艾滋病机会性感染及性病实验室检查.pptx

2024/8/23 周五褚云卓1讲授内容讲授内容一、机会性感染病原学检查一、机会性感染病原学检查二、性病实验室检查检查二、性病实验室检查检查2024/8/23 周五褚云卓2一、机会性感染病原学检查一、机会性感染病原学检查1 1、病毒感染、病毒感染2 2、细菌感染、细菌感染 3 3、真菌感染、真菌感染 4 4、原虫感染、原虫感染 2024/8/23 周五褚云卓31 1、病毒感染、病毒感染 CMVCMV感染感染 l细胞学检查细胞学检查 从尿液、脑脊液或受感染的肝、从尿液、脑脊液或受感染的肝、肺、胃等组织标本中，用姬姆萨或瑞肺、胃等组织标本中，用姬姆萨或瑞氏染色法进行染色，可见核内和（或）氏染色法进行染色，可见核内和（或）胞质内含包涵体的巨大细胞，其周围胞质内含包涵体的巨大细胞，其周围有一条明亮带。有一条明亮带。2024/8/23 周五褚云卓4l病毒分离病毒分离 CMVCMV病毒分离是诊断病毒分离是诊断CMVCMV感染最直接的方法，感染最直接的方法，CMVCMV具有种属特异性。采取新鲜尿液、唾液、子宫具有种属特异性。采取新鲜尿液、唾液、子宫分泌液、肝活检或尸检标本、外周血白细胞等，将分泌液、肝活检或尸检标本、外周血白细胞等，将标本接种于人胚肺二倍体传代细胞株上，培养标本接种于人胚肺二倍体传代细胞株上，培养24h24h后染色可见包涵体，而细胞病变需后染色可见包涵体，而细胞病变需2 26 6周才能查见。周才能查见。虽然病毒的分离能证明有虽然病毒的分离能证明有CMVCMV感染的存在，但并不感染的存在，但并不一定能证明与疾病有病原学联系。一定能证明与疾病有病原学联系。1 1、病毒感染、病毒感染 CMVCMV感染感染 2024/8/23 周五褚云卓5l抗体检测抗体检测 补体结合试验（补体结合试验（CFCF）、间接血凝试验）、间接血凝试验（PHAPHA）、免疫荧光试验（）、免疫荧光试验（IFIF）、免疫印迹试验）、免疫印迹试验（IBIB）、酶联免疫吸附试验（）、酶联免疫吸附试验（ELISAELISA）及放射免）及放射免疫试验（疫试验（RIARIA）等。）等。全自动快速微粒子酶免疫检测法（全自动快速微粒子酶免疫检测法（MEIAMEIA）可对可对IgGIgG和和IgMIgM作出定量分析。作出定量分析。1 1、病毒感染、病毒感染 CMV CMV感染感染 2024/8/23 周五褚云卓6lIgMIgM阳性提示患者为现症感染或处于阳性提示患者为现症感染或处于CMVCMV感染感染活动期。活动期。lIgGIgG阳性提示既往感染或潜伏感染。阳性提示既往感染或潜伏感染。lIgGIgG抗体滴度呈抗体滴度呈4 4倍或倍或4 4倍以上增长时，表示倍以上增长时，表示有近期有近期CMVCMV感染。感染。l严重的艾滋病患者血清抗严重的艾滋病患者血清抗CMVCMV抗体可能阴性，抗体可能阴性，故对艾滋病患者来说，故对艾滋病患者来说，CMVCMV血清学检查阴性血清学检查阴性不能排除不能排除CMVCMV感染。感染。2024/8/23 周五褚云卓7l抗原检测抗原检测 早期抗原免疫荧光检查（早期抗原免疫荧光检查（DEAFFDEAFF）：将肺泡）：将肺泡灌洗液、血液白细胞、尿液沉积物、活检或尸检灌洗液、血液白细胞、尿液沉积物、活检或尸检样本接种于成纤维细胞，培养样本接种于成纤维细胞，培养2424小时后用荧光标小时后用荧光标记的单克隆抗体直接测定记的单克隆抗体直接测定CMVCMV的的和和蛋白，该蛋白，该法不仅快速而且敏感性和特异性均较高。法不仅快速而且敏感性和特异性均较高。1 1、病毒感染、病毒感染 CMV CMV感染感染 2024/8/23 周五褚云卓8lCMVCMV白细胞抗原血症检测：白细胞抗原血症检测：用免疫细胞化学的方法在外周血白细胞核中对用免疫细胞化学的方法在外周血白细胞核中对65kDa65kDa低低基质磷蛋白（基质磷蛋白（65kDalow-matrix phosphoprotein65kDalow-matrix phosphoprotein，pp65pp65）进行检测，或利用流式细胞仪荧光标记的单克隆抗体测定进行检测，或利用流式细胞仪荧光标记的单克隆抗体测定白细胞中的白细胞中的CMVCMV抗原，计数细胞病毒抗原的百分比，能提供抗原，计数细胞病毒抗原的百分比，能提供定量数据。定量数据。该方法可在症状出现前检测到该方法可在症状出现前检测到CMVCMV病毒，可定量，以预病毒，可定量，以预测和区分测和区分CMVCMV活动期和无症状感染。可评价抗病毒治疗的效活动期和无症状感染。可评价抗病毒治疗的效果以及检测中枢神经系统感染的艾滋病患者的脑脊液白细果以及检测中枢神经系统感染的艾滋病患者的脑脊液白细胞中胞中CMVCMV，其检测结果与用白细胞或血浆中，其检测结果与用白细胞或血浆中CMV DNACMV DNA扩增结扩增结果一致。使早期免疫受抑制或艾滋病患者的活动性果一致。使早期免疫受抑制或艾滋病患者的活动性CMVCMV感染感染的诊断成为可能，该方法简便、快速且敏感性高。的诊断成为可能，该方法简便、快速且敏感性高。2024/8/23 周五褚云卓9l免疫组化检查免疫组化检查 将外周血白细胞用抗将外周血白细胞用抗CMVCMV单克隆抗体进单克隆抗体进行免疫组化染色也可快速作出诊断。免疫行免疫组化染色也可快速作出诊断。免疫荧光检测标本中的荧光检测标本中的CMVCMV早期抗原，阳性时早期抗原，阳性时提示提示CMVCMV活动性感染。活动性感染。1 1、病毒感染、病毒感染 CMV CMV感染感染 2024/8/23 周五褚云卓10lCMVCMV核酸检测核酸检测 检测和定量检测和定量CMV DNACMV DNA以及以及mRNAmRNA 提取外周血白细胞、血浆、血清中提取外周血白细胞、血浆、血清中CMV DNACMV DNA，采用套式，采用套式PCRPCR可诊断活动型可诊断活动型MCVMCV感染，利用逆感染，利用逆转录转录PCRPCR技术检测外周血白细胞中技术检测外周血白细胞中MCV mRNAMCV mRNA，能，能够测出完整的病毒复制周期，特异性较普通够测出完整的病毒复制周期，特异性较普通PCRPCR检测检测DNADNA高。高。1 1、病毒感染、病毒感染 CMV CMV感染感染 2024/8/23 周五褚云卓11 艾滋病患者、器官移植者当处于艾滋病患者、器官移植者当处于CMVCMV感染的活动感染的活动期时，体内含有较高水平的期时，体内含有较高水平的CMV DNACMV DNA，伴随着临床，伴随着临床症状的出现和用药治疗的失败症状的出现和用药治疗的失败CMV DNACMV DNA的拷贝数会的拷贝数会快速升高。快速升高。因此，因此，RasmussenRasmussen等用外周血白细胞中的等用外周血白细胞中的CMV CMV DNADNA含量来确定艾滋病患者的视网膜炎是否由含量来确定艾滋病患者的视网膜炎是否由CMVCMV感感染引起。但是，用染引起。但是，用PCRPCR方法检测方法检测CMV DNACMV DNA还不能判定还不能判定患者是处于活动期、无症状期还是潜伏期，不能精患者是处于活动期、无症状期还是潜伏期，不能精确评估疾病的进程和用药治疗的效果。确评估疾病的进程和用药治疗的效果。2024/8/23 周五褚云卓12l形态学检查形态学检查 取标本涂片，以姬姆萨和瑞氏染色，取标本涂片，以姬姆萨和瑞氏染色，镜检可见多核巨细胞和核内嗜酸性包涵镜检可见多核巨细胞和核内嗜酸性包涵体。体。1 1、病毒感染、病毒感染 HSV-1HSV-1和和HSV-2HSV-2感染感染 2024/8/23 周五褚云卓13l病毒分离病毒分离 在感染最初几天取病损处的水泡液或刮片拭子在感染最初几天取病损处的水泡液或刮片拭子或组织标本接种于或组织标本接种于HSVHSV敏感的细胞中，常用的细胞敏感的细胞中，常用的细胞为人胚肾、兔肾细胞、为人胚肾、兔肾细胞、HelaHela细胞等。接种细胞等。接种48489696小小时后，如发现有细胞肿胀、变圆、细胞融合等细胞时后，如发现有细胞肿胀、变圆、细胞融合等细胞病变现象和特征性的核内包涵体便可作出诊断。病变现象和特征性的核内包涵体便可作出诊断。1 1、病毒感染、病毒感染 HSV-1 HSV-1和和HSV-2HSV-2感染感染 2024/8/23 周五褚云卓14l免疫学检测免疫学检测 HSVHSV抗原检测主要是用抗原检测主要是用HSVHSV特异性单克隆抗体，特异性单克隆抗体，以免疫荧光或以免疫荧光或ELISAELISA方法直接检测病人组织或分方法直接检测病人组织或分泌物细胞中的泌物细胞中的HSVHSV抗原，若为阳性则诊断为近期抗原，若为阳性则诊断为近期感染感染HSVHSV。HSVHSV抗体检测虽然是临床上最常用检测抗体检测虽然是临床上最常用检测HSVHSV感染的一种手段，但艾滋病患者通常会出现感染的一种手段，但艾滋病患者通常会出现假阴性反应。假阴性反应。1 1、病毒感染、病毒感染 HSV-1 HSV-1和和HSV-2HSV-2感染感染 2024/8/23 周五褚云卓15l核酸检测核酸检测 采用采用PCRPCR技术，扩增技术，扩增HSVHSV基因组中一段特异性的基因组中一段特异性的基因序列，是目前检测速度最快且敏感性最高的方基因序列，是目前检测速度最快且敏感性最高的方法，但是阴性不能排除含有法，但是阴性不能排除含有HSVHSV的可能，因为临床的可能，因为临床早期获得的某些样本用早期获得的某些样本用PCRPCR检测是阴性的，另外在检测是阴性的，另外在样本中也可能存在样本中也可能存在PCRPCR反应的抑制剂。在临床诊断反应的抑制剂。在临床诊断较困难时，较困难时，HSVPCRHSVPCR仍将发挥作用，例如可通过仍将发挥作用，例如可通过PCRPCR在艾滋病患者的玻璃体液和皮肤黏膜病损中检测到在艾滋病患者的玻璃体液和皮肤黏膜病损中检测到HSVDNAHSVDNA。1 1、病毒感染、病毒感染 HSV-1 HSV-1和和HSV-2HSV-2感染感染 2024/8/23 周五褚云卓16诊断诊断HHV-6HHV-6和和HHV-7HHV-7感染感染l培养：可采取病人血液、唾液、体腔液或疱疹液。培养：可采取病人血液、唾液、体腔液或疱疹液。l特异性病毒抗体：间接免疫荧光法或特异性病毒抗体：间接免疫荧光法或ELISAELISA法检测。法检测。但是由于健康人群中血清抗但是由于健康人群中血清抗HHV-6HHV-6和抗和抗HHV-7HHV-7抗体阳性抗体阳性率均超过率均超过85%85%，因此血清学检测的临床意义不大。，因此血清学检测的临床意义不大。l分子生物学方法：分子杂交或分子生物学方法：分子杂交或PCRPCR方法直接检测标本方法直接检测标本中的病毒核酸。中的病毒核酸。1 1、病毒感染、病毒感染 HHV-6 HHV-6、HHV-7HHV-7和和HHV-8HHV-8感染感染 2024/8/23 周五褚云卓17l血清血清HHV-8HHV-8潜伏蛋白潜伏蛋白(latent protein)(latent protein)抗体：抗体：KaposiKaposis s肉瘤和肉瘤和B B淋巴细胞瘤患者阳性，艾滋病患者淋巴细胞瘤患者阳性，艾滋病患者血清抗血清抗HHV-8HHV-8潜伏蛋白抗体阳性常预示病人即将发生潜伏蛋白抗体阳性常预示病人即将发生KaposiKaposis s肉瘤。肉瘤。l血清抗血清抗HHV-8HHV-8可溶性抗原（可溶性抗原（lytic antigenlytic antigen）的抗体：）的抗体：几乎所有几乎所有KaposiKaposis s肉瘤病人和肉瘤病人和90%90%男性同性恋男性同性恋HIVHIV感染感染者为阳性，而正常人群阳性率为者为阳性，而正常人群阳性率为25%25%。1 1、病毒感染、病毒感染 HHV-6 HHV-6、HHV-7HHV-7和和HHV-8HHV-8感染感染 2024/8/23 周五褚云卓18l疱疹基底部的组织碎片进行涂片及瑞氏或姬姆萨染疱疹基底部的组织碎片进行涂片及瑞氏或姬姆萨染色，查找嗜酸性核内包涵体，或用电子显微镜直接色，查找嗜酸性核内包涵体，或用电子显微镜直接检查水疱液中的典型疱疹病毒。检查水疱液中的典型疱疹病毒。l采用采用PCRPCR方法检测标本中病毒核酸，方法灵敏、准方法检测标本中病毒核酸，方法灵敏、准确。确。l血清学检查多应用血清学检查多应用ELISAELISA法，于发病法，于发病2 2个月内查特异个月内查特异性性IgGIgG和和IgMIgM抗体，有诊断价值。抗体，有诊断价值。1 1、病毒感染、病毒感染 V-Z V-Z感染感染 2024/8/23 周五褚云卓19l间接荧光抗体试验（间接荧光抗体试验（IFAIFA）和酶联免疫试验（）和酶联免疫试验（EIAEIA）最理想的最理想的EBEB病毒血清学检测组分是病毒血清学检测组分是VCA-IgGVCA-IgG、EA-IgGEA-IgG和和EBNAEBNA，这种组合，单份血清即可给这种组合，单份血清即可给90%95%90%95%的患者进行精确诊断分类。的患者进行精确诊断分类。l嗜异性抗体和嗜异性抗体和EBEB病毒特异性抗体病毒特异性抗体IgGIgG 嗜异性凝集效价从嗜异性凝集效价从1 1：501501：224224均具有临床价值，均具有临床价值，EBEB病毒特异病毒特异性抗体性抗体IgGIgG滴度滴度1 1：8080即有诊断价值。即有诊断价值。l检测检测EBEB病毒的核酸病毒的核酸 常用的方法有：冷冻切片和石蜡切片的原位杂交试验、细常用的方法有：冷冻切片和石蜡切片的原位杂交试验、细胞悬液的杂交、点杂交和胞悬液的杂交、点杂交和SouthernSouthern印迹杂交等印迹杂交等 1 1、病毒感染、病毒感染 V-Z V-Z感染感染 2024/8/23 周五褚云卓202 2、细菌感染、细菌感染 机会性细菌感染是艾滋病的主要致死因素，机会性细菌感染是艾滋病的主要致死因素，艾滋病患者因反复发生细菌感染而多次住院治疗。艾滋病患者因反复发生细菌感染而多次住院治疗。凡是医院及社区人群感染的细菌均可引起艾滋病患凡是医院及社区人群感染的细菌均可引起艾滋病患者感染，常见的细菌有者感染，常见的细菌有金黄色葡萄球菌、凝固酶阴金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌、肺炎链球菌、假单胞菌、肠性葡萄球菌、肠球菌、肺炎链球菌、假单胞菌、肠杆菌、流感嗜血杆菌和分枝杆菌杆菌、流感嗜血杆菌和分枝杆菌等。尤其是正常免等。尤其是正常免疫人群很少感染的细菌如非结核分枝杆菌等，常引疫人群很少感染的细菌如非结核分枝杆菌等，常引起艾滋病患者机会性感染。起艾滋病患者机会性感染。2024/8/23 周五褚云卓21铜绿假单胞菌（铜绿假单胞菌（P.aeruginosa)革兰阴性，长短不一，革兰阴性，长短不一，单鞭毛。单鞭毛。生长温度生长温度25254242。氧化酶阳性。氧化酶阳性。还原硝酸盐、分解尿素、还原硝酸盐、分解尿素、精氨酸酶阳性。精氨酸酶阳性。2024/8/23 周五褚云卓22铜绿假单胞菌（铜绿假单胞菌（P.aeruginosa)2024/8/23 周五褚云卓23l标本直接检查标本直接检查 涂片染色镜检：抗酸染色和荧光染色涂片染色镜检：抗酸染色和荧光染色 核酸检测核酸检测 ：MTDMTD试验试验 AMPLICOR MTBAMPLICOR MTB方法方法 l分离培养分离培养 ：体培养法和液体培养法：体培养法和液体培养法 2 2、细菌感染、细菌感染 结核分枝杆菌结核分枝杆菌 2024/8/23 周五褚云卓24l鸟分枝杆菌鸟分枝杆菌 菌体呈杆状，有时亦呈球杆状或丝状。卵黄培菌体呈杆状，有时亦呈球杆状或丝状。卵黄培养基表现为淡黄色，在油酸卵蛋白琼脂培养基上菌养基表现为淡黄色，在油酸卵蛋白琼脂培养基上菌落呈光滑无色素透明样的菌落，菌落中心较厚。落呈光滑无色素透明样的菌落，菌落中心较厚。鸟型分枝杆菌特异性抗原检测，或用频率脉冲鸟型分枝杆菌特异性抗原检测，或用频率脉冲电子捕获气液色谱法检测细菌中的电子捕获气液色谱法检测细菌中的“结核硬脂酸结核硬脂酸”，或用特异性，或用特异性RNARNA或或DNADNA探针进行杂交试验，或用探针进行杂交试验，或用PCRPCR等方法鉴定标本中的鸟型分枝杆菌。等方法鉴定标本中的鸟型分枝杆菌。2 2、细菌感染、细菌感染 非非结核分枝杆菌结核分枝杆菌 2024/8/23 周五褚云卓25l龟分枝杆菌龟分枝杆菌 菌体呈多态性，可表现为细而长或短而粗的菌体呈多态性，可表现为细而长或短而粗的菌体，幼龄菌呈强酸性，陈旧培养物可渐渐失去抗菌体，幼龄菌呈强酸性，陈旧培养物可渐渐失去抗酸性。此菌为快速生长菌，培养要求不高，在血琼酸性。此菌为快速生长菌，培养要求不高，在血琼脂培养基及麦康凯培养基上均生长良好，通常脂培养基及麦康凯培养基上均生长良好，通常1 13 3天即可长出天即可长出1 12mm2mm直径的菌落，菌落表面光滑、湿直径的菌落，菌落表面光滑、湿润、有光泽、乳白色或淡黄色。润、有光泽、乳白色或淡黄色。2 2、细菌感染、细菌感染 非非结核分枝杆菌结核分枝杆菌 2024/8/23 周五褚云卓26l偶发分枝杆菌偶发分枝杆菌 菌体呈棒状、球状或细丝状，偶尔菌体亦可呈念珠状或表现菌体呈棒状、球状或细丝状，偶尔菌体亦可呈念珠状或表现为膨胀的菌体。在液体培养基中菌体分叉状。此菌为快速生长型为膨胀的菌体。在液体培养基中菌体分叉状。此菌为快速生长型菌，菌，5 5天即可长出肉眼可见的菌落，菌落呈平滑、柔软、奶油状，天即可长出肉眼可见的菌落，菌落呈平滑、柔软、奶油状，菌落亦可呈半球状、蜡样分裂叶状，亦常出现暗淡、粗糙、中心菌落亦可呈半球状、蜡样分裂叶状，亦常出现暗淡、粗糙、中心呈堆叠的菌落。在孔雀绿培养基上菌落可呈绿色，在玉米粉琼脂呈堆叠的菌落。在孔雀绿培养基上菌落可呈绿色，在玉米粉琼脂培养基上，菌落粗糙呈致密索状。光滑型菌落其周围有宽阔的网培养基上，菌落粗糙呈致密索状。光滑型菌落其周围有宽阔的网状物。状物。2 2、细菌感染、细菌感染 非非结核分枝杆菌结核分枝杆菌 2024/8/23 周五褚云卓27真菌感染真菌感染 卡氏肺孢子虫感染卡氏肺孢子虫感染 l病原学检查病原学检查 可从患者的痰液、支气管肺泡灌洗液或肺活检组织中查可从患者的痰液、支气管肺泡灌洗液或肺活检组织中查到卡氏肺孢子虫。常用的染色方法有：六亚甲基四胺银到卡氏肺孢子虫。常用的染色方法有：六亚甲基四胺银（GMSGMS）染色：包囊壁被染成褐色，囊壁可见特征性括弧样）染色：包囊壁被染成褐色，囊壁可见特征性括弧样结构；亚甲胺蓝（结构；亚甲胺蓝（TBOTBO）染色：包囊壁呈深紫色，无特征性）染色：包囊壁呈深紫色，无特征性括弧样结构；荧光染色法：包囊呈现明亮蓝绿色光环，包括弧样结构；荧光染色法：包囊呈现明亮蓝绿色光环，包囊括弧样结构清晰可见。囊括弧样结构清晰可见。2024/8/23 周五褚云卓28l特异性特异性DNADNA检测检测 用原位杂交技术和用原位杂交技术和PCRPCR方法检测血液、痰、方法检测血液、痰、支气管肺泡灌洗液及肺活检组织中的卡氏肺支气管肺泡灌洗液及肺活检组织中的卡氏肺孢子虫孢子虫DNADNA敏感性高，特异性好，敏感性高，特异性好，PCRPCR可检出可检出1010个拷贝的靶个拷贝的靶DNADNA。真菌感染真菌感染 卡氏肺孢子虫感染卡氏肺孢子虫感染 2024/8/23 周五褚云卓29l直接涂片镜检：将标本悬于生理盐水或直接涂片镜检：将标本悬于生理盐水或10%10%20%20%的的氢氧化钾中，镜下可见卵圆形芽胞及假菌丝，革兰氢氧化钾中，镜下可见卵圆形芽胞及假菌丝，革兰染色芽胞及假菌丝呈蓝色。染色芽胞及假菌丝呈蓝色。l分离培养：将标本接种于沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂及分离培养：将标本接种于沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂及显色培养基，显色培养基，30303737培养培养24244848小时，在沙氏培小时，在沙氏培养基上出现乳白色、光滑、中等大小的菌落，在显养基上出现乳白色、光滑、中等大小的菌落，在显色培养基上菌落为绿色，即可确定为白假丝酵母。色培养基上菌落为绿色，即可确定为白假丝酵母。真菌感染真菌感染 白假丝酵母白假丝酵母感染感染 2024/8/23 周五褚云卓30l墨墨汁汁染染色色或或刚刚果果红红水水溶溶液液染染色色:新新型型隐隐球球菌菌呈呈圆圆形形或或椭椭圆圆形形的的厚厚壁壁孢孢子子或或芽芽生生孢孢子子，外外有有一一层层宽宽厚厚荚荚膜，边缘清楚整齐，有时可见单个出芽的细胞。膜，边缘清楚整齐，有时可见单个出芽的细胞。l胶胶乳乳凝凝集集试试验验:即即新新型型隐隐球球菌菌乳乳胶胶凝凝集集试试验验，检检测测病病人人CSFCSF或或血血清清中中新新型型隐隐球球菌菌荚荚膜膜多多糖糖抗抗原原，其其特特异异性性和和敏敏感感性性均均较较高高，可可简简便便快快速速有有效效诊诊断断隐隐球球菌菌性脑膜炎。性脑膜炎。l分离培养分离培养:采用自动微生物系统和采用自动微生物系统和APIAPI鉴定。鉴定。真菌感染真菌感染 新型隐球菌新型隐球菌感染感染 2024/8/23 周五褚云卓312024/8/23 周五褚云卓322024/8/23 周五褚云卓33l痰痰涂涂片片的的直直接接镜镜检检:可可见见到到大大量量的的分分隔隔菌菌丝丝，而而对对疑疑为为侵侵袭袭性曲霉病患者，推荐支气管灌洗液标本检查性曲霉病患者，推荐支气管灌洗液标本检查.l分分离离培培养养:可可见见白白色色丝丝形形菌菌落落，随随着着孢孢子子产产生生而而转转变变为为绿绿色色或或暗暗绿绿色色。产产生生的的孢孢子子柄柄可可长长达达500m500m以以上上，柄柄的的顶顶端端为为穹穹形形包包囊囊，囊囊表表面面有有长长串串孢孢子子攀攀丝丝。膨膨大大的的典典型型分分生生孢孢子子柄和攀丝是曲霉菌的特点。柄和攀丝是曲霉菌的特点。真菌感染真菌感染 曲霉曲霉菌菌感染感染 2024/8/23 周五褚云卓342024/8/23 周五褚云卓352024/8/23 周五褚云卓362024/8/23 周五褚云卓372024/8/23 周五褚云卓382024/8/23 周五褚云卓392024/8/23 周五褚云卓40l直接涂片瑞氏染色直接涂片瑞氏染色:可见到典型圆形或卵形有明显可见到典型圆形或卵形有明显横隔的细胞，常在巨噬细胞内。横隔的细胞，常在巨噬细胞内。l分离培养：分离培养：马尔尼菲青霉为双相真菌，马尔尼菲青霉为双相真菌，2525培养呈培养呈青霉相，青霉相，3737呈酵母相，无红色色素产生。呈酵母相，无红色色素产生。l组织病理学检查：组织病理学检查：在单核巨噬细胞系统之外的组织在单核巨噬细胞系统之外的组织中常引起化脓性反应；在单核巨噬细胞系统器官为中常引起化脓性反应；在单核巨噬细胞系统器官为肉芽肿性反应；在巨噬细胞内外有酵母样菌体，呈肉芽肿性反应；在巨噬细胞内外有酵母样菌体，呈圆形、椭圆形或腊肠形，有横隔。圆形、椭圆形或腊肠形，有横隔。真菌感染真菌感染 马尔尼菲青霉感染马尔尼菲青霉感染 2024/8/23 周五褚云卓41l外外周周血血涂涂片片瑞瑞氏氏、姬姬姆姆萨萨或或过过碘碘酸酸染染色色：为为小小的的卵卵圆圆形形出出芽芽细细胞胞（常常群群聚聚于于巨巨噬噬细细胞胞内内），如如临临床床标标本中可见大的厚壁细胞。本中可见大的厚壁细胞。l分分离离培培养养：荚荚膜膜组组织织胞胞浆浆菌菌属属于于双双相相真真菌菌，2525沙沙堡堡弱弱培培养养基基（SDASDA）为为霉霉菌菌相相，血血琼琼脂脂3737培培养养可可转转为为酵酵母母相相，大大约约有有30%30%的的菌菌株株在在25SDA25SDA培培养养可可见见特特征征性性的的大大分分生生孢孢子子，直直径径8 814m14m，表表面面有有指指状状突突起起，还还有有的的菌菌株株产产生生椭椭圆圆形形小小分分生生孢孢子子，直直径径2 24m4m，从从菌菌丝丝生生出出锐锐角角的的小小梗梗上上，有有时时可可以以出出芽芽似哑铃状。似哑铃状。真菌感染真菌感染 荚膜组织胞浆荚膜组织胞浆菌菌感染感染 2024/8/23 周五褚云卓42荚膜组织胞浆菌，荚膜组织胞浆菌，25培养培养2024/8/23 周五褚云卓43荚膜组织胞浆菌（荚膜组织胞浆菌（X400）2024/8/23 周五褚云卓44荚膜组织胞浆菌（荚膜组织胞浆菌（X1000）2024/8/23 周五褚云卓45荚膜组织胞浆菌（荚膜组织胞浆菌（X1000）2024/8/23 周五褚云卓46l直接涂片：可见特征性的圆形、厚壁（直接涂片：可见特征性的圆形、厚壁（2m 2m）的球）的球形体，直径形体，直径101080m 80m。不出芽，内含内孢子，直。不出芽，内含内孢子，直径径2 25m 5m。球壁破裂，则有内生孢子游离在外。球壁破裂，则有内生孢子游离在外。每个内孢子可延长为关节菌丝，关节菌丝裂为关节每个内孢子可延长为关节菌丝，关节菌丝裂为关节孢子，后者发展为小球体。在肺空洞病例，痰标本孢子，后者发展为小球体。在肺空洞病例，痰标本可见菌丝及小球体。可见菌丝及小球体。真菌感染真菌感染 球孢子球孢子菌菌感染感染 2024/8/23 周五褚云卓47l分离培养：因该菌易于播散，吸入肺中，有高度的传分离培养：因该菌易于播散，吸入肺中，有高度的传染性，培养操作应该在有专门条件的实验室进行。经染性，培养操作应该在有专门条件的实验室进行。经25253030培养培养2 27 7天即可获得可鉴定的菌丝型菌落，天即可获得可鉴定的菌丝型菌落，呈白色绒毛状菌落，以后变灰白色，中央有丛状菌丝，呈白色绒毛状菌落，以后变灰白色，中央有丛状菌丝，经经37374040特殊的转换培养基可产生球形体。特殊的转换培养基可产生球形体。l组织病理检查：发现原发性皮肤球孢子菌病组织学改组织病理检查：发现原发性皮肤球孢子菌病组织学改变主要为慢性肉芽肿，播散性皮肤球孢子菌病主要表变主要为慢性肉芽肿，播散性皮肤球孢子菌病主要表现为化脓性肉芽肿，极少数情况可见到菌丝成分。现为化脓性肉芽肿，极少数情况可见到菌丝成分。真菌感染真菌感染 球孢子球孢子菌菌感染感染 2024/8/23 周五褚云卓48l病原学检查：病原学检查：可见弓形虫滋养体和假囊，滋养可见弓形虫滋养体和假囊，滋养体较小，常位于细胞核内。体较小，常位于细胞核内。l免疫学检查：免疫学检查：循环抗原（循环抗原（CagCag）的检测）的检测 血清抗体的检测血清抗体的检测lPCRPCR检测弓形虫检测弓形虫DNADNA原虫感染原虫感染 弓形弓形虫虫感染感染 2024/8/23 周五褚云卓49l通常用硫酸锌或蔗糖悬浮沉淀法浓缩病人粪便，经通常用硫酸锌或蔗糖悬浮沉淀法浓缩病人粪便，经KinyoumKinyoum抗酸染色法或碘液染色后，在相差显微镜抗酸染色法或碘液染色后，在相差显微镜下可观察到浅粉红色或深红色、直径约下可观察到浅粉红色或深红色、直径约2 26m6m大大小的隐孢子虫卵囊。也可采取病人肠粘膜活检标本，小的隐孢子虫卵囊。也可采取病人肠粘膜活检标本，经姬姆萨染色后，从组织标本中的微绒毛层中检出经姬姆萨染色后，从组织标本中的微绒毛层中检出1 14m4m的隐孢子虫滋养体。的隐孢子虫滋养体。原虫感染原虫感染 隐孢子虫感染隐孢子虫感染 2024/8/23 周五褚云卓50讲授内容讲授内容一、机会性感染病原学检查一、机会性感染病原学检查二、性病实验室检查检查二、性病实验室检查检查2024/8/23 周五褚云卓51二、性病实验室检查检查二、性病实验室检查检查1 1、梅毒、梅毒2 2、淋病、淋病3 3、非淋菌性尿道炎、非淋菌性尿道炎4 4、尖锐湿尤、尖锐湿尤2024/8/23 周五褚云卓52梅毒概况梅毒概况 梅毒是最常见的一种性病，在梅毒是最常见的一种性病，在梅毒是最常见的一种性病，在梅毒是最常见的一种性病，在20202020世纪之前与淋病、世纪之前与淋病、世纪之前与淋病、世纪之前与淋病、软下疳、性病淋巴肉芽肿、腹股沟肉芽肿合称为经软下疳、性病淋巴肉芽肿、腹股沟肉芽肿合称为经软下疳、性病淋巴肉芽肿、腹股沟肉芽肿合称为经软下疳、性病淋巴肉芽肿、腹股沟肉芽肿合称为经典性病。典性病。典性病。典性病。梅毒起源于欧洲，十六世纪初传入我国。长期以来，梅毒起源于欧洲，十六世纪初传入我国。长期以来，梅毒起源于欧洲，十六世纪初传入我国。长期以来，梅毒起源于欧洲，十六世纪初传入我国。长期以来，人们无法区分淋病与梅毒，直到人们无法区分淋病与梅毒，直到人们无法区分淋病与梅毒，直到人们无法区分淋病与梅毒，直到1905190519051905年年年年SchandimSchandimSchandimSchandim和和和和HoffmanHoffmanHoffmanHoffman发现了梅毒的病原体梅毒螺旋体发现了梅毒的病原体梅毒螺旋体发现了梅毒的病原体梅毒螺旋体发现了梅毒的病原体梅毒螺旋体（Treponema PallidumTreponema PallidumTreponema PallidumTreponema Pallidum，TPTPTPTP）。）。）。）。2024/8/23 周五褚云卓53梅毒的临床分期梅毒的临床分期 梅毒螺旋体通过粘膜或有破损的皮肤进入人梅毒螺旋体通过粘膜或有破损的皮肤进入人体后，经淋巴系统及血液循环播散到全身，几体后，经淋巴系统及血液循环播散到全身，几乎可以侵犯全身各脏器和组织。临床表现多种乎可以侵犯全身各脏器和组织。临床表现多种多样，且时显时隐，病程较长。多样，且时显时隐，病程较长。梅毒的病程分三期梅毒的病程分三期2024/8/23 周五褚云卓54l一期梅毒一期梅毒:主要表现为生殖器形成硬下疳主要表现为生殖器形成硬下疳,即使未即使未经治疗也可自然愈合，梅毒螺旋体进入血液而潜伏经治疗也可自然愈合，梅毒螺旋体进入血液而潜伏于体内，约经于体内，约经2 23 3月隐伏期后进入第二期。月隐伏期后进入第二期。l二期梅毒：主要表现为全身皮肤黏膜出现梅毒疹，二期梅毒：主要表现为全身皮肤黏膜出现梅毒疹，即使不加治疗症状也常在即使不加治疗症状也常在3 3个月以内消退。个月以内消退。一、二期梅毒并称为早期梅毒。一、二期梅毒并称为早期梅毒。梅毒的临床分期梅毒的临床分期2024/8/23 周五褚云卓55l三期梅毒：二期梅毒未经正规治疗，经三期梅毒：二期梅毒未经正规治疗，经5 5年或更久年或更久有有50%50%左右病人会发展为三期梅毒，此时病变可累左右病人会发展为三期梅毒，此时病变可累及全身各器官、组织，常见的有神经系统、心血管及全身各器官、组织，常见的有神经系统、心血管系统等，严重的可导致死亡。系统等，严重的可导致死亡。l此外，隐性梅毒患者虽没有临床症状，但却是重要此外，隐性梅毒患者虽没有临床症状，但却是重要的传染源。胎传梅毒（先天梅毒）则可引起胎儿全的传染源。胎传梅毒（先天梅毒）则可引起胎儿全身感染，并在出生后（身感染，并在出生后（7 71010岁）出现皮肤梅毒、岁）出现皮肤梅毒、骨髓炎、楔状齿等。骨髓炎、楔状齿等。梅毒的临床分期梅毒的临床分期2024/8/23 周五褚云卓56梅毒的传播途径梅毒的传播途径 梅毒主要通过性交传播，也可通过胎盘传染下一代，梅毒主要通过性交传播，也可通过胎盘传染下一代，梅毒主要通过性交传播，也可通过胎盘传染下一代，梅毒主要通过性交传播，也可通过胎盘传染下一代，极少数患者通过其他途径传染。极少数患者通过其他途径传染。极少数患者通过其他途径传染。极少数患者通过其他途径传染。l性接触：未经治疗的病人，在感染后的第一年内最具性接触：未经治疗的病人，在感染后的第一年内最具性接触：未经治疗的病人，在感染后的第一年内最具性接触：未经治疗的病人，在感染后的第一年内最具有传染性，这些病人的皮肤、黏膜损害表面有大量梅有传染性，这些病人的皮肤、黏膜损害表面有大量梅有传染性，这些病人的皮肤、黏膜损害表面有大量梅有传染性，这些病人的皮肤、黏膜损害表面有大量梅毒螺旋体。因此，凡和这些病人有接触（包括同性恋）毒螺旋体。因此，凡和这些病人有接触（包括同性恋）毒螺旋体。因此，凡和这些病人有接触（包括同性恋）毒螺旋体。因此，凡和这些病人有接触（包括同性恋），皮肤和黏膜接触到病人损害处，都可传染上梅毒。，皮肤和黏膜接触到病人损害处，都可传染上梅毒。，皮肤和黏膜接触到病人损害处，都可传染上梅毒。，皮肤和黏膜接触到病人损害处，都可传染上梅毒。随着病期的延长，梅毒的传染性逐渐减少，到感染随着病期的延长，梅毒的传染性逐渐减少，到感染随着病期的延长，梅毒的传染性逐渐减少，到感染随着病期的延长，梅毒的传染性逐渐减少，到感染4 4 4 4年年年年后，通过性接触几乎无传染性。后，通过性接触几乎无传染性。后，通过性接触几乎无传染性。后，通过性接触几乎无传染性。2024/8/23 周五褚云卓57l胎传：梅毒孕妇血中的梅毒螺旋体，可通过胎传：梅毒孕妇血中的梅毒螺旋体，可通过胎盘及脐带血传到胎儿体内，胎儿一般于胎盘及脐带血传到胎儿体内，胎儿一般于6 6个月后才对螺旋体的感染发生反应。未经治个月后才对螺旋体的感染发生反应。未经治疗的晚期（病程超过疗的晚期（病程超过4 4年）梅毒妇女，虽然年）梅毒妇女，虽然经过性接触已无传染性，但怀孕后仍可传染经过性接触已无传染性，但怀孕后仍可传染胎儿，但传染性比早期梅毒低。病期越长，胎儿，但传染性比早期梅毒低。病期越长，传染性越小。传染性越小。梅毒的传播途径梅毒的传播途径2024/8/23 周五褚云卓58l l其他途径：极少数患者经性接触以外的途径其他途径：极少数患者经性接触以外的途径感染。直接接触的有接吻、哺乳、输血以及感染。直接接触的有接吻、哺乳、输血以及新生儿经过产道而感染等。间接接触的有接新生儿经过产道而感染等。间接接触的有接触病人的日常用品，如剃刀、餐具、烟嘴、触病人的日常用品，如剃刀、餐具、烟嘴、坐式便器、医疗器械等。医务人员在接触梅坐式便器、医疗器械等。医务人员在接触梅毒螺旋体的标本时不小心也可以感染毒螺旋体的标本时不小心也可以感染梅毒的传播途径梅毒的传播途径2024/8/23 周五褚云卓59 梅毒在全球的流行状况梅毒在全球的流行状况l19001900年世界卫生组织把梅毒列为世界上最流行的年世界卫生组织把梅毒列为世界上最流行的5050种疾病之一。梅毒的发病率在性传播疾病中列第种疾病之一。梅毒的发病率在性传播疾病中列第4 4位。位。估计全世界每年约有估计全世界每年约有300300万新发病例。万新发病例。l9090年代末，世界上每天有年代末，世界上每天有100100万万人感染性病，每年产人感染性病，每年产生淋病病人生淋病病人62006200万，梅毒万，梅毒病人病人12001200万万，其它性传病，其它性传病原体感染病人原体感染病人1.51.5个亿，发展中国家是性病和梅毒的个亿，发展中国家是性病和梅毒的重灾区重灾区 。2024/8/23 周五褚云卓60l梅毒从梅毒从1616世纪初由印度传入我国广东，至今已流行世纪初由印度传入我国广东，至今已流行400400余年，解放前梅毒的发病率为所有性病之首。余年，解放前梅毒的发病率为所有性病之首。2020世纪世纪6060年代初期，我国基本消灭了梅毒。年代初期，我国基本消灭了梅毒。l改革开放后，梅毒再次从国外传入我国。近年来，改革开放后，梅毒再次从国外传入我国。近年来，梅毒增长幅度明显加快。自梅毒增长幅度明显加快。自19791979年再次报告梅毒后，年再次报告梅毒后，报病数逐年增多，特别是报病数逐年增多，特别是19931993年后，全国许多地区年后，全国许多地区梅毒呈现大幅上升，至梅毒呈现大幅上升，至19991999年全国梅毒报病数为年全国梅毒报病数为8040680406例，是例，是19931993年的年的4040倍倍。梅毒在国内的流行状况（一）梅毒在国内的流行状况（一）2024/8/23 周五褚云卓61l1979-19871979-1987年全国梅毒报告病例不超过年全国梅毒报告病例不超过10001000例；例；1988-19921988-1992年间每年报病数不超过年间每年报病数不超过20002000例（例（19901990年除外）；年除外）；1993-19991993-1999年则成倍增年则成倍增长，年均增长长，年均增长85%85%。有的地区梅毒发病率超。有的地区梅毒发病率超过过150/10150/10万万，足见其严重性。，足见其严