细胞生物实验技术和细胞的物质基础.pptx

教材教材:医学生物实验学（自编）医学生物实验学（自编）参考书参考书:医学生物学，杨抚华，四川科学技术出版社,第五版医学生物学,傅松滨,人民卫生出版社,第六版教材内容学习方法1.预习-听课-复习 2.归纳总结，记笔记，理解性记忆第一章细胞生物学实验技术一、显微镜技术显微镜与分辨率分辨率，即极限分辨率，也即两点间的最小距离R人眼=0.07mm R光镜=0.2um R电镜=0.2nm光学显微镜技术普通光学显微镜荧光显微镜相差显微镜激光扫描共焦显微镜普通光学显微镜HE染色：苏木精染核蓝；伊红染质红荧光显微镜常用荧光染料：吖啶橙：DNA-绿色；RNA-红色DAPI：DNA兰色碘化丙啶（PI）：DNA红色异硫氰酸（FITC）：黄绿色罗丹明：红色相差显微镜物镜里增加相板，聚光镜上增加环形光阑，相位差转变为振幅差。相差光圈（位于聚光镜上）应与不同放大倍数的物镜匹配phLX4ph1phCX20X10ph2X40BF（明视野）激光扫描共焦显微镜在荧光显微镜的基础上加上激光扫描装置，以单色激光为光源，使样品被激发出荧光，通过计算机图像处理，从而得到微细结构的荧光图像电子显微镜技术透射电镜扫描电镜分析电镜超高压电镜电子枪发射电子作为电镜的照明光源样品：超薄切片、冷冻制样、负染色、真空渡膜、冷冻蚀刻电子显微镜扫描电镜第二章第二章细胞的物质基础细胞的物质基础1原原生生质质（protoplasm）:细细胞胞中中的的生生命命物物质质，由由细细胞胞质质（包包括括质质膜膜）和和细细胞胞核核组组成。成。2元素组成元素组成主要元素：主要元素：C.H.O.N4种种少量元素：少量元素：S.P.Na.K.Ca.CL.Mg.Fe8种种微量元素：微量元素：Cu.Zn.Mn.Co.I.Br.F.Si.Sr.Ba10种种化化合合物物有机化合物有机化合物无机化合物无机化合物水水无机盐无机盐自由水自由水：细胞生命活动的内环境：细胞生命活动的内环境 细胞各种代谢反应的场所细胞各种代谢反应的场所：维持渗透压和：维持渗透压和pH，保障细，保障细胞正常生理活动胞正常生理活动糖糖 类类脂脂 类类蛋白质蛋白质核核 酸酸维生素维生素分子量巨大、结构复杂、具有分子量巨大、结构复杂、具有生物活性生物活性生物大分子生物大分子（biological macromolecules）结合水结合水：与许多分子结合构成细：与许多分子结合构成细胞结构的组成部分胞结构的组成部分一、小分子物质一、小分子物质（一）水（一）水（二）无机盐和离子（二）无机盐和离子（三）有机小分子（三）有机小分子二、二、生物大分子生物大分子（一）蛋白质（一）蛋白质1.蛋白质的结构蛋白质的结构（1）氨基酸（）氨基酸（aminoacid）（2）多肽链（）多肽链（polypeptidechain）肽键：肽键：氨基酸残基：氨基酸残基：主链和侧链：主链和侧链：主链：指各主链：指各碳原子间以肽键相接的长链。碳原子间以肽键相接的长链。侧链：指与各氨基酸残基相连的侧链：指与各氨基酸残基相连的R基团。基团。（3）蛋白质的分子结构）蛋白质的分子结构一级结构：氨基酸排列顺序一级结构：氨基酸排列顺序二级结构：二级结构：三三种种：a螺螺旋旋结结构构（右右手手螺螺旋旋），折折叠叠片片层层，三股螺旋。三股螺旋。三级结构：三级结构：四级结构：四级结构：返回请等候动画.返回请等候动画.2.蛋白质的类型蛋白质的类型按蛋白质分子组成按蛋白质分子组成单纯蛋白质：单纯蛋白质：分子组成除氨基酸没有别的组分。分子组成除氨基酸没有别的组分。如：清蛋白、组蛋白等如：清蛋白、组蛋白等结合蛋白质：结合蛋白质：由蛋白质和其它化合物结合而成。由蛋白质和其它化合物结合而成。如：糖蛋白、核蛋白、脂蛋白、色蛋白、如：糖蛋白、核蛋白、脂蛋白、色蛋白、磷蛋白磷蛋白按分子形状按分子形状球状蛋白质：球状蛋白质：分子呈球状或椭球状，分子呈球状或椭球状，多数蛋白为球状蛋白。如：酶蛋多数蛋白为球状蛋白。如：酶蛋白、激素蛋白、抗体蛋白等白、激素蛋白、抗体蛋白等纤维状蛋白：纤维状蛋白：分子呈长纤维状。多属分子呈长纤维状。多属结构蛋白，起支持作用。如：角结构蛋白，起支持作用。如：角蛋白、胶原蛋白等蛋白、胶原蛋白等3.蛋白质在生命活动中的作用蛋白质在生命活动中的作用（1）结构和支持作用：）结构和支持作用：（2）催化作用：）催化作用：（3）传递和运输作用：）传递和运输作用：（4）运动功能：）运动功能：（5）防御作用：）防御作用：（6）调节作用：）调节作用：（二）核酸：（二）核酸：1.核核 酸酸 的的 化化 学学 组组 成成：由由 核核 苷苷 酸酸（nucleotide）组成。）组成。3,5-磷酸二酯键磷酸二酯键2.2.核酸的种类核酸的种类3.DNA分子的结构与功能分子的结构与功能（1）DNA的的一一级级结结构构：脱脱氧氧核核苷酸的排列顺序。苷酸的排列顺序。（2）DNA的空间结构：基本形式是双螺旋结构。的空间结构：基本形式是双螺旋结构。含含义义：由由两两条条方方向向相相反反的的DNA单单链链互互相相平平行行以以右右手手螺螺旋旋方方向向，沿沿假假想想轴轴缠缠绕绕而而成成的的双双螺螺旋旋结结构构分分子。子。磷磷酸酸和和脱脱氧氧核核糖糖位位于于双双螺螺旋旋的的外外侧侧，形形成成DNA的的骨架，碱基位于双螺旋的内侧。骨架，碱基位于双螺旋的内侧。特征数据：特征数据：3.4nm螺距，螺距，10bp,d=2nmA=T,G=C;G+A=C+T（3）DNA分子的功能分子的功能复复制制（replication）:由由一一个个亲亲代代分分子子形形成成两两个个DNA分分子子的的过过程程，每每个个子子代代分分子子都都与与亲亲代代分分子子完完全相同。全相同。转转录录（transcription）：以以DNA为为模模板板合合成成RAN的过程。的过程。本节课重点本节课重点:各种显微镜的功能区别各种显微镜的功能区别 DNADNA双螺旋结构模型双螺旋结构模型 蛋白质的一、二、三、四级结构蛋白质的一、二、三、四级结构 实验一细胞的化学成分目的要求1.掌握光镜的使用方法。掌握光镜的使用方法。2.掌握生物绘图的方法。掌握生物绘图的方法。3.了解细胞的某些化学成分在细胞内的分了解细胞的某些化学成分在细胞内的分布布4.学习显示细胞内某些化学成分的方法学习显示细胞内某些化学成分的方法1、照明部分、照明部分2、光学部分、光学部分3、机械部分、机械部分生物绘图铅笔线表示细胞结构轮廓点表示明暗程度图全称位于图的正下方放大倍数标于图全称下标注线水平向右引（1040）碳水化合物的观察用刀片切取马铃薯块茎一小片，制作临时装片低倍镜观察-可见薄壁细胞中充满大小不等的卵圆形或圆锥形的颗粒，即淀粉粒高倍镜观察-淀粉粒具层纹结构吸革兰氏碘液1滴于盖片一测-另一侧用吸水纸吸去多余的水分，使碘液很快渗入细胞-上述颗粒遇碘液即变蓝色。核酸的观察甲基绿染液可特异对DNA进行着色。哌洛宁染液可特异对RNA进行着色。取材洋葱鳞叶内表皮1片浸入甲基绿染液染色5min 自来水洗去多余染液 浸入哌洛宁染液染色15min 自来水洗去多余染液制作临时装片镜检观察-细胞核染成蓝绿色，细胞质染成粉红色过氧化氢酶的测定生土豆-加2-3滴2%H2O2-有气泡产生熟土豆-加2-3滴2%H2O2-无气泡产生H2O2H2O+O2过氧化氢酶作业：1.绘甲基绿-哌洛宁染色后的洋葱鳞叶内表皮细胞。