细菌代谢产物的检测及鉴定.pptx

细菌的分类及鉴定细菌的分类及鉴定同济医院检验科同济医院检验科细菌的生物化学试验细菌的生物化学试验原理：由于细菌各自的酶系统不同，新陈代谢的产原理：由于细菌各自的酶系统不同，新陈代谢的产原理：由于细菌各自的酶系统不同，新陈代谢的产原理：由于细菌各自的酶系统不同，新陈代谢的产物也有所不同，而这些产物又各具有不同的生物化物也有所不同，而这些产物又各具有不同的生物化物也有所不同，而这些产物又各具有不同的生物化物也有所不同，而这些产物又各具有不同的生物化学特性。为此，可利用生物化学的方法来鉴别细菌学特性。为此，可利用生物化学的方法来鉴别细菌学特性。为此，可利用生物化学的方法来鉴别细菌学特性。为此，可利用生物化学的方法来鉴别细菌的类别，这种试验称为细菌的生化反应试验的类别，这种试验称为细菌的生化反应试验的类别，这种试验称为细菌的生化反应试验的类别，这种试验称为细菌的生化反应试验常用检查方法常用检查方法碳水化合物代谢试验碳水化合物代谢试验氨基酸和蛋白质代谢试验氨基酸和蛋白质代谢试验碳源利用试验碳源利用试验呼吸酶类试验呼吸酶类试验抑菌试验抑菌试验碳水化合物代谢试验碳水化合物代谢试验糖（醇、苷）类发酵试验糖（醇、苷）类发酵试验原理原理 由于细菌含有发酵不同糖类的酶，故分解糖的能力不同，终末产物亦不一致。应用 鉴定细菌最主要的试验，特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要。氧化一发酵试验氧化一发酵试验(O(OF F试验试验)原理原理 氧化型：仅在有氧环境中分解葡萄糖氧化型：仅在有氧环境中分解葡萄糖 发酵型：在有氧或无氧环境中都能分解发酵型：在有氧或无氧环境中都能分解 葡萄糖葡萄糖 产碱型：在有氧或无氧环境中都不能产碱型：在有氧或无氧环境中都不能 分解葡萄糖分解葡萄糖结果：两支培养基均无变化为产碱型；两支培养基均产酸为发酵型；若不加石蜡的培养基产酸为氧化型。应用：肠杆菌科细菌（发酵型）非发酵菌（产碱型/氧化型）葡萄球菌（发酵型）微球菌（氧化型）-半乳糖苷酶试验半乳糖苷酶试验原理：有的细菌可产生-半乳糖苷酶，能分解邻-硝基酚-D-半乳糖苷(ONPG)，而生成黄色的邻-硝基酚，在很低浓度下也可检出。结果：菌悬液呈现黄色为阳性反应，一般在2030min内显色。应用：迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。本试验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。七叶苷水解试验七叶苷水解试验原理：七叶苷 七叶素 黑色化合物培养基：七叶苷培养基、胆汁七叶苷培养基。细菌细菌枸橼酸铁枸橼酸铁结果：培养基变为黑色为阳性，不变色者为阴性。应用：D群链球菌（+）其它链球菌（-）甲基红试验原理：葡萄糖 丙酮酸 混合酸（pH)醇酮醛（pH)红色反应（+）橘黄色（-）细菌细菌甲基红试剂甲基红试剂培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基。应用：大肠埃希菌（+）产气肠杆菌（-）肠杆菌科中沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属等为阳性，而肠杆菌属则为阴性。V-P试验试验原理：葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 二乙酰 红色化合物（+）培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基 细菌细菌OH-O胍基胍基结果：在数分钟内出现红色为阳性；如无红色出现且于35 4h后仍如故者即为阴性。应用：常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性的细菌，后者通常为阴性。产气肠杆菌（+）大肠埃希菌（-）蛋白质和氨基酸代谢试验蛋白质和氨基酸代谢试验吲哚试验吲哚试验原理原理 色氨酸色氨酸 吲哚吲哚 玫瑰吲哚玫瑰吲哚 （红色红色）应用应用 肠道杆菌的鉴定。肠道杆菌的鉴定。大肠埃希菌（大肠埃希菌（+）沙门菌属（沙门菌属（-）对二甲基氨基苯甲醛对二甲基氨基苯甲醛对二甲基氨基苯甲醛对二甲基氨基苯甲醛硫化氢试验硫化氢试验原理原理 含硫氨基酸含硫氨基酸 硫化氢硫化氢 硫化铅硫化铅/硫化亚铁硫化亚铁 （黑色黑色）应用应用 肠杆菌科菌属间的鉴定。肠杆菌科菌属间的鉴定。细菌细菌细菌细菌醋酸铅醋酸铅醋酸铅醋酸铅/硫酸亚铁硫酸亚铁硫酸亚铁硫酸亚铁尿素（脲）酶试验尿素（脲）酶试验原理：原理：无色无色尿素尿素 氨氨 红色红色应用：应用：肠杆菌科中变形杆菌属的鉴定。肠杆菌科中变形杆菌属的鉴定。细菌细菌苯丙氨酸脱氨酶试验苯丙氨酸脱氨酶试验原理原理 苯丙氨酸苯丙氨酸 苯丙酮酸苯丙酮酸 10%氯化铁氯化铁 绿色化合物绿色化合物应用：应用：肠杆菌科的鉴定肠杆菌科的鉴定 变形杆菌属、摩根菌属、普罗威变形杆菌属、摩根菌属、普罗威 登斯菌属（登斯菌属（+）氨基酸脱羧酶试验氨基酸脱羧酶试验原理：氨基酸原理：氨基酸 特异性脱羧酶特异性脱羧酶 胺胺CO2 指示剂变色指示剂变色应用：肠杆菌科细菌的鉴定。如肺炎克雷应用：肠杆菌科细菌的鉴定。如肺炎克雷伯菌赖氨酸为阳性，鸟氨酸为阴性。伯菌赖氨酸为阳性，鸟氨酸为阴性。明胶液化试验明胶液化试验原理：明胶原理：明胶 明胶酶明胶酶 氨基酸氨基酸 失去凝固力失去凝固力应用：肠杆菌科细菌的鉴定。如沙雷菌、应用：肠杆菌科细菌的鉴定。如沙雷菌、普通变形杆菌、阴沟肠杆菌等。普通变形杆菌、阴沟肠杆菌等。碳源利用试验碳源利用试验枸橼酸盐利用试验枸橼酸盐利用试验原理原理 枸橼酸盐枸橼酸盐 碳酸盐碳酸盐+氨氨（pH)溴麝香草酚蓝 绿色 深蓝色应用：肠杆菌科细菌的鉴定 埃希菌属、志贺菌属、爱德华菌 属（-）呼吸酶类试验呼吸酶类试验细胞色素氧化酶试验细胞色素氧化酶试验原理原理 盐酸二甲基对苯二铵盐酸二甲基对苯二铵 醌类化合物醌类化合物 （深紫色）（深紫色）应用应用 奈瑟菌属、假单胞菌属（奈瑟菌属、假单胞菌属（+）肠杆菌科（肠杆菌科（-）细菌细菌Cyt氧化酶氧化酶过氧化氢酶（触酶）试验过氧化氢酶（触酶）试验原理原理 某些细菌分泌过氧化氢酶，使过氧化氢某些细菌分泌过氧化氢酶，使过氧化氢生成水和初生态氧，继而形成氧分子出生成水和初生态氧，继而形成氧分子出现气泡。现气泡。应用应用 金黄色葡萄球菌、奈瑟菌属（金黄色葡萄球菌、奈瑟菌属（+）链球菌属（链球菌属（-）（血浆）凝固酶试验（血浆）凝固酶试验原理原理金葡金葡金葡金葡 血浆凝固酶血浆凝固酶血浆凝固酶血浆凝固酶应用：致病性葡萄球菌的鉴定应用：致病性葡萄球菌的鉴定游离游离结合（凝聚因子）结合（凝聚因子）协同因子协同因子凝血酶凝血酶纤原纤原纤维蛋白纤维蛋白胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验原理原理 胆盐、去氧胆酸钠和牛黄胆酸钠能选择胆盐、去氧胆酸钠和牛黄胆酸钠能选择性的溶解肺炎链球菌。性的溶解肺炎链球菌。应用应用 肺炎链球菌（肺炎链球菌（+）甲型链球菌（甲型链球菌（-）CAMP试验试验B族族链链球球菌菌