果蝇的伴性遗传杂交.pptx

实验五实验五 果蝇的伴性遗传杂交果蝇的伴性遗传杂交一一一一 实验目的实验目的实验目的实验目的1 1 掌握果蝇不同性状的决定机制掌握果蝇不同性状的决定机制掌握果蝇不同性状的决定机制掌握果蝇不同性状的决定机制 2 2 记录交配结果和掌握统计处理方法。记录交配结果和掌握统计处理方法。记录交配结果和掌握统计处理方法。记录交配结果和掌握统计处理方法。3 3 正确认识单因子杂交或伴性遗传的正、反交差别。正确认识单因子杂交或伴性遗传的正、反交差别。正确认识单因子杂交或伴性遗传的正、反交差别。正确认识单因子杂交或伴性遗传的正、反交差别。二二 伴性遗传实验原理伴性遗传实验原理位于性染色体上的基因，其传递方式与位于常位于性染色体上的基因，其传递方式与位于常染色体上的基因不同，它的传递方式与雌雄性别有染色体上的基因不同，它的传递方式与雌雄性别有关。关。果蝇的性染色体有果蝇的性染色体有X、Y两种，雌性为两种，雌性为XX，雄，雄性为性为XY。n n基础知识基础知识基础知识基础知识n n染色体上的基因控制生物的性状。性染色体上的染色体上的基因控制生物的性状。性染色体上的基因所控制的性状与性别相关联。这种特殊的遗基因所控制的性状与性别相关联。这种特殊的遗传方式叫伴性遗传（人的色盲，血友病都属于伴传方式叫伴性遗传（人的色盲，血友病都属于伴性遗传。控制红绿色盲的基因（性遗传。控制红绿色盲的基因（b b）是隐性基因，是隐性基因，正常色觉基因（正常色觉基因（B B）是显性基因。等位基因）是显性基因。等位基因B B、b b在在X X染色体上，因而红绿色盲是染色体上，因而红绿色盲是X X染色体上隐性基染色体上隐性基因的遗传，是随因的遗传，是随X X染色体向后传递的。根据基因染色体向后传递的。根据基因B B和基因和基因b b的显隐性关系，人的正常色觉与红绿色盲的显隐性关系，人的正常色觉与红绿色盲的基因型有五种情况。的基因型有五种情况。二、实验原理二、实验原理 n n红红红红眼眼眼眼与与与与白白白白眼眼眼眼是是是是一一一一对对对对相相相相对对对对性性性性状状状状，控控控控制制制制该该该该对对对对性性性性状状状状的的的的基基基基因因因因（WW）位位位位于于于于X X染染染染色色色色体体体体上上上上，且且且且红红红红眼眼眼眼（WW）对对对对白白白白眼眼眼眼（w w）为为为为完完完完全全全全显显显显性性性性。当当当当红红红红眼眼眼眼雌雌雌雌蝇蝇蝇蝇与与与与白白白白眼眼眼眼雄雄雄雄蝇蝇蝇蝇杂杂杂杂交交交交时时时时，无无无无论论论论雌雌雌雌雄雄雄雄均均均均为为为为红红红红眼眼眼眼，F F2 2中中中中红红红红眼眼眼眼:白白白白眼眼眼眼=3:1=3:1，但但但但雌雌雌雌蝇蝇蝇蝇全全全全为为为为红红红红眼眼眼眼，雄雄雄雄蝇蝇蝇蝇中中中中红红红红眼眼眼眼:白白白白眼眼眼眼=1:1=1:1；反反反反交交交交时时时时F1F1中中中中雌雌雌雌蝇蝇蝇蝇为为为为红红红红眼眼眼眼，雄雄雄雄蝇蝇蝇蝇为为为为白白白白眼眼眼眼，F F2 2中中中中红红红红眼眼眼眼:白眼白眼白眼白眼=1:1=1:1，雌蝇和雄蝇中的红眼与白眼的比例均为，雌蝇和雄蝇中的红眼与白眼的比例均为，雌蝇和雄蝇中的红眼与白眼的比例均为，雌蝇和雄蝇中的红眼与白眼的比例均为1:11:1。n n正正正正常常常常翅翅翅翅（SnSn3 3）对对对对小小小小翅翅翅翅（snsn3 3）为为为为显显显显性性性性，正正正正常常常常刚刚刚刚毛毛毛毛（MM）对对对对焦焦焦焦刚刚刚刚毛毛毛毛（mm）为为为为显显显显性性性性，与与与与红红红红眼眼眼眼（WW）和和和和白白白白眼眼眼眼（w w）一一一一样样样样，均均均均位位位位于于于于（X X）染染染染色色色色体体体体上上上上。利利利利用用用用三三三三点点点点测测测测交交交交的的的的方方方方法法法法只只只只需需需需通通通通过过过过一一一一次次次次杂杂杂杂交交交交和和和和一一一一次次次次测测测测交交交交就就就就能能能能同同同同时时时时确确确确定定定定三个基因在染色体上的位置顺序和基因的相对距离，绘出连锁图。三个基因在染色体上的位置顺序和基因的相对距离，绘出连锁图。三个基因在染色体上的位置顺序和基因的相对距离，绘出连锁图。三个基因在染色体上的位置顺序和基因的相对距离，绘出连锁图。n n让让让让白白白白眼眼眼眼小小小小翅翅翅翅焦焦焦焦刚刚刚刚毛毛毛毛 蝇蝇蝇蝇与与与与野野野野生生生生型型型型 蝇蝇蝇蝇杂杂杂杂交交交交，F F1 1雌雌雌雌蝇蝇蝇蝇是是是是三三三三杂杂杂杂合合合合体体体体：表表表表型型型型为为为为野野野野生生生生型型型型。F F1 1 蝇蝇蝇蝇是是是是白白白白眼眼眼眼焦焦焦焦刚刚刚刚毛毛毛毛小小小小翅翅翅翅。F F1 1代代代代的的的的雌雌雌雌雄雄雄雄蝇蝇蝇蝇互互互互交交交交实实实实际际际际上上上上相相相相当当当当于于于于三三三三杂杂杂杂合合合合体体体体雌雌雌雌蝇蝇蝇蝇与与与与三三三三隐隐隐隐性性性性雄雄雄雄蝇蝇蝇蝇的的的的测测测测交交交交。通通通通过过过过对对对对互互互互交交交交后后后后代代代代中中中中各各各各种种种种表表表表型比例的分析，就可进行型比例的分析，就可进行型比例的分析，就可进行型比例的分析，就可进行w w、snsn3 3和和和和mm等基因的定位。等基因的定位。等基因的定位。等基因的定位。正交正交白眼雄果蝇白眼雄果蝇 红眼雌果蝇红眼雌果蝇雌雄都是红眼果蝇雌雄都是红眼果蝇 （F1）红眼与白眼的数量比红眼与白眼的数量比3:1 (F2)白眼果蝇都是雄性白眼果蝇都是雄性反交反交红眼雄果蝇红眼雄果蝇 白眼雌果蝇白眼雌果蝇雌果蝇为红眼，雄果蝇为白眼雌果蝇为红眼，雄果蝇为白眼 （F1）雌果蝇红眼与白眼的数量比雌果蝇红眼与白眼的数量比1:1 (F2)雄果蝇红眼与白眼的数量比雄果蝇红眼与白眼的数量比1:1 (F2)n n红 眼白白白白 眼眼眼眼三、实验材料三、实验材料果蝇品系：野生型（红眼）：果蝇品系：野生型（红眼）：18突变型：突变型：2222 （白眼（白眼,白眼基因在白眼基因在白眼基因在白眼基因在X X染色体上）染色体上）染色体上）染色体上）6 6 (白眼残翅）白眼残翅）白眼残翅）白眼残翅）四、实验仪器及用具四、实验仪器及用具 双筒解剖镜、麻醉瓶、镊子、解剖针、双筒解剖镜、麻醉瓶、镊子、解剖针、滴管，吸水纸、培养皿滴管，吸水纸、培养皿五、药品和试剂五、药品和试剂 白糖、琼脂、干酵母、玉米粉、乙醚白糖、琼脂、干酵母、玉米粉、乙醚 n n六、实验步骤六、实验步骤n n1 1、收集处女蝇：需收集孵化时间在、收集处女蝇：需收集孵化时间在、收集处女蝇：需收集孵化时间在、收集处女蝇：需收集孵化时间在8 8小时以内的雌小时以内的雌小时以内的雌小时以内的雌果蝇作为处女蝇，将雌雄果蝇分开装。果蝇作为处女蝇，将雌雄果蝇分开装。果蝇作为处女蝇，将雌雄果蝇分开装。果蝇作为处女蝇，将雌雄果蝇分开装。n n2 2、按正交与反交的组合，分别引入、按正交与反交的组合，分别引入、按正交与反交的组合，分别引入、按正交与反交的组合，分别引入4 45 5对果蝇，贴对果蝇，贴对果蝇，贴对果蝇，贴上标签。（两个组合并）上标签。（两个组合并）上标签。（两个组合并）上标签。（两个组合并）n n3 3、见到一定数量的、见到一定数量的、见到一定数量的、见到一定数量的F1F1幼虫后，去除亲本。幼虫后，去除亲本。幼虫后，去除亲本。幼虫后，去除亲本。n n4 4、观察、观察、观察、观察F1F1代成蝇性状，记录实验结果。（雌雄，代成蝇性状，记录实验结果。（雌雄，代成蝇性状，记录实验结果。（雌雄，代成蝇性状，记录实验结果。（雌雄，红眼与白眼）红眼与白眼）红眼与白眼）红眼与白眼）n n5 5、分别从、分别从、分别从、分别从F1F1代正交与反交果蝇中挑代正交与反交果蝇中挑代正交与反交果蝇中挑代正交与反交果蝇中挑3 35 5对，转移到对，转移到对，转移到对，转移到新的培养瓶进行培养。新的培养瓶进行培养。新的培养瓶进行培养新的培养瓶进行培养。n n6 6、待、待、待、待F2F2代幼虫出现后，去除代幼虫出现后，去除代幼虫出现后，去除代幼虫出现后，去除F1F1代亲本。代亲本。代亲本。代亲本。n n7 7、待成蝇出现，隔、待成蝇出现，隔、待成蝇出现，隔、待成蝇出现，隔1-21-2天记录实验结果。天记录实验结果。天记录实验结果。天记录实验结果。n n8 8、根据获得的实验结果进行数据分析（全班的结、根据获得的实验结果进行数据分析（全班的结、根据获得的实验结果进行数据分析（全班的结、根据获得的实验结果进行数据分析（全班的结果）。果）。果）。果）。n n七、注意事项七、注意事项七、注意事项七、注意事项1 1 处女蝇的收集处女蝇的收集。处女蝇的收集。处女蝇的收集。2 2 认真观察获得的果蝇后代，做好清晰的实验记录。认真观察获得的果蝇后代，做好清晰的实验记录。认真观察获得的果蝇后代，做好清晰的实验记录。认真观察获得的果蝇后代，做好清晰的实验记录。果蝇的单因子实验杂交组合果蝇的单因子实验杂交组合 1818 x 22x 22 (正交）正交）正交）正交）2222 x 18x 18(反交反交反交反交)3 3 把握好每个实验的时间。（去除的亲本果蝇由实把握好每个实验的时间。（去除的亲本果蝇由实把握好每个实验的时间。（去除的亲本果蝇由实把握好每个实验的时间。（去除的亲本果蝇由实验室统一收集，每天定个时间，让大家来实验室验室统一收集，每天定个时间，让大家来实验室验室统一收集，每天定个时间，让大家来实验室验室统一收集，每天定个时间，让大家来实验室进行杂交处理。）进行杂交处理。）进行杂交处理。）进行杂交处理。）1.果蝇要适度麻醉，挑蝇果蝇要适度麻醉，挑蝇用毛笔，忌用镊子和其他工用毛笔，忌用镊子和其他工具，以免影响果蝇生长繁育具，以免影响果蝇生长繁育注意事项2.挑处女蝇时，挑处女蝇时，每次只挑每次只挑12小时内羽化成小时内羽化成虫，超过虫，超过12小时的成虫已逐渐小时的成虫已逐渐有交配能力有交配能力,必须一只不留地倒必须一只不留地倒出处死出处死,才能进行第才能进行第二次挑选二次挑选3.刚羽化的果蝇色淡白，体软绵，刚羽化的果蝇色淡白，体软绵，难辨难辨，务必小心区别，务必小心区别 4.使用毛笔和瓷板，要用酒精棉球使用毛笔和瓷板，要用酒精棉球消毒，同时必须凉干才能使用。消毒，同时必须凉干才能使用。5.每个杂交组合放果蝇每个杂交组合放果蝇34对，用毛笔把果蝇扫进对，用毛笔把果蝇扫进试管，试管要平放，待蝇醒后，试管，试管要平放，待蝇醒后，方能竖起，避免果蝇粘在培养方能竖起，避免果蝇粘在培养基上被闷死，杂交组合配基上被闷死，杂交组合配好后，放回培养箱。好后，放回培养箱。n n伴性遗传遗传具体的实验流程参照P14-19n n单因子杂交具体的实验流程参照P8-14 n nX2(将全班的结果代入,求和)n nP值P 红眼红眼 白眼白眼 F1 红眼红眼、F2 红眼红眼 红眼红眼 白眼白眼 2 ：1 ：1 正交正交正交正交 白眼白眼 红眼红眼 红眼红眼 白眼白眼 红眼红眼 红眼红眼 白眼白眼 白眼白眼 反交反交反交反交n n加酵母粉、放飞亲本加酵母粉、放飞亲本n n2-14 找处女蝇（雌、雄分开，各找处女蝇（雌、雄分开，各4对）对）F0n n一个星期（一个星期（7-8天，天，20号左右）放飞亲本（号左右）放飞亲本（4对果蝇）对果蝇）n n F1出来后开始统计，雌红、雌白、雄红、出来后开始统计，雌红、雌白、雄红、雄白（统计每雄白（统计每2天一次，时间坚持至少天一次，时间坚持至少8天）天）n n F1正反交每个瓶各正反交每个瓶各4对放入，观察对放入，观察F2n n一个星期（一个星期（7-8天，天，20号左右）放飞亲本（号左右）放飞亲本（4对果蝇）对果蝇）n n F1出来后开始统计，雌红、雌白、雄红、出来后开始统计，雌红、雌白、雄红、雄白（统计每雄白（统计每2天一次，时间坚持至少天一次，时间坚持至少8天）天）实验报告要求实验报告要求n n1 1 各小组要有详细的数据记录（包括接种时间、各小组要有详细的数据记录（包括接种时间、雌雄统计数量、时间等）；雌雄统计数量、时间等）；n n2 2 表格见表格见P13P13和和P16P16n n3 3 最后数据，全班统计（分伴性遗传组和单因子最后数据，全班统计（分伴性遗传组和单因子杂交组分开统计）；杂交组分开统计）；n n4 4 分析至少要涉及以下几个方面：分析至少要涉及以下几个方面：1 1）为什么要选在处女蝇？）为什么要选在处女蝇？2 2）杂交的正交和反交杂交的正交和反交F1F1、F2F2表型有何差别，为表型有何差别，为什么？什么？3 3）杂交结果是否符合预期理论结果？你的实验）杂交结果是否符合预期理论结果？你的实验结果是否对全班实验结果造成很大的不利影响；结果是否对全班实验结果造成很大的不利影响；n n下次实验：（第六周休假）第七周 实验六 染色体核型分析 考虑到第六周放假，综合创新性实验也从第七周开始。