1、微生物大小的测定微生物大小的测定一、实验目的及要求一、实验目的及要求学习并掌握测微尺的使用和计算方法,完成对球菌和杆菌的测量。二、实验原理l测微尺的构造:显微镜测微尺是由目镜测微尺和镜台接物测微尺组成 目镜测微尺是一块圆形玻璃片,其中有精确的等分刻度,在 5mm 刻尺上分 50 份。目镜测微尺每格实际代表的长度随使用接目镜和接物镜的放大倍数而改变,因此在使用前必须用镜台测微尺进行标定。镜台测微尺为一专用的载玻片,中央有精确等分线将长为 1mm 的直线等分成 100 个小格,每格长 10m,专用于校正目镜测微尺。2.球菌用直径表示大小;杆菌用宽和长来表示三、实验器材三、实验器材1.菌种:金黄色葡
2、萄球菌、大肠杆菌、酿酒酵母2.仪器、材料:显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸、香柏油、二甲苯。四、实验步骤四、实验步骤1.目微尺的安装:把目镜的上透镜旋开,将目镜测微尺轻轻放在目镜的隔板上,使有刻度的一面朝下。旋上目镜透镜,再将目镜插入镜筒内。2.目微尺的标定 将镜台测微尺放在显微镜的载物台上,使有刻度的一面朝上。先用低倍镜观察,调焦距,待看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度相平行,并使两尺左边的一条线重合,向右寻找另外一条两尺相重合的直线。目镜测微尺每格长度(m)=两条重合线间镜台测微尺的格数10两条重合线间目镜测微尺的格数同样方法换用高倍镜和油镜分别进
3、行校正。3菌体大小的测定 将镜台测微尺取下,换上细菌染色制片,先在低倍镜和高倍镜下找到目的物,然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的大小。先量出菌体的长和宽占目镜测微尺的格数,再以目镜测微尺每格的长度计算出菌体的长和宽。一般测量菌体的大小,应测定1020个菌体,求出平均值,才能代表该菌的大小。酵母细胞直径(宽度)的测定:取下镜台测微尺,换上酿酒酵母制片,在高倍镜下测量出1020个酵母细胞的直径。五、实验报告五、实验报告 1.目微尺校正结果接物镜接物镜倍数目微尺格数台微尺格数目微尺每格代表长度低倍镜高倍镜油镜2.各菌测定结果微生物名称目微尺每格代表长度宽长菌体大小范围目微尺格数宽度目微尺格数长度金黄色葡萄球菌大肠杆菌酿酒酵母六、思考题1为什么更换不同放大倍数的目镜和物镜时必须重新用镜台测微尺对目镜微尺进行标定?2若目镜不变,目镜测微尺也不变,只改变物镜,那么目镜测微尺每格所测量的镜台上的菌体细胞的实际长度(或宽度)是否相同?为什么?