1、1/chapter第三篇 细菌学各论第二篇 细菌学各论 动物(dngw)医学学院 冯新 了解各种了解各种(zhn)细菌的形态、培养特性、致细菌的形态、培养特性、致病因子及微生物学诊断。病因子及微生物学诊断。第一页,共七十五页。2/chapter第三篇 细菌学各论u 第七章第七章 革兰氏阳性革兰氏阳性(yngxng)(yngxng)球菌球菌第一节第一节第一节第一节 葡萄球菌葡萄球菌葡萄球菌葡萄球菌(p to qi jn)(p to qi jn)(p to qi jn)(p to qi jn)属属属属第二节第二节第二节第二节 链球菌属链球菌属链球菌属链球菌属第三节第三节第三节第三节 肠球菌属肠球菌
2、属肠球菌属肠球菌属淋球菌淋球菌(qijn)、脑膜炎球菌、脑膜炎球菌(qijn)阳性阳性阴性阴性第二页,共七十五页。3/chapter第三篇 细菌学各论u 第一节第一节 葡萄球菌葡萄球菌(p to qi jn)(p to qi jn)属属(StaphylococcusStaphylococcus)n 广泛存在于自然界,多数是不致病的腐物广泛存在于自然界,多数是不致病的腐物寄生菌。寄生菌。n 致病性葡萄球菌可引起化脓性炎症致病性葡萄球菌可引起化脓性炎症(ynzhng)、败、败血症、食物中毒等。血症、食物中毒等。第三页,共七十五页。4/chapter第三篇 细菌学各论u 第一节第一节 葡萄球菌葡萄球
3、菌(p to qi jn)(p to qi jn)属属(StaphylococcusStaphylococcus)球形,排列成葡萄球形,排列成葡萄(p to)串状。串状。用青霉素可诱导成用青霉素可诱导成L型。型。无芽孢,无鞭毛,有的形成荚膜或黏液层。无芽孢,无鞭毛,有的形成荚膜或黏液层。革兰氏阳性。革兰氏阳性。需氧或兼性厌氧,无运动力。需氧或兼性厌氧,无运动力。一般一般(ybn)(ybn)特征特征第四页,共七十五页。5/chapter第三篇 细菌学各论 Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus金葡菌显微照片金葡菌显微照片金葡菌扫描电镜照片金葡菌透射
4、电镜照片第五页,共七十五页。6/chapter第三篇 细菌学各论 过去按产生的色素过去按产生的色素(s s)(s s)分为分为3 3种:金黄色种:金黄色葡萄球菌葡萄球菌、白、白色色葡萄球菌葡萄球菌、柠檬色、柠檬色葡萄球菌葡萄球菌。19741974年分为年分为3 3种种 :金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、:金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。腐生葡萄球菌。伯吉氏系统细菌学手册伯吉氏系统细菌学手册19861986年将葡萄球菌属分为年将葡萄球菌属分为2020多种多种 。二、分类二、分类(fn(fn li)li)常见常见(chn jin)的致病菌多为金黄色葡萄球菌。的致病菌多为金黄色葡萄球菌。第
5、六页,共七十五页。7/chapter第三篇 细菌学各论第七页,共七十五页。8/chapter第三篇 细菌学各论金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(p to qi jn)(p to qi jn)(Staphylococcus Staphylococcus aureusaureus)1.培养及生化特性培养及生化特性 在普通琼脂平板形成湿润、光滑、隆起的圆形菌落。菌落颜在普通琼脂平板形成湿润、光滑、隆起的圆形菌落。菌落颜色依菌株而异,初呈灰白色,继而为金黄色。色依菌株而异,初呈灰白色,继而为金黄色。在血液琼脂平板形成的菌落较大,产溶血素的菌株多为病在血液琼脂平板形成的菌落较大,产溶血素的菌株多为病原菌,在
6、菌落周围呈现明显的原菌,在菌落周围呈现明显的溶血。溶血。产生产生(chnshng)金黄色色素。金黄色色素。高度耐盐。高度耐盐。分解葡、乳、麦、蔗糖,分解葡、乳、麦、蔗糖,产酸不产气,致病菌株能分解甘产酸不产气,致病菌株能分解甘露醇。露醇。第八页,共七十五页。9/chapter第三篇 细菌学各论u 第一节第一节 葡萄球菌葡萄球菌(p to qi jn)(p to qi jn)属属(StaphylococcusStaphylococcus)金黄色葡萄球菌普通金黄色葡萄球菌普通培养基上菌落培养基上菌落(jnlu)形态形态金黄色葡萄金黄色葡萄(p to)球的球的溶血溶血高盐培养基高盐培养基 第九页,共
7、七十五页。10/chapter第三篇 细菌学各论2.抗原及变异抗原及变异 葡萄球菌葡萄球菌(p to qi jn)细胞壁上的抗原构造比较复细胞壁上的抗原构造比较复杂,含有多糖及蛋白质两类抗原。杂,含有多糖及蛋白质两类抗原。多糖抗原多糖抗原 荚膜多糖,具有型特异性。荚膜多糖,具有型特异性。蛋白抗原蛋白抗原 人源菌株都含有人源菌株都含有葡萄球菌蛋白葡萄球菌蛋白A(SPA),来自动物,来自动物源菌株则少见。源菌株则少见。SPA能与多种动物的免疫球蛋白的能与多种动物的免疫球蛋白的Fc端结合,结合后的端结合,结合后的IgG仍能与仍能与相应抗原特异性反应。相应抗原特异性反应。SPA与与IgG结合形成的复合
8、物在机体内具有生物学作用(趋化性、结合形成的复合物在机体内具有生物学作用(趋化性、抵抗吞噬、损伤血小板等)。抵抗吞噬、损伤血小板等)。用于免疫学及诊断技术(协同凝集试验)。用于免疫学及诊断技术(协同凝集试验)。第十页,共七十五页。11/chapter第三篇 细菌学各论3.抵抗力及药物抵抗力及药物(yow)敏感性敏感性 在无芽孢菌中,葡萄球菌的抵在无芽孢菌中,葡萄球菌的抵抗力较强。抗力较强。在干燥的脓汁或血液中可存活在干燥的脓汁或血液中可存活2-3个月,个月,80 30min 才能杀死。才能杀死。对磺胺类、青霉素、金霉素、红对磺胺类、青霉素、金霉素、红霉素、新霉素等抗生素敏感,但易产霉素、新霉素
9、等抗生素敏感,但易产生耐药性。生耐药性。第十一页,共七十五页。12/chapter第三篇 细菌学各论4.致病性及毒力因子致病性及毒力因子 金色葡萄球菌可产生金色葡萄球菌可产生(chnshng)多种毒素和酶,故致病性强。多种毒素和酶,故致病性强。化脓性疾病(创伤感染、脓肿、乳腺炎、败血症、脓毒化脓性疾病(创伤感染、脓肿、乳腺炎、败血症、脓毒败血症等)败血症等)毒素性疾病(被葡萄球菌污染的食物或饲料可引起人或动物毒素性疾病(被葡萄球菌污染的食物或饲料可引起人或动物的食物中毒性疾病)的食物中毒性疾病)。第十二页,共七十五页。13/chapter第三篇 细菌学各论毒力因子毒力因子:毒素毒素 溶血素,与
10、牛羊的坏疽性乳腺炎有关,它溶血素,与牛羊的坏疽性乳腺炎有关,它还导致白细胞等崩解。还导致白细胞等崩解。毒素是不耐热的蛋白质,对多毒素是不耐热的蛋白质,对多种哺乳动物红细胞有溶血作用,而从动物分离的菌株常种哺乳动物红细胞有溶血作用,而从动物分离的菌株常见见溶血素。溶血素。肠毒素肠毒素 引致人类食物中毒,引致人类食物中毒,表现呕吐、腹泻表现呕吐、腹泻(fxi)。耐热抗酸,。耐热抗酸,能经受能经受10030min或或胃蛋白酶的水解。胃蛋白酶的水解。第十三页,共七十五页。14/chapter第三篇 细菌学各论凝固酶凝固酶 能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝集的酶类物质。能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝集
11、的酶类物质。(1)游离凝固酶)游离凝固酶:使液态纤维蛋白原变成固态纤维蛋白。使液态纤维蛋白原变成固态纤维蛋白。(2)结合凝固酶)结合凝固酶:使纤维蛋白原与菌体交联而致细菌凝聚。使纤维蛋白原与菌体交联而致细菌凝聚。作用:有助于致病菌株抵抗作用:有助于致病菌株抵抗(dkng)吞噬细胞和杀菌物质。吞噬细胞和杀菌物质。检测葡萄球菌的凝固酶是鉴别菌株的重要指标,致病株多数为凝固酶检测葡萄球菌的凝固酶是鉴别菌株的重要指标,致病株多数为凝固酶阳性。阳性。第十四页,共七十五页。15/chapter第三篇 细菌学各论耐热核酸酶耐热核酸酶 100作用作用15min不失去活性,不失去活性,由致病株产生。由致病株产生
12、。此酶能迅速分解核酸,利于此酶能迅速分解核酸,利于病菌病菌(bngjn)扩散。扩散。目前将该酶的检测作为鉴定致目前将该酶的检测作为鉴定致病菌株的重要指标值之一。病菌株的重要指标值之一。此外,还可产生溶纤维蛋白酶、此外,还可产生溶纤维蛋白酶、透明质酸酶,又称为扩散因子。透明质酸酶,又称为扩散因子。金黄色葡萄金黄色葡萄(p to)球的耐热核酸酶球的耐热核酸酶试验试验第十五页,共七十五页。16/chapter第三篇 细菌学各论5.微生物学诊断微生物学诊断(1)涂片染色镜检)涂片染色镜检 取脓汁、渗出液、乳汁、血液,取脓汁、渗出液、乳汁、血液,中毒症取剩余食物中毒症取剩余食物(shw)等。将病料涂片染
13、色镜检。等。将病料涂片染色镜检。(2)分离培养鉴定)分离培养鉴定 将病料划线接种于将病料划线接种于5绵羊或兔血绵羊或兔血液琼脂平板,液琼脂平板,37 培养培养18-24h,菌落金黄色,周围呈溶,菌落金黄色,周围呈溶血圈者多为致病菌株。进一步鉴定还要做凝固酶试验、血圈者多为致病菌株。进一步鉴定还要做凝固酶试验、分解甘露醇试验,阳性者多为致病菌。必要时可做动物分解甘露醇试验,阳性者多为致病菌。必要时可做动物试验。试验。第十六页,共七十五页。17/chapter第三篇 细菌学各论第十七页,共七十五页。18/chapter第三篇 细菌学各论u 第二节第二节 链球菌属链球菌属 (Streptococcu
14、s)链球菌种类多、分布广。有些可致人或动物的各种化脓链球菌种类多、分布广。有些可致人或动物的各种化脓性疾病、肺炎、乳腺炎、败血症等。性疾病、肺炎、乳腺炎、败血症等。一、分类一、分类 按溶血性分为按溶血性分为、3类。类。型溶血型溶血(rn xu)链球菌链球菌 在菌落周围形成不透明的草绿色溶血在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环,红细胞未完全溶解,血红蛋白变成绿色。此菌致病力不环,红细胞未完全溶解,血红蛋白变成绿色。此菌致病力不强,多为机会致病菌。强,多为机会致病菌。型溶血链球菌型溶血链球菌 菌落周围形成完全透明的溶血环,红细胞完全菌落周围形成完全透明的溶血环,红细胞完全溶解。这类菌致病力强,常引起
15、人及动物各种疾病。溶解。这类菌致病力强,常引起人及动物各种疾病。型溶血链球菌型溶血链球菌 菌落周围无溶血现象。一般为非致病菌。菌落周围无溶血现象。一般为非致病菌。第十八页,共七十五页。19/chapter第三篇 细菌学各论第十九页,共七十五页。20/chapter第三篇 细菌学各论二、形态与染色二、形态与染色 链球菌呈圆形或卵圆形,常排列链球菌呈圆形或卵圆形,常排列(pili)成链状或成双。肉成链状或成双。肉汤内生长的链球菌常呈长链排列汤内生长的链球菌常呈长链排列(pili),革兰氏阳性,多有荚,革兰氏阳性,多有荚膜。膜。第二十页,共七十五页。21/chapter第三篇 细菌学各论三、培养及生
16、化特性三、培养及生化特性 多为兼性厌氧菌。多为兼性厌氧菌。致病菌营养要求较高,普通培养致病菌营养要求较高,普通培养基中生长不良,需添加血液、血清、基中生长不良,需添加血液、血清、葡萄糖等。葡萄糖等。在血液琼脂平板上长成直径在血液琼脂平板上长成直径0.1-1.0mm,灰白色,表面光滑,边缘,灰白色,表面光滑,边缘(binyun)整齐的小菌落。整齐的小菌落。多数致病菌株有溶血性。多数致病菌株有溶血性。化脓性链球菌普通培养化脓性链球菌普通培养基上菌落基上菌落(jnlu)形态形态第二十一页,共七十五页。22/chapter第三篇 细菌学各论四、致病性四、致病性 致病性链球菌可产生多种毒素或酶,可致人及
17、致病性链球菌可产生多种毒素或酶,可致人及多种动物的很多疾病,化脓感染、肺炎、乳房炎等。多种动物的很多疾病,化脓感染、肺炎、乳房炎等。溶血素溶血素 分为对氧敏感溶血素分为对氧敏感溶血素O(SLO)和对氧稳定溶血素和对氧稳定溶血素S(SLS)两种,两种,称溶血性。称溶血性。致热外毒素致热外毒素 旧名红疹毒素,主要由旧名红疹毒素,主要由A群链球菌产生,致人猩红热,群链球菌产生,致人猩红热,小剂量皮内注射家兔可引起局部红疹,大剂量注射可致全身红疹。小剂量皮内注射家兔可引起局部红疹,大剂量注射可致全身红疹。其他其他 不同致病菌株,可产生链激酶(溶纤维蛋白酶),透明质酸不同致病菌株,可产生链激酶(溶纤维蛋
18、白酶),透明质酸酶等,其性质作用类葡萄球菌酶等,其性质作用类葡萄球菌。细胞壁脂磷壁酸细胞壁脂磷壁酸(LFA)与菌体吸附与菌体吸附(xf)于宿主黏膜有关。其荚于宿主黏膜有关。其荚膜成分、膜成分、M蛋白等具有抗吞噬作用。蛋白等具有抗吞噬作用。第二十二页,共七十五页。23/chapter第三篇 细菌学各论五、抵抗力五、抵抗力 本属细菌的抵抗力不强。对青霉素、磺胺类药物本属细菌的抵抗力不强。对青霉素、磺胺类药物敏感,易产生耐药性。敏感,易产生耐药性。六、免疫性六、免疫性 链球菌的抗原结构比较复杂,机体感染后有多种抗链球菌的抗原结构比较复杂,机体感染后有多种抗体产生,已知抗体产生,已知抗M蛋白的抗体具有
19、保护作用蛋白的抗体具有保护作用(zuyng),M蛋蛋白有多种抗原型,各型间缺乏有效的交叉保护。我国研制的白有多种抗原型,各型间缺乏有效的交叉保护。我国研制的猪、羊链球菌疫苗有较好的免疫效果。猪、羊链球菌疫苗有较好的免疫效果。第二十三页,共七十五页。24/chapter第三篇 细菌学各论七、微生物学诊断七、微生物学诊断 病料(脓汁、乳汁、血液、组织)涂片染色镜检,见革病料(脓汁、乳汁、血液、组织)涂片染色镜检,见革兰氏阳性、具荚膜、成对兰氏阳性、具荚膜、成对(chn du)或链状排列的球菌,可作初或链状排列的球菌,可作初步诊断。步诊断。确诊需用血液琼脂平板分离培养,观察菌落、溶血等特征,确诊需用
20、血液琼脂平板分离培养,观察菌落、溶血等特征,并进行生理生化试验。用群、型特异性血清作血清学试验,对并进行生理生化试验。用群、型特异性血清作血清学试验,对病原菌定群或定型。病原菌定群或定型。第二十四页,共七十五页。25/chapter第三篇 细菌学各论 兰氏(兰氏(Lancefield)用温热的稀盐酸浸出)用温热的稀盐酸浸出C抗原抗原(kngyun),与特异性,与特异性血清作沉淀反应,将链球菌分为血清作沉淀反应,将链球菌分为20个血清群(个血清群(A-V,缺,缺I和和J)。同群链)。同群链球菌间,因表面蛋白质抗原不同,又分不同型。球菌间,因表面蛋白质抗原不同,又分不同型。兰氏分群法兰氏分群法乳胶
21、乳胶(rjio)凝集凝集试验试验第二十五页,共七十五页。26/chapter第三篇 细菌学各论n无乳链球菌无乳链球菌(S.agalactiae)n停乳链球菌停乳链球菌(S.dysgalactiae)n乳房链球菌乳房链球菌 (S.uberis)n马链球菌兽疫亚种马链球菌兽疫亚种(S.equi subsp.zooepidemicus)n马链球菌马亚种马链球菌马亚种(S.equi subsp.equi)n猪链球菌猪链球菌(S.suis)n化脓链球菌化脓链球菌(S.pyogenes)n肺炎链球菌肺炎链球菌(S.pneumoniae)乳腺炎乳腺炎多种动物炎症多种动物炎症及败血症及败血症马腺疫马腺疫人和猪
22、炎症及败血症人和猪炎症及败血症幼畜炎症及败血症幼畜炎症及败血症牛乳腺炎牛乳腺炎八、主要八、主要(zhyo)致病菌致病菌第二十六页,共七十五页。27/chapter第三篇 细菌学各论第二十七页,共七十五页。28/chapter第三篇 细菌学各论猪链球菌猪链球菌是猪链球菌病的重要致病菌,并可感是猪链球菌病的重要致病菌,并可感染人而致死。染人而致死。(一一)病原病原1.链球菌共有链球菌共有20个群个群(从从A-V),数百个血,数百个血清型,主要感染人类清型,主要感染人类(rnli)的是的是A.B群和群和肺炎链球菌;主要感染猪的有肺炎链球菌;主要感染猪的有D.L.R.S.T.U.V群群2.猪溶血性链球
23、菌猪溶血性链球菌2型型(Swine streptoo_cosis)3.链球菌为链球菌为G+球菌成对、短链状排列球菌成对、短链状排列第二十八页,共七十五页。29/chapter第三篇 细菌学各论(二二)传播途径传播途径1.1.主要经过破损皮肤传播主要经过破损皮肤传播:屠宰、加工、饲养、贩运感染屠宰、加工、饲养、贩运感染(gnrn)(gnrn)/病病/死猪过程中死猪过程中,通过破损皮肤接触通过破损皮肤接触,感染猪感染猪2 2型链球型链球菌。菌。2.2.消化道辅助消化道辅助:食入没有煮烂熟透的病死猪肉感染。食入没有煮烂熟透的病死猪肉感染。(三三)临床表现临床表现1.1.普通型表现普通型表现:急起高热
24、、畏寒、头痛、头昏、腹痛、急起高热、畏寒、头痛、头昏、腹痛、腹泻、乏力、不适。腹泻、乏力、不适。2.2.可致猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、多发性浆膜炎、可致猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、多发性浆膜炎、流产流产(li chn)(li chn)和局部脓肿。和局部脓肿。第二十九页,共七十五页。30/chapter第三篇 细菌学各论u 第八章第八章 肠杆菌肠杆菌(gnjn)(gnjn)科科第一节第一节第一节第一节 埃希菌属埃希菌属埃希菌属埃希菌属第二节第二节第二节第二节 沙门沙门沙门沙门(shmn)(shmn)菌属菌属菌属菌属第三节第三节第三节第三节 耶尔森菌属耶尔森菌属耶尔森菌属耶尔森菌属第四节第四节第
25、四节第四节 其他肠道杆菌属其他肠道杆菌属其他肠道杆菌属其他肠道杆菌属 (克雷伯菌属、变形杆菌属、爱德华菌属克雷伯菌属、变形杆菌属、爱德华菌属克雷伯菌属、变形杆菌属、爱德华菌属克雷伯菌属、变形杆菌属、爱德华菌属)第三十页,共七十五页。31/chapter第三篇 细菌学各论本科共同特性为:革兰氏阴性、无芽孢的本科共同特性为:革兰氏阴性、无芽孢的兼性厌氧菌。共兼性厌氧菌。共2828属、属、110110种。多为正常肠道种。多为正常肠道菌群成员。沙门氏菌属、埃希菌属和耶尔森菌菌群成员。沙门氏菌属、埃希菌属和耶尔森菌属的部分成员对人和动物有广泛的致病性,在属的部分成员对人和动物有广泛的致病性,在公共卫生和
26、兽医公共卫生和兽医(shuy)(shuy)临床有重要意义。临床有重要意义。第三十一页,共七十五页。32/chapter第三篇 细菌学各论u 第一节第一节 埃希菌属埃希菌属 (Escherichia)(Escherichia)本属现有本属现有8个种,其中最重要的种是大肠埃希个种,其中最重要的种是大肠埃希菌菌(E.coli),俗称大肠杆菌,下分血清型。本菌系人,俗称大肠杆菌,下分血清型。本菌系人和温血动物肠道内正常菌群成员之一。大肠杆菌常被和温血动物肠道内正常菌群成员之一。大肠杆菌常被用作粪便直接或间接污染的检测指标。本菌还是分子用作粪便直接或间接污染的检测指标。本菌还是分子生物学和基因工程生物学
27、和基因工程(jyn gngchng)中重要的实验材料和中重要的实验材料和研究对象。研究对象。第三十二页,共七十五页。33/chapter第三篇 细菌学各论一、形态染色特性一、形态染色特性 大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的杆菌,两端钝圆、散在,大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的杆菌,两端钝圆、散在,周生鞭毛周生鞭毛(binmo)可运动,多有菌毛。可运动,多有菌毛。第三十三页,共七十五页。34/chapter第三篇 细菌学各论E.coli 伊红美蓝琼脂伊红美蓝琼脂(qingzh)上呈金属绿上呈金属绿色色E.coli 麦康基琼脂麦康基琼脂(qingzh)上呈粉红色菌上呈粉红色菌落落二、培养及生化特性二、培养及
28、生化特性 本菌为兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好,形成圆形凸起、光本菌为兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好,形成圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落;滑、湿润、半透明、灰白色菌落;本菌大多可以发酵乳糖产酸产气,麦康凯琼脂上形成红色菌落;在伊本菌大多可以发酵乳糖产酸产气,麦康凯琼脂上形成红色菌落;在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属闪光红美蓝琼脂上产生黑色带金属闪光(shn gung)的菌落;一些致病性菌株的菌落;一些致病性菌株在绵羊血平板上呈在绵羊血平板上呈溶血。溶血。第三十四页,共七十五页。35/chapter第三篇 细菌学各论二、培养二、培养(piyng)及生化特性及生化特性致病菌株在绵羊
29、血平板上呈致病菌株在绵羊血平板上呈型溶血;型溶血;生化特性:糖发酵试验(发酵乳糖)和生化特性:糖发酵试验(发酵乳糖)和IMViC(+-)试验。)试验。H2S阴性。阴性。三糖铁培养基三糖铁培养基I(吲哚吲哚(yn du)、M(MR)、)、Vi(VP)、C(枸橼酸盐利用试验)(枸橼酸盐利用试验)第三十五页,共七十五页。36/chapter第三篇 细菌学各论抗原类型抗原类型 数量数量 性质性质 O抗原 173种 特异性决定于LPS的特异多糖侧链的结构,是一种耐热菌体抗原。K抗原 80种 多存在于荚膜或被膜中,个别位于菌毛中。K88、K99是两种蛋白质K抗原外,其余均为多糖K抗原。是一种热不稳定抗原。
30、H抗原 56种 是一类不耐热的鞭毛蛋白抗原。刺激机体产生高效价凝集抗体。血清型表示法:O8:K23(L):H19 三、抗原三、抗原(kngyun)及血清型及血清型第三十六页,共七十五页。37/chapter第三篇 细菌学各论四、致病性四、致病性 条件性大肠杆菌、病原性大肠杆菌。条件性大肠杆菌、病原性大肠杆菌。与动物疾病有关的病原性大肠杆菌可分为五类:与动物疾病有关的病原性大肠杆菌可分为五类:产肠毒素大肠杆菌产肠毒素大肠杆菌(ETEC)肠出血性大肠杆菌肠出血性大肠杆菌(EHEC)肠致病性大肠杆菌肠致病性大肠杆菌(EPEC)肠侵袭肠侵袭(qnx)性大肠杆菌性大肠杆菌(EIEC)肠聚集型大肠杆菌肠聚
31、集型大肠杆菌(EAEC)第三十七页,共七十五页。38/chapter第三篇 细菌学各论五、微生物学诊断五、微生物学诊断 分离与鉴定程序可参见图分离与鉴定程序可参见图8-1。(PAGE 106)1.采病料分离培养采病料分离培养 败血症病例采集内脏败血症病例采集内脏(nizng)组织(肝组织(肝脾肾等),对幼畜腹泻及猪水肿病病例应取其各段小肠脾肾等),对幼畜腹泻及猪水肿病病例应取其各段小肠内容物或黏膜刮取物以及相应肠段的肠系膜淋巴结,分内容物或黏膜刮取物以及相应肠段的肠系膜淋巴结,分别在麦康凯平板和血平板上划线分离培养。别在麦康凯平板和血平板上划线分离培养。2.可疑菌落生化鉴定可疑菌落生化鉴定 挑
32、取麦康凯平板上的红色菌落或血挑取麦康凯平板上的红色菌落或血平板上呈平板上呈溶血溶血(仔猪黄痢与水肿病菌株仔猪黄痢与水肿病菌株)的典型菌落几个,的典型菌落几个,分别转种三糖铁(分别转种三糖铁(TSI)培养基和普通琼脂斜面做初步生)培养基和普通琼脂斜面做初步生化鉴定和纯培养。化鉴定和纯培养。第三十八页,共七十五页。39/chapter第三篇 细菌学各论3.纯培养物抗原鉴定纯培养物抗原鉴定 将将TSI琼脂反应模式符合埃希氏菌琼脂反应模式符合埃希氏菌属的生长物或其相应的普通斜面属的生长物或其相应的普通斜面(ximin)纯培养物做纯培养物做O、K抗抗原鉴定。原鉴定。4.检测毒力因子检测毒力因子 确定其属
33、于何类致病性大肠杆菌。确定其属于何类致病性大肠杆菌。六、防治六、防治 目前已有菌苗,包括抗粘附素的含单价或多价菌毛抗原的灭目前已有菌苗,包括抗粘附素的含单价或多价菌毛抗原的灭活全菌苗或亚单位苗;抗肠毒素的类毒素苗;表达一种或两种活全菌苗或亚单位苗;抗肠毒素的类毒素苗;表达一种或两种粘附素以及同时表达粘附素和肠毒素的基因工程菌苗等。用这粘附素以及同时表达粘附素和肠毒素的基因工程菌苗等。用这些菌苗免疫怀孕母畜后,均能使其后代从初乳中获得抗体而被些菌苗免疫怀孕母畜后,均能使其后代从初乳中获得抗体而被动保护。动保护。第三十九页,共七十五页。40/chapter第三篇 细菌学各论u第二节第二节 沙门氏菌
34、沙门氏菌(sh mn sh jn)(sh mn sh jn)属属(Salmonella)(Salmonella)一、主要一、主要(zhyo)(zhyo)特征特征 沙门氏菌属是一群革兰氏阴性无芽孢杆菌,通沙门氏菌属是一群革兰氏阴性无芽孢杆菌,通常常(tngchng)都以周生鞭毛运动。在三糖铁琼脂上常产都以周生鞭毛运动。在三糖铁琼脂上常产生生H2S,大多沙门氏菌不发酵乳糖。,大多沙门氏菌不发酵乳糖。绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性,能引绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性,能引起人和动物的多种不同临床表现的沙门氏菌病,并起人和动物的多种不同临床表现的沙门氏菌病,并为人类食物中毒的主要病原之一,在医
35、学、兽医和为人类食物中毒的主要病原之一,在医学、兽医和公共卫生上均十分重要。公共卫生上均十分重要。沙门氏菌血清型复杂,有沙门氏菌血清型复杂,有2 500种以上。种以上。第四十页,共七十五页。41/chapter第三篇 细菌学各论一、形态及染色特性一、形态及染色特性 形态染色特性与同科其他菌形态染色特性与同科其他菌属相似属相似(xin s),呈杆状,呈杆状,0.7-1.5umX2.0-5.0um,革兰,革兰氏阴性。除雏沙门氏菌和鸡沙门氏菌无鞭毛不运动外,氏阴性。除雏沙门氏菌和鸡沙门氏菌无鞭毛不运动外,其余均有周生鞭毛可运动,大多数有菌毛。其余均有周生鞭毛可运动,大多数有菌毛。第四十一页,共七十五
36、页。42/chapter第三篇 细菌学各论二、培养及生化特性二、培养及生化特性 本属大多数细菌的培养特性与本属大多数细菌的培养特性与埃希氏菌属相似。沙门氏菌在肉汤琼脂上生长贫瘠,形埃希氏菌属相似。沙门氏菌在肉汤琼脂上生长贫瘠,形成成(xngchng)较小的菌落。在肠道菌鉴别或选择性培养基上,较小的菌落。在肠道菌鉴别或选择性培养基上,大多数菌株因不发酵乳糖而形成大多数菌株因不发酵乳糖而形成(xngchng)无色菌落。无色菌落。Salmonella on S.S.Agar Salmonella on麦康基琼脂上麦康基琼脂上为无色为无色(w s)菌落菌落第四十二页,共七十五页。43/chapter第
37、三篇 细菌学各论 抗原类型抗原类型 数量数量 性质性质 O抗原 58种 特异性决定于LPS的特异多糖侧链的结构,是一种耐热多糖抗原。K抗原(Vi抗原)N-乙酰-D-半乳糖胺糖醛酸聚合物。H抗原 63种 蛋白质性鞭毛抗原。血清型表示法:O8:K23(L):H19 三、抗原三、抗原(kngyun)及变异及变异第四十三页,共七十五页。44/chapter第三篇 细菌学各论四、致病性类型四、致病性类型 根据对宿主嗜性不同,可将根据对宿主嗜性不同,可将沙门氏菌分成三群。沙门氏菌分成三群。第一群第一群具有高度专嗜性沙门氏菌,它们只对人或某种动物具有高度专嗜性沙门氏菌,它们只对人或某种动物产生特定的疾病。例
38、如鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌仅使鸡和产生特定的疾病。例如鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌仅使鸡和火鸡发病,马流产、牛流产和羊流产等沙门氏菌;猪伤寒火鸡发病,马流产、牛流产和羊流产等沙门氏菌;猪伤寒沙门氏菌仅侵害猪。沙门氏菌仅侵害猪。第二群第二群是在一定程度适应于特定动物的偏嗜性沙门氏是在一定程度适应于特定动物的偏嗜性沙门氏菌,如猪霍乱和都柏林沙门氏菌,分别是猪和牛羊的菌,如猪霍乱和都柏林沙门氏菌,分别是猪和牛羊的致病菌。致病菌。第三群第三群是泛嗜性沙门氏菌,它们有广泛宿主谱,能引起是泛嗜性沙门氏菌,它们有广泛宿主谱,能引起人和各种动物的沙门氏菌病,具有重要人和各种动物的沙门氏菌病,具有重要(zhngyo)的
39、公共卫的公共卫生意义。如鼠伤寒和肠炎沙门氏菌等。生意义。如鼠伤寒和肠炎沙门氏菌等。第四十四页,共七十五页。45/chapter第三篇 细菌学各论六、毒力因子六、毒力因子 沙门氏菌毒力因子有多种,主要有脂多糖沙门氏菌毒力因子有多种,主要有脂多糖(LPS)、肠毒素、细胞毒素及毒力基因。、肠毒素、细胞毒素及毒力基因。七、免疫性七、免疫性 体液抗体体液抗体(kngt)与细胞免疫在抗沙门氏菌感与细胞免疫在抗沙门氏菌感染中都很重要。染中都很重要。认为细胞免疫在抗沙门氏菌感染中具有重要作用。认为细胞免疫在抗沙门氏菌感染中具有重要作用。八、微生物学诊断八、微生物学诊断 未污染病料未污染病料 直接接种普通琼脂、
40、血琼脂或鉴别培养基直接接种普通琼脂、血琼脂或鉴别培养基平板分离细菌;平板分离细菌;污染材料污染材料 如饮水、粪便、饲料、肠内容物和已败坏如饮水、粪便、饲料、肠内容物和已败坏组织等,常需要增菌培养基增菌后再行分离。组织等,常需要增菌培养基增菌后再行分离。第四十五页,共七十五页。46/chapter第三篇 细菌学各论九、防制九、防制(fn zh)目前的疫苗多限于预防各种家畜特有的目前的疫苗多限于预防各种家畜特有的沙门氏菌病,例如猪副伤寒、马流产以及牛、羊的都柏沙门氏菌病,例如猪副伤寒、马流产以及牛、羊的都柏林等沙门氏菌的灭活菌苗。林等沙门氏菌的灭活菌苗。第四十六页,共七十五页。47/chapter
41、第三篇 细菌学各论u第三节第三节 耶尔森菌属耶尔森菌属(Yersinia)(Yersinia)本菌属由革兰氏阴性、运动或本菌属由革兰氏阴性、运动或不运动的多形性短小不运动的多形性短小(dun xio)杆菌杆菌组成。除鼠疫菌无鞭毛外,其余组成。除鼠疫菌无鞭毛外,其余成员在成员在22-28培养时有动力,但培养时有动力,但37培养则无动力。代表菌种为鼠培养则无动力。代表菌种为鼠疫耶尔森菌,简称鼠疫杆菌。疫耶尔森菌,简称鼠疫杆菌。本菌属现有本菌属现有11个种,对人和动物个种,对人和动物有致病性的主要有三个种:鼠疫耶有致病性的主要有三个种:鼠疫耶尔森菌、假结核耶尔森菌、小肠结尔森菌、假结核耶尔森菌、小肠
42、结肠炎耶尔森菌。肠炎耶尔森菌。耶尔森菌电镜照片耶尔森菌电镜照片(zhopin)第四十七页,共七十五页。48/chapter第三篇 细菌学各论第四十八页,共七十五页。49/chapter第三篇 细菌学各论第四十九页,共七十五页。50/chapter第三篇 细菌学各论第五十页,共七十五页。51/chapter第三篇 细菌学各论u 第九章第九章 弧菌弧菌(h jn)(h jn)科(科(VibrionaceaeVibrionaceae)第一节第一节第一节第一节 弧菌弧菌弧菌弧菌(h jn)(h jn)属属属属第二节第二节第二节第二节 气单胞菌属气单胞菌属气单胞菌属气单胞菌属第五十一页,共七十五页。52
43、/chapter第三篇 细菌学各论u第一节第一节 弧菌弧菌(h jn)(h jn)属(属(VibrioVibrio)副溶血性弧菌副溶血性弧菌(h jn)本菌具嗜盐性,本菌具嗜盐性,存在于海产品,人食用污染本菌存在于海产品,人食用污染本菌的鱼、贝类引致食物中毒。的鱼、贝类引致食物中毒。一、形态及培养特性一、形态及培养特性 菌体多形菌体多形性,可为弧状、杆状或丝状。性,可为弧状、杆状或丝状。一端有鞭毛,革兰氏染色阴性。一端有鞭毛,革兰氏染色阴性。菌落中等大小,培养菌落中等大小,培养24h时直径时直径约约2mm。嗜。嗜Na+,可在含,可在含7.5NaCl的培养基生长。的培养基生长。亚洲亚洲(y zh
44、u)霍乱分离的逗点状弧菌霍乱分离的逗点状弧菌第五十二页,共七十五页。53/chapter第三篇 细菌学各论二、致病性二、致病性 本菌的致病株绝大多数能产生溶本菌的致病株绝大多数能产生溶血毒素,裂解人、兔等红细胞,因此可用溶血血毒素,裂解人、兔等红细胞,因此可用溶血反应区分致病株与非致病株,称之为神奈川试反应区分致病株与非致病株,称之为神奈川试验。验。人食用本菌污染的海鱼、贝类等常引致食物中毒,潜伏人食用本菌污染的海鱼、贝类等常引致食物中毒,潜伏期期2-36h,表现为水样腹泻、呕吐及发热,一般能很快康复。,表现为水样腹泻、呕吐及发热,一般能很快康复。近年来从我国人工养殖发病死亡的海鱼、贝类等也分
45、离到本近年来从我国人工养殖发病死亡的海鱼、贝类等也分离到本菌。菌。三、微生物学诊断三、微生物学诊断 取病人粪便或可疑食品接种嗜盐取病人粪便或可疑食品接种嗜盐菌选择培养基或菌选择培养基或SS平板。挑取可疑菌落进一步作生化平板。挑取可疑菌落进一步作生化试验,最后试验,最后(zuhu)检测其毒素作神奈川试验等,也可用检测其毒素作神奈川试验等,也可用PCR等技术在基因水平检测毒素。等技术在基因水平检测毒素。第五十三页,共七十五页。54/chapter第三篇 细菌学各论u第二节第二节 气单胞菌属(气单胞菌属(AeromonasAeromonas)本属一些本属一些(yxi)种类细菌对鱼类、禽类、哺乳动物种
46、类细菌对鱼类、禽类、哺乳动物及人类有致病性,是鱼类最常见的致病菌。及人类有致病性,是鱼类最常见的致病菌。类志贺气单胞菌类志贺气单胞菌气单胞菌引起气单胞菌引起(ynq)的鱼病的鱼病第五十四页,共七十五页。55/chapter第三篇 细菌学各论u 第十章第十章 巴氏杆菌科及相关巴氏杆菌科及相关(xinggun)(xinggun)属属第一节第一节第一节第一节 巴氏杆菌属巴氏杆菌属巴氏杆菌属巴氏杆菌属第二节第二节第二节第二节 曼氏杆菌属曼氏杆菌属曼氏杆菌属曼氏杆菌属第三节第三节第三节第三节 里氏杆菌属里氏杆菌属里氏杆菌属里氏杆菌属第四节第四节第四节第四节 放线杆菌属放线杆菌属放线杆菌属放线杆菌属第五节
47、第五节第五节第五节 嗜血嗜血嗜血嗜血(sh xu)(sh xu)杆菌属杆菌属杆菌属杆菌属第六节第六节第六节第六节 泰勒菌属泰勒菌属泰勒菌属泰勒菌属第五十五页,共七十五页。56/chapter第三篇 细菌学各论u 第一节第一节 巴氏杆菌属巴氏杆菌属(PasteurellaPasteurella)本属细菌已报道有本属细菌已报道有20多种,多杀性巴氏杆菌是本属中最多种,多杀性巴氏杆菌是本属中最重要的畜禽致病菌。重要的畜禽致病菌。多杀性巴氏杆菌多杀性巴氏杆菌 本菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病本菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病(亦称出血性败血症亦称出血性败血症)的病原体,主要使动物的病原体,主要使动物(dngw)
48、发生出血性败血病或传染性发生出血性败血病或传染性肺炎。肺炎。一、形态及染色一、形态及染色 为球杆状或短杆状菌,两端钝圆,大为球杆状或短杆状菌,两端钝圆,大小为小为0.25-0.4um*0.5-2.5um。单个存在,有时成双排列。单个存在,有时成双排列。第五十六页,共七十五页。57/chapter第三篇 细菌学各论 病料涂片用瑞氏染色病料涂片用瑞氏染色(rns)或美蓝染色或美蓝染色(rns)时,可见典型时,可见典型的两极着色,即菌体两端染的两极着色,即菌体两端染 色深中间浅,无鞭毛,不形色深中间浅,无鞭毛,不形成芽孢,新分离的强毒菌株有荚膜。革兰氏染色成芽孢,新分离的强毒菌株有荚膜。革兰氏染色(
49、rns)阴阴性。性。二、培养及生化特性二、培养及生化特性 需氧或兼性厌氧菌。对营养要求较需氧或兼性厌氧菌。对营养要求较严格。在普通培养基上生长贫瘠,在麦康凯培养上不生严格。在普通培养基上生长贫瘠,在麦康凯培养上不生长。在加有血液、血清或微量血红素的培养基中生长良长。在加有血液、血清或微量血红素的培养基中生长良好。最适温度为好。最适温度为37,pH7.2-7.4。在血清琼脂乎板上培养在血清琼脂乎板上培养24h,可长成淡灰白色、闪光的露珠状可长成淡灰白色、闪光的露珠状小菌落小菌落(jnlu)。在血琼脂平板上,。在血琼脂平板上,长成水滴样小菌落长成水滴样小菌落(jnlu),无溶血,无溶血现象。现象。
50、多杀性巴氏杆菌血琼脂多杀性巴氏杆菌血琼脂(qingzh)平板培养菌落形态平板培养菌落形态第五十七页,共七十五页。58/chapter第三篇 细菌学各论 三、血清型三、血清型 本菌主要以其菌体抗原和荚膜抗原区分本菌主要以其菌体抗原和荚膜抗原区分血清型,前者有血清型,前者有6个型,后者分为个型,后者分为16个型。我国分离的个型。我国分离的禽多杀性巴氏杆菌以禽多杀性巴氏杆菌以5:A为多,其次为为多,其次为8:A。四、抵抗力四、抵抗力 本菌抵抗力不强。在阳光中暴晒本菌抵抗力不强。在阳光中暴晒1min,或,或在在5615min或或 60 10min,可被杀死。厩肥中可存活,可被杀死。厩肥中可存活1个月,
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