戊巴比妥钠氨基甲酸乙脂hc氯醛.pptx

戊巴比妥钠，氨基甲酸乙脂，戊巴比妥钠，氨基甲酸乙脂，氯醛糖，氯胺酮氯醛糖，氯胺酮对血管的作用及机制对血管的作用及机制第二组徐娜妮 张欢 蔡军目的目的l了解戊巴比妥钠，氨基甲酸乙脂，了解戊巴比妥钠，氨基甲酸乙脂，氯醛糖，氯胺酮对血管平滑肌的舒张作用及氯醛糖，氯胺酮对血管平滑肌的舒张作用及机制机制。研究现状研究现状l血管内皮生成的血管活性物质血管内皮生成的血管活性物质 多年来一直以为多年来一直以为血管内皮只是衬在心脏和血管腔面的一层单层细血管内皮只是衬在心脏和血管腔面的一层单层细胞组织；在毛细血管处，通过内皮进行血管内外胞组织；在毛细血管处，通过内皮进行血管内外的物质交换。近年已证实，内皮细胞可以生成并的物质交换。近年已证实，内皮细胞可以生成并释放若干种血管活性物质，引起血管平滑肌舒张释放若干种血管活性物质，引起血管平滑肌舒张或收缩或收缩。原理原理l血管内皮生成的舒血管物质血管内皮生成的舒血管物质 l内皮细胞内的前列环素合成酶可以合成前列环素l内皮生成的另一类舒血管物质更重要，即内皮舒张因子 l内皮细胞表面存在着一些受体，例如P物质受体、5-羟色胺受体、ATP受体、M型胆碱能受体等，这些受体被相应的物质激活后，可释放EDRF。原理原理l血管内皮生成的缩血管物质血管内皮生成的缩血管物质（内皮缩血因子（内皮缩血因子）l内皮素（endothelin）是已知的最强烈的缩血管物质之一 原理原理l血管平滑肌细胞有血管平滑肌细胞有和和两类肾上腺素能受体。两类肾上腺素能受体。去甲肾上腺素与去甲肾上腺素与肾上腺素能受体结合，可导致肾上腺素能受体结合，可导致血管平滑肌收缩；与血管平滑肌收缩；与肾上腺素能受体结合，则肾上腺素能受体结合，则导致血管平滑肌舒张。导致血管平滑肌舒张。材料材料l健康的健康的SD大鼠，雄性，体重大鼠，雄性，体重250280克；克；l麦氏浴槽，超级恒温水浴，温度计，麦氏浴槽，超级恒温水浴，温度计，5g张力换能器，微张力换能器，微机生物信号采集处理仪，手术剪刀，眼科剪，眼科镊，机生物信号采集处理仪，手术剪刀，眼科剪，眼科镊，培养皿，烧杯，培养皿，烧杯，100 l、1m1移液器棉线；移液器，棉线；l试剂：试剂：2戊巴比妥钠，戊巴比妥钠，20氨基甲酸乙脂，氨基甲酸乙脂，2 氯醛糖，氯醛糖，2氯胺酮，氯胺酮，Krebs液液，3mo1/L氯化钾氯化钾 95%O2+5%CO2混合气体混合气体 方法方法用保留血管内皮和去血管内皮的离体兔胸主动脉用保留血管内皮和去血管内皮的离体兔胸主动脉做标本，记录用药前后血管张力的变化。做标本，记录用药前后血管张力的变化。方法方法1.PcLab参数设置参数设置：记录方式：连续记录；记录方式：连续记录；存盘方式：连续存盘；存盘方式：连续存盘；采样速率：采样速率：5ms；输入：输入：DC耦合；耦合；放大倍数放大倍数200500。方法方法2标本制备标本制备（1）击昏大鼠，剪开胸腔，迅速取出心脏及胸主动脉放）击昏大鼠，剪开胸腔，迅速取出心脏及胸主动脉放入盛有入盛有4的混合气体饱和的的混合气体饱和的Krebs营养液的培养皿中，营养液的培养皿中，连续用混合气体充气。分离出主动脉，将血管内的残存连续用混合气体充气。分离出主动脉，将血管内的残存血液冲洗干净，小心剥去外围的结缔组织，将主动脉弓血液冲洗干净，小心剥去外围的结缔组织，将主动脉弓以下的胸主动脉剪成以下的胸主动脉剪成4mm长的动脉环数段备用长的动脉环数段备用。方法方法l（2）需要保存内皮的血管，动作应轻柔。如需）需要保存内皮的血管，动作应轻柔。如需无内皮的血管环，可用棉签或牙签将血管内皮轻无内皮的血管环，可用棉签或牙签将血管内皮轻轻檫去。轻檫去。l（3）将固定杆上的不锈钢钩轻轻穿入血管环，）将固定杆上的不锈钢钩轻轻穿入血管环，并将另一连有细线的三角形不锈钢挂钩也轻轻穿并将另一连有细线的三角形不锈钢挂钩也轻轻穿入，将其固定悬挂于盛有入，将其固定悬挂于盛有5ml Krebs液的麦氏浴液的麦氏浴槽内（图槽内（图11-27-1），通入混合气体，调节通气），通入混合气体，调节通气量至一个一个小气泡逸出为好。浴槽内温度应保量至一个一个小气泡逸出为好。浴槽内温度应保持持37 0.5。方法方法l（4）血管环的初始张力前）血管环的初始张力前15分钟为分钟为1g，15分钟分钟后调至后调至2g，并以此张力平衡，并以此张力平衡45分钟。每隔分钟。每隔15分分钟换液一次。钟换液一次。l（5）用终浓度）用终浓度60mmol KCL（3mol KCL 100 l）收缩血管环，待收缩稳定后用预热的）收缩血管环，待收缩稳定后用预热的Krebs洗脱，反复冲洗直至张力恢复到初始值为洗脱，反复冲洗直至张力恢复到初始值为止；重复加入同一浓度止；重复加入同一浓度KCL，连续，连续3次，用次，用Krebs液反复脱洗标本使其张力回复初始值。液反复脱洗标本使其张力回复初始值。方法方法l（6）用）用10-4mol的苯肾上腺素的苯肾上腺素50 l（终浓度（终浓度10-6mol）诱发血管收缩达稳定后，加入）诱发血管收缩达稳定后，加入10-4mol的乙酰胆碱的乙酰胆碱50 l（终浓度（终浓度10-6M），观察），观察血管的松弛效应是否超过血管的松弛效应是否超过10%，如果，如果10%则为则为内皮完整，否则为内皮受损或无内皮。内皮完整，否则为内皮受损或无内皮。方法方法图11-27-1 血管灌流示意图 用用Krebs液反复脱洗标本使其张力回复初始值，液反复脱洗标本使其张力回复初始值，间隔间隔30分钟进行下一项目，每隔分钟进行下一项目，每隔15分钟换一次。分钟换一次。观察项目观察项目 l内皮完整内皮完整l按以下顺序把药物加于浴槽中按以下顺序把药物加于浴槽中（每次给药在收缩达高峰（每次给药在收缩达高峰后记录动脉环张力变化，然后用后记录动脉环张力变化，然后用Krebs液反复脱洗标本液反复脱洗标本使其张力回复初始值）使其张力回复初始值）l 加入2戊巴比妥钠200L；l加入20氨基甲酸乙脂200 L；l加入2 氯醛糖200 L；l加入2氯胺酮200 L；l把主动脉环取出，用滤纸吸去其表面水分，称重。观察项目观察项目l内皮缺损内皮缺损l重复完整内皮时给药操作并记录数据重复完整内皮时给药操作并记录数据l分析实验结果分析实验结果表表1：各药物对血管收缩张力大小影响：各药物对血管收缩张力大小影响实验结果实验结果组别2戊巴比妥钠20氨基甲酸乙脂2氯醛糖2氯胺酮内皮完整内皮缺损内皮完整内皮缺损内皮完整内皮缺损内皮完整内皮缺损123456 xs注：注：*p0.05 *p0.01 内皮缺损内皮缺损VS内皮完整内皮完整讨论讨论l（1）Krebs必须临用时用新鲜蒸馏水配制。必须临用时用新鲜蒸馏水配制。l（2）为什么有些药物内皮完整内皮损伤的血管）为什么有些药物内皮完整内皮损伤的血管 松弛效应不同，有些无影响？松弛效应不同，有些无影响？l（3）讨论分析影响实验结果的主要干扰因素及）讨论分析影响实验结果的主要干扰因素及 改进方法改进方法