1、病原微生物学病原微生物学实验指导实验指导实验教学中心成 静实验一实验一 细菌的基本形态与特殊结构细菌的基本形态与特殊结构l实验目的：l1、掌握革兰染色法和细菌的基本形态l2、熟悉细菌涂片的制备l3、掌握细菌特殊结构观察l4、掌握显微镜油镜的使用和保护实验内容实验内容l1、临床微生物学实验室规则l2、实验室意外的紧急处理办法l3、实验时的注意事项l4、细菌形态学检查：l 革兰染色和细菌基本形态观察l 特殊结构观察临床微生物学实验室规则临床微生物学实验室规则l1、进入实验室必须穿白大衣，离室时脱下反折，必要时戴口罩操作。l2、不必要物品勿带入实验室，必要的物品应放在指定区域。l3、实验室内禁止饮食
2、、抽烟，不得高声谈笑或随意走动。l4、用过的有菌器材必须放在指定位置，小心处理传染材料、培养物和污染物。l5、避免任何有菌材料的溅出，如不慎污染工作台、人、衣服、地面等，应及时报告老师并处理。l6、实验结束后物归原处，用消毒液浸泡、洗手，打扫卫生的同学清洁和消毒桌面、地面，并将实验器材送到准备室和消毒间，关闭水电门窗后离开实验室。实验室意外的紧急处理办法实验室意外的紧急处理办法l1、皮肤破损l2、烧伤l3、化学药品腐蚀伤l4、菌液误入口中l5、菌液流洒桌面l6、火警实验时的注意事项实验时的注意事项l一、严格遵循实验指导l二、认真完成实验操作l三、充分利用参考资料细菌形态学检查细菌形态学检查革兰
3、染色法和细菌的基本形态革兰染色法和细菌的基本形态l器材和试剂：l菌种：金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌l培养基：普通琼脂平板l试剂：革兰染液l其他：载玻片、生理盐水、酒精灯、火柴等革兰染色法和细菌的基本形态革兰染色法和细菌的基本形态l细菌涂片的制作细菌涂片的制作l 涂片l 干燥l 固定革兰染色法革兰染色法l方法方法l1、初染初染:将结晶紫染液加在制好的涂片上，染色1分钟，用细水冲洗，甩去积水。l2、媒染媒染：加卢戈碘液，染1分钟，用细水冲洗，甩去积水。l3、脱色脱色：加95%酒精数滴，轻摇玻片数秒，使均匀脱色，至无紫色淌下，用细水冲洗，甩去积水。l4、复染复染：加稀释复红染1分钟，用细水冲洗，甩去积
4、水。用吸水纸吸干后，在涂片上滴加镜油，置油镜下检查。革兰染色法革兰染色法l结果观察（油镜下观察，放大结果观察（油镜下观察，放大1000倍）倍）：l1、细菌的基本形态及大小：球菌、杆菌、弧菌l2、细菌的排列方式：散在、葡萄状、链状、成双、四叠、八叠l3、细菌的染色性：阳性呈紫色、阴性呈红色l4、细菌的特殊结构：荚膜、芽孢，不能看到鞭毛。大肠杆菌金葡菌霍乱弧菌链球菌革兰阴性双球菌革兰染色法革兰染色法l思考题：l1、原理l2、意义l3、注意事项特殊结构观察特殊结构观察l芽孢：破伤风杆菌（革兰染色法）l荚膜：肺炎双球菌（革兰染色法）l鞭毛：变形杆菌（镀银染色法）破伤风芽孢肺炎双球菌荚膜变形杆菌周鞭毛鞭毛染色法实验小结实验小结l1、实验报告要求l2、思考题写到实验报告里
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