希望研制出更好的冷却装置彻底解决喷雾干燥粘壁问题。 (3)在喷雾干燥后微粉中添加少量滑石粉可增加其流动性，加入1%2%即可。粉体的含水量大，其附着性 和凝聚性都显着增加，使流动性降低，过干的粉体容易引起飞扬，而且在喷雾干燥后还容易被引风带入空气中，造成物料损失，本实验所得粉体含水量适当，并没有上述问题出现。 (4)本实验掩味微囊是由气流式喷雾干燥器完成的，有一定局限性，但通过反复试验，发现此制备工艺非常稳定，完全可以适应工业化大生产。由喷雾干燥制备掩味微囊，制备工艺简单，成本低廉，节省了传统凝聚法制备微囊的时间，使操作更加方便。 【参考文献】 1 郭万正. 泰妙菌素及其在养猪生产中的应用J. 湖北动物和兽医科学杂志，2006，(1)：3132. 2 马境，汪金辉，吴悦. 泰妙菌素在兽医临床上的应用J. 养殖技术顾问，2007，(7)：92 .3 曹继军，李秀波，张秋楠，等. 延胡索酸泰妙菌素预混剂对猪胸膜肺炎的疗效试验J. 中国兽医杂志，2007，43(6)：5455.4 陈凤梅，牛钟相，程光民，等. 延胡索酸泰妙菌素对支原体和大肠杆菌混合感染的治疗试验J. 中国兽医杂志，2005，39(1)：4952.5 Harmik S, Yasmin S, Roop K. 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