淋巴细胞发育进展张毓.pptx

淋巴细胞发育研究进展淋巴细胞发育研究进展北京大学医学部免疫学系北京大学医学部免疫学系张毓张毓TSCCD4 RTEDNPre-TCRDPTCRCD4CD8TCRTCRCD8CD4 SPTCRCD4CD4b b-selectionPositiveselectionNegative selectionFunctional maturationTCR-b b rearrangementTCR-a a rearrangementTCRCD8CD8 SPCD8 RTEDevelopment of ThymocytesDoublenegativeDoublepositiveSinglepositive胸腺胸腺T细胞发育过程及主要事件细胞发育过程及主要事件Origin of Thymic Seeding CellsCLP：Lin-Sca-1+c-kit+IL-7R+TSC来源于来源于CLP吗？吗？Notch Signal and T-lineage Commitment受体受体:Notch 1-4；胸腺细胞表达；胸腺细胞表达Notch1-3；全部效应由；全部效应由Notch 1介导介导 配体：配体：Dll1，3，4，Jagged 1，2；胸腺上皮细胞表达全部配体；胸腺上皮细胞表达全部配体；Dll4 可能为生理性配体可能为生理性配体信号转导：信号转导：ADAM蛋白酶活性水解蛋白酶活性水解Notch胞外区，胞外区，presenilin依赖的依赖的g g分分 泌酶进一步切割释出胞内区（泌酶进一步切割释出胞内区（Notch-IC）；）；Notch-IC入入 核，与核，与CSL（或（或RBPJ）结合，并招募共激活分子）结合，并招募共激活分子MamL，发挥转录调控作用发挥转录调控作用 T系定向：系定向：始于始于DN1，完成于，完成于DN3；绝对依赖；绝对依赖Notch1信号信号Lineage Specification:abab vs gd gd T Cell始于始于DN2，完成于，完成于DN3gdgd选择：类似选择：类似b b选择，上调选择，上调CD27，CD5，但不上调，但不上调CD4，CD8TCR类型对分化方向的影响：类型对分化方向的影响：RAG-deficient DN3转染转染TCRgdgd或或TCRb b本质可能为信号强度差别：配体依赖或张力性信号本质可能为信号强度差别：配体依赖或张力性信号Sox13对分化方向的影响：对分化方向的影响：基因缺陷导致基因缺陷导致gdgdT细胞发育障碍；过表达影响细胞发育障碍；过表达影响ababT细胞向细胞向DP阶阶段发育段发育Migration of Developing Thymocytes胸腺定植：胸腺定植：CCL25-CCR9皮质区向外：皮质区向外：SDF1-CXCR4CCL25-CCR9皮质区向内：皮质区向内：CCL25-CCR9？皮质到髓质皮质到髓质CCL19/CCL21-CCR7迁出胸腺迁出胸腺S1P-S1P1细胞增殖：细胞增殖：DN1 10次次DN2 4次次Pre-DP 8次次Aire and Negative selection自身免疫性多内分泌腺病自身免疫性多内分泌腺病-念珠菌病念珠菌病-外胚层营养不良外胚层营养不良 APECED慢性皮肤粘膜白色念珠菌病慢性皮肤粘膜白色念珠菌病甲状旁腺功能减退甲状旁腺功能减退肾上腺功能不全肾上腺功能不全Autoimmune Regulator(Aire)Aire缺陷与自身免疫缺陷与自身免疫Aire驱动驱动TSA在髓质区胸腺在髓质区胸腺上皮细胞中表达上皮细胞中表达OVA-specific TCR/insulin promoter-driven OVA双转双转基因鼠模型基因鼠模型Aire作用机制作用机制调控调控TSA表达表达促进促进mTEC凋亡凋亡并非所有并非所有TSA的胸腺表达都受的胸腺表达都受Aire调控，如调控，如C反应蛋白、谷氨酸脱羧酶反应蛋白、谷氨酸脱羧酶67等。等。a a胞衬蛋白、二硫化物异构酶胞衬蛋白、二硫化物异构酶A2等的表达并不依赖于等的表达并不依赖于Aire，但，但Aire缺陷鼠依然缺陷鼠依然表现出针对这些抗原的自身免疫应答。表现出针对这些抗原的自身免疫应答。Aire影响影响mTEC抗原加工提呈抗原加工提呈Aire参与参与SP T细胞发育调控细胞发育调控Aire参与外周免疫耐受诱导参与外周免疫耐受诱导CD45-gp38-MHC II+EpCAM+细胞诱导细胞诱导T细胞凋亡细胞凋亡 Aire的其它功能？的其它功能？胸腺器官生成胸腺器官生成cTEC和和mTEC来自共同前体来自共同前体 K5-K8+cTECK5-K8+K5+K8+K5+K8-mTECmTEC发育发育B淋巴细胞发育淋巴细胞发育CLPPre-pro-BPro-BPre-BSelf-Reactive BImmatureBMatureBT2T1Lin-c-kit+IL-7R+B220+CD19+CD43+CD43-Pre-BCR+IgM+IgD-IgMhiIgD-CD21-CD23-B220+CD19-IgMloIgDhiCD21intCD23+IgMhiIgD+CD21+CD23+apoptosisE2A EBF1 Pax5ReceptoreditingDH to JHVH to DHJHVL to JLIg gene rearrangementsPlasmacellCD19loCD138+Pax5 Bcl-6Blimp-1 Xbp-1E2A:调控多种调控多种B系基因表达，缺陷导致系基因表达，缺陷导致B细胞发育阻滞于细胞发育阻滞于CLP阶段阶段EBF1：E2A的主要靶基因，同时受的主要靶基因，同时受IL-7/Stat5信号调控信号调控Pax5：激活激活B系基因，如系基因，如CD19、Ig-a a，同时抑制非，同时抑制非B系基因，如系基因，如Notch1。对诱导和维持。对诱导和维持B系定向至关重要系定向至关重要B细胞定向分化的转录调控细胞定向分化的转录调控E2APax5EBFIdIL-7/Stat5滤泡滤泡B细胞和边缘带细胞和边缘带B细胞分化细胞分化FO：IgM+IgDhiCD23+CD21intMZ：IgMhiIgD+CD23-CD21hiBCR信号强度：信号强度：Aiolos，负调控，负调控，FO增加增加CD21，正调控，正调控，MZ增加增加Notch2信号：信号：MZ B细胞缺失细胞缺失BAFF：T2，FO B细胞缺失细胞缺失阴性选择中的一些问题阴性选择中的一些问题Anergy的相对贡献？的相对贡献？受体编辑：受体编辑：25%非转基因非转基因B细胞细胞 仅发生在骨髓仅发生在骨髓如何避免有益如何避免有益BCR被清除？被清除？未成熟未成熟B与成熟与成熟B细胞对细胞对BCR交联反应性差异交联反应性差异BCR刺激后，未成熟刺激后，未成熟B细胞中细胞中PIP2水解和水解和PKCb b活化不充分活化不充分PKCb b持续活化令未成熟持续活化令未成熟B细胞获得凋亡抗性细胞获得凋亡抗性PKCb b功能阻断使成熟功能阻断使成熟B细胞对凋亡高度敏感细胞对凋亡高度敏感c-Rel缺陷鼠来源缺陷鼠来源B细胞受细胞受BCR刺激后出现凋亡刺激后出现凋亡CD40信号挽救信号挽救B细胞凋亡细胞凋亡c-Myc过表达赋予未成熟过表达赋予未成熟B细胞凋亡抗性细胞凋亡抗性c-Myc过表达干扰转基因鼠过表达干扰转基因鼠B细胞阴性选择细胞阴性选择未成熟未成熟B细胞中，细胞中，BCR受抗原刺激后不能定位于脂筏。鉴于受抗原刺激后不能定位于脂筏。鉴于PIP2主要位于脂筏，主要位于脂筏，BCR定定位缺陷可能直接影响位缺陷可能直接影响PIP2水解。水解。BCR定位缺陷可能与胞膜中胆固醇含量低有关。定位缺陷可能与胞膜中胆固醇含量低有关。谢谢谢谢