小白鼠缺氧耐受性试验.pptx

小白鼠几种类型的缺氧小白鼠几种类型的缺氧辽宁医学院辽宁医学院 叶丽平叶丽平相关知识复习相关知识复习缺氧的概念缺氧的概念缺氧的分类及各类的缺氧机制缺氧的分类及各类的缺氧机制5.5.细胞内氧化代谢细胞内氧化代谢外呼吸外呼吸内呼吸内呼吸气体运输气体运输乏氧性 血液性 循环性 组织性缺氧类型缺氧类型供氧 用氧 实验目的实验目的l复制乏氧性、血液性和组织性缺氧 动物模型，掌握缺氧的分类；l观察不同类型缺氧时 呼吸、皮肤粘膜颜色的变化，了解 解救措施；l了解成年、新生小鼠对缺氧耐受性的差异，并分析机制。实验动物实验动物成年小白鼠（7只）新生小白鼠（1只）单独放置实验器材和药品实验器材和药品 缺氧瓶+软胶塞CO中毒瓶+解救瓶、烧杯 钠石灰，铁纱网，镊子，注射器，氧气，氧气，CO，5 亚硝酸钠亚硝酸钠,1 美兰美兰 0.1 氰化钾氰化钾,10 硫代硫酸钠硫代硫酸钠，生理盐水，生理盐水实验步骤实验步骤l乏氧性缺氧l一氧化碳中毒性缺氧l亚硝酸钠中毒性缺氧l氰化物中毒性缺氧l动物尸检成年成年小白鼠小白鼠新生新生小白鼠小白鼠步骤1观察正常状态,一般指标(呼吸频率,口唇颜色)步骤2缺氧瓶+钠石灰+成年鼠+铁网包裹乳鼠观察指标呼吸频率(次/10秒,每隔3分钟观察)、口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色1.1.乏氧性缺氧乏氧性缺氧呼吸频率观察小白鼠腹部的起伏腹部的起伏实验中尽量减少对小白鼠的刺激减少对小白鼠的刺激2.CO中毒性缺氧中毒性缺氧小白鼠小白鼠A(A(中毒中毒)小白鼠小白鼠B(B(中毒解救中毒解救)步骤1观察正常状态，一般指标步骤2放入 中毒瓶中毒瓶放入 中毒解救瓶中毒解救瓶步骤3注入 3 ml CO注入 3 ml CO步骤4软瘫后立即输入O2观察指标呼吸频率(次/10秒,每隔3分钟观察)，口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色3.NaNO2中毒性缺氧中毒性缺氧小白鼠小白鼠A(中毒中毒)小白鼠小白鼠B(中毒解救中毒解救)步骤1分别用烧杯罩住，观察正常状态及一般指标步骤2背部皮下注射 0.3ml NaNO2背部皮下注射 0.3ml NaNO2步骤3腹腔注射 0.3ml 生理盐水生理盐水 腹腔注射 0.3ml 1美兰美兰 观察指标呼吸频率(次/10秒,每隔3分钟观察)口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色防止美兰沾到身体、衣物及地面防止美兰沾到身体、衣物及地面 4.氰化物氰化物中毒性缺氧中毒性缺氧小白鼠小白鼠A(中毒中毒)小白鼠小白鼠B(中毒解救中毒解救)步骤1分别用烧杯罩住，观察正常状态一般指标步骤2背部皮下注射0.3ml KCN背部皮下注射0.3ml KCN步骤3腹腔注射 0.4ml 生理盐水生理盐水腹腔注射0.4ml Na2S2O3观察指标呼吸频率(次/10秒,每隔3分钟观察)口唇、皮肤颜色、存活时间、肝脏颜色防止防止KCN沾到身体、衣物及地面沾到身体、衣物及地面动物尸检观察对象观察对象实验实验1、2、3、4中的小鼠中的小鼠观察指标观察指标1皮肤颜色皮肤颜色观察指标观察指标2肝脏颜色（剖腹）肝脏颜色（剖腹）血液颜色血液颜色实验结果实验结果缺氧类型缺氧前缺氧后存活时间肝脏颜色R(次/10秒)皮肤口唇颜色3,6,9 乏氧性缺氧成幼CO中毒ABNaNO2中毒ABKCN中毒AB三通管的使用三通管的使用腹腔注射 鼠头朝下针头倾斜45度不要太靠近中线针头尖向下避开肝脏和膀胱图图2 小白鼠的腹腔注射小白鼠的腹腔注射 皮下注射 实验结果缺氧类型缺氧前缺氧后存活时间肝脏颜色R(次/10秒)皮肤口唇颜色3,6,9 乏氧性缺氧成幼CO中毒ABNaNO2中毒ABKCN中毒AB一、乏氧性缺氧1.钠石灰有何作用？2.成鼠、幼鼠哪个存活时间长？为什么？3.小白鼠呼吸频率有何变化？为什么？4.小白鼠是否出现发绀？什么叫发绀?实验分析实验分析 1.钠石灰=CaO+NaOH,吸收CO2,消除CO2对实验的影响2.成鼠、幼鼠哪个存活时间长？为什么？幼鼠新陈代谢低，耗氧量少，相对成鼠需氧量少；幼鼠呼吸中枢发育不完善，对缺氧不敏感；幼鼠Hb含量高，相对不易缺氧；幼鼠主要靠糖酵解供能，成鼠主要以有氧呼吸供能，故幼鼠需氧少。3.呼吸频率变化 先加快，后减慢，最后死亡PaO2呼吸中枢(+)，呼吸深快 化学感受器(+)颈动脉体 主动脉体 呼吸中枢(-),呼吸减慢PaO24.乏氧性缺氧时，毛细血管毛细血管中氧合Hb减少，脱氧Hb浓度增多超过超过5g/dL5g/dL以上，可使皮肤以上，可使皮肤与粘膜呈青紫色，称发绀。与粘膜呈青紫色，称发绀。二、二、CO中毒性缺氧中毒性缺氧 1.CO中毒性缺氧属于哪种类型的缺氧?2.什么叫血液性缺氧?3.CO中毒性缺氧的发生机制是什么?4.樱桃红色是哪种物质的颜色?失去携氧能力 COHb HbCO (樱桃红色)与1个血红素结合，其余对氧亲和力 CO中毒机制中毒机制 抑制RBC糖酵解，2,3-DPG 氧离曲线左移,亲和力,释氧 亲和力高 三、三、NaNO2中毒性缺氧中毒性缺氧 1.属于哪种类型的缺氧?2.发生机制是什么?3.注射美兰的小白鼠是否存活，为什么?4.咖啡色是哪种物质的颜色?不能 携氧 其余Fe2+-O2亲和力 Hb-Fe3+-OH OH 氧化剂 硝酸盐亚硝酸盐肠道 细菌(棕褐色棕褐色)高铁血红蛋白血症 Hb-Fe2+氧离曲线左移,释氧 还原剂 四、KCN中毒性缺氧 1.属于哪种类型的缺氧？2.发生机制是什么?3.注射Na2S2O3的小白鼠是否存活？为什么？4.玫瑰红色是怎样产生的?KCN与氧化型细胞色素酶的三价铁结合为氰化高铁细胞色素氧化酶，使之不能还原成还原型细胞色素氧化酶，呼吸链中断，组织细胞不能利用氧。cytaa3Fe3+cytaa3Fe3+-CNCN-+氧化型 氰化高铁细胞色素氧化酶 cytaa3Fe2+还原型 3、存活 机制：Na2S2O3与KCN生成 无毒的硫氰酸钠，随尿液排出体外；4、小白鼠皮肤粘膜、肝脏呈玫瑰红色。因为组织利用氧障碍 毛细血管中的HbO2 含量增加,皮肤粘膜 呈玫瑰红色。实验结论实验结论低张性缺氧时呼吸频率先 后 ；其他类型缺氧时呼吸频率持续；新生小白鼠的耐缺氧能力强于成年小白鼠；美兰对NaNO2中毒有解救作用；Na2S2O3对KCN中毒有解救作用；