无创操作在高风险胎儿筛查和妊娠结局追踪中的应用分析.pdf

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 收稿日期：2023 年 12 月 21 日 作者简介：梅安康（1995），男，汉族，安徽芜湖人，本科，安徽医科大学附属巢湖医院，住院医师，研究方向为产科。-87-无创操作在高风险胎儿筛查和妊娠结局追踪中的应用分析 梅安康 安徽医科大学附属巢湖医院产科，安徽 合肥 238001 摘要：摘要：目的 本文主要探究无创操作在高风险胎儿筛查和妊娠结局追踪中的应用分析。方法 选取了从 2019 年 2月 2 日到 2023 年 3 月 8 日，在本院产科与其他医院妇产科中需要接受高风险胎儿产前筛查操作的 200 名孕妇作为研究对象。通过随机数字表法将所有受试者平均分为对照组和实验组，对照组 100 名受试者为省内其他医院产妇，行传统侵入性产前诊断方法（羊膜穿刺等），实验组 100 名受试者为本院与其他医院产妇，行无创 DNA 产前检测方法，比较有创和无创两种检测方法在胎儿染色体非整倍性和胎儿 CNVs 高风险等胎儿异常情况的检出率，并且每例产妇均接受一年的电话追踪，并追踪其妊娠结局。结果 行无创 DNA 产前检测方式的实验组在产前高风险胎儿筛查的各项标准的检出率数据与行传统侵入性产前诊断方法（羊膜穿刺等）的对照组结果无显著差异，且实验组受试者出现不良妊娠结局的情况少于对照组，差异有统计学意义，P0.05。结论 对比传统侵入性产前诊断方法（羊膜穿刺等）和无创 DNA 产前检测两种产前高风险胎儿检查方式的结果，不难看出无创 DNA 产前检测的效果较传统侵入性产前诊断方法（羊膜穿刺等）效果较好，且能更准确的预测并判断妊娠结局，降低不良妊娠结局的发生，所以，无创 DNA 产前检测值得在临床高风险胎儿检测中推广并普及。关键词：关键词：无创操作；高风险胎儿筛查；妊娠结局追踪 中图分类号：中图分类号：R71 0 引言 随着新一代高通量测序技术的不断发展，以及对新一代测序技术的认识和解读，无创产前检测（non-invasive prenatal detection,NIPT）的应用也日益普及。NIPT 是通过检测孕妇外周血中胎儿游离 DNA 片段的数量，获得胎儿的游离 DNA，并通过无创 DNA 检测技术对胎儿游离 DNA 进行检测。有研究报道称，产前超声检查发现了胎儿的染色体异常或结构异常。因此，传统羊水染色体检查通常用于产前诊断，以确定胎儿是否患 21-三体综合征（T21）、18-三体综合征（T18）或 13-三体综合征（T13）。与羊水染色体检查相比，无创 DNA 检测技术可以更好地评估胎儿染色体异常的风险，但它们缺乏产前诊断的可靠性和准确性。因此，有必要在临床实践中推广无创 DNA 产前检测技术。一些研究已经证实了无创 DNA 产前检测在高风险胎儿筛查中的有效性，并将其用于高风险孕妇中。在这项研究中，本文回顾了羊水染色体检查在高风险胎儿筛查中的作用原理。通过传统羊水细胞染色体检查和无创 DNA 检测技术可以确定高风险孕妇的染色体异常状况。1 资料与方法 1.1 一般资料 收集200名本院与其他医院妊娠妇女的临床数据，并对其进行回顾性分析。根据实际情况进行分组，：对照组均为其他医院产妇，共 100 名受试者，其年龄范围在 2237 岁之间，平均为（27.691.56）岁；怀孕的时间范围是 17-26 个星期，平均是 27.591.64 个星期。实验组为本院与其他医院产妇：年龄范围为23-36 岁，被试 100 例，其中平均年龄为 27.851.60岁；怀孕的时间范围是 17-28 个星期，平均是28.211.76 个星期。两个组别受试者的其它一般情况均不存在显著的差别（P0.05)，说明两个组别受试者具有一定的可比性。纳入标准：（1）所有的怀孕妇女都为单活胎怀孕；（2）所有孕妇都能够按照规定的标准进行分娩前的体检；（3）具有正常的认知，正常的交流能力，良好的合作精神；（4）怀孕妇女及其家庭成员了解和赞同本次试验的内容、方法和时间等，并愿意参与试验，并中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生-88-签署试验的书面许可；（5）这次试验经过医院道德理事会的认可和允许；（6）曾进行过产前彩超，有胎儿不正常表现的；（7）未发现妊娠高血压，糖尿病，心智健全者。排除标准：（1）最近曾进行过异基因输血、细胞治疗及器官移植等；（2）患有血液性疾病的人；（3）合并有严重的妊娠并发症的妇女；（4）有过不良怀孕历史的妇女；（5）有过习惯性流产的妇女；（6）有过宫腔手术的妇女；（7）患有严重妇科疾病；（8）患有心血管、肝脏、肾脏等慢性病的人；（9）患有癌症、恶性肿瘤的人；(10)有交流障碍的人；(11)有认识上的缺陷的人；(12)患有精神病的人；(13)有不完备的临床数据的人；(14）在调查过程中放弃调查。1.2 方法 1.2.1 对照组 在怀孕 1822 周期间，通过羊膜腔穿刺、羊水染色体核型分析以及 CMA 检测等方式，利用超声波来判断胎盘与胎儿的位置。在选择一个不会对胎盘与胎儿造成伤害的部位，对其进行消毒铺巾之后，再进针，并抽出 40 ml 羊水。取 20 ml 的羊水样本，按常规程序，包括细胞培养，染色体中期配制及核型测定。根据试剂箱中的操作说明，将 20 ml 的羊水样品进行样品基因组 DNA 的提取，在质量检验通过后，利用 Affymetrix 的 CytoScan750K 芯片胚胎染色体单核苷酸微阵列技术进行 CMA 的检测。1.2.2 实验组 采用无创 DNA 产前检测方法对孕期 12-22 周的妇女进行了胎儿 DNA 的测定。首先，采用 EDTA 抗凝的标准真空采血方法，收集 5 ml 的静脉血，在规定的条件下进行离心，并取出上清，作为储备。其次，采用12-plex 高通量 Hiseq2000 技术，通过核酸适体分析技术，实现核酸适体分析。最终，将所测量到的 DNA序列与参照基因组进行对比，得到每一条染色体 DNA序列所对应的个数，并测量出 Z-Score 值，以此来判断胚胎是否存在染色体疾病。高危人群（不包括在产前筛查出的高危人群）和经筛查判定的高危人群，推荐采用常规的产前检查手段。对不愿接受常规的孕期检查的孕妇，告知孕妇进行 NIPT 治疗的必要性，并在医生的指导下签字。NIPT 对有异常表现的患者采用常规方法进行检测，其检测结果与常规方法一致。1.3 观察指标 通过对无创DNA产前检测和羊水细胞染色体扫描，比较 21三体综合征，18三体综合征和 13三体综合征的检出率，并与羊水细胞染色体扫描进行比较，比较两种方法的诊断正确性。1.4 统计分析 所得资料以 SPSS16.0 统计软件处理。计数数据以 s值为单位，以 t 检验进行两组之间的比较；计量数据以 n（%）为单位，两组之间进行统计学分析；P0.05者为两组间比较有显著性差异。2 结果 2.1 对照组和实验组不同检测方式检出率对比 对羊水细胞进行的染色体和非侵袭性无创 DNA 检验，发现的染色体和非侵袭性无创 DNA 的染色体异常分别为 19.00%和 18.00%，非侵袭性无创 DNA 检验检出的正确率 97.00%，非侵袭性无创 DNA 检验检出 21-三体综合征、18-三体综合征和 13-三体综合征的正确率分别为 100%、90.00%和 100%。两组数据相近无统计学意义，P0.05。请参阅表 1。2.2 对照组和实验组不同检测方式的妊娠结局对比 行羊水细胞染色体检测对照组孕妇 1 例出现了流产，1 例出现了死胎，1 例出现了胎儿畸形，总共有 3 表 1 无创 DNA 产前检测和羊水细胞染色体检查结果n()项目 例数 染色体异常 21-三体综合征 18-三体综合征 13-三体综合征 无创 DNA 产前检测 100 18（18.00）12（12.00）3（3.00）3（3.00）羊水细胞染色体 100 19（19.00）12（12.00）4（4.00）3（3.00）t 值 0.323 P 值 0.05 表 2 无创 DNA 产前检测和羊水细胞染色体检查妊娠结局比较n()项目 例数 流产 死胎 胎儿畸形 不良妊娠结局发生率 无创 DNA 产前检测 100 1（1.00）0 0 1（1.00）羊水细胞染色体 100 1（1.00）1（1.00）1（1.00）3（3.00）t 值 2.17 P 值 0.01 中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生-89-例出现了不良的妊娠结局，发生率为 10.34%。，行无创DNA 产前检测实验组发生流产 1 例，不良妊娠结局1.41%，两组之间的数据比较，结果显示出了明显的差别，并且还具有了统计学上的显著性，P0.05，具体情况见表 2。3 结论 产前诊断是指在妊娠期间对胎儿的遗传信息进行检测，以发现胎儿先天缺陷和遗传性疾病的方法。目前常用的产前诊断技术包括羊膜腔穿刺术、绒毛膜穿刺术、脐静脉穿刺术和超声检查等。无创 DNA 产前检测（NIPT）是在孕中期进行的一种无创、非侵入性产前筛查方法，主要通过对孕妇外周血中游离 DNA 片段进行测序，对其中特定的单基因异常进行检测。NIPT的主要优点在于无创，可避免流产和致畸等风险。羊水细胞染色体检测（AFP）主要通过羊膜穿刺术，取孕妇的羊水进行检查，以用于妊娠诊断。羊水细胞染色体检测技术主要分为绒毛膜穿刺术（CAG）和脐静脉穿刺术（PVM）两种。随着无创 DNA 检测技术的快速发展，目前全球已经有超过 100 个国家和地区，超过 10000家医疗机构在使用这项技术。目前，已有报道通过无创 DNA 检测技术对胎儿染色体进行了直接检测。对妊娠结局的追踪通常采用羊水细胞染色体检测。然而，由于羊水细胞染色体检测的高成本，其在大多数国家都不作为常规筛查手段，只作为一种补充手段用于妊娠结局的追踪。由于羊水细胞染色体检测的高成本，其在妊娠结局追踪中的应用一直受到质疑。最近有研究显示，如果不考虑经济成本，羊水细胞染色体检测可以作为一种有效的诊断手段，属于胎儿染色体检验的金标准，但是该种方式属于有创的且多伴有并发症。尽管如此，一些研究人员仍然尝试通过羊水细胞染色体检测来评估胎儿患 21-三体综合征（T21）、18-三体综合征（T18）、13-三体综合征（T13）等染色体异常的风险。最近，有研究人员通过对不同来源的羊水细胞进行原位杂交检测以评估染色体异常，但这一方法也因其高成本和高敏感性而受到限制。尽管如此，这项技术仍然在临床实践中被广泛应用。无创 DNA 产前检测技术已经广泛应用于常规产前筛查和高风险孕妇的产前诊断中。在过去的二十年里，许多研究都证明了无创筛查在预防出生缺陷中的重要性。无创 DNA 检测可以通过分析母体血浆中游离的胎儿 DNA 来预测胎儿患 21-三体综合征（T21）、18-三体综合征（T18）、13-三体综合征（T13）的风险。目前，无创 DNA 检测技术已经在产前筛查中得到了广泛应用，并在一些国家被广泛使用。例如，在澳大利亚和加拿大，已经有超过 3,000 家医疗机构使用无创 DNA 进行产前筛查和高风险胎儿评估。在欧洲，一些国家已经开始使用无创 DNA 检测进行高风险胎儿评估。此外，在中国、韩国和印度，也有很多医疗机构在使用无创 DNA 技术进行高风险胎儿筛查和妊娠结局追踪。根据发表在中国妇产科杂志上的一项研究，从 2011 年起对高风险胎儿进行了无创 DNA 筛查，并将其纳入到全国卫生服务体系中。在临床实践中，对于高风险孕妇，目前普遍采用的胎儿染色体非整倍体筛查技术包括无创 DNA产前检测、羊水穿刺、绒毛膜取样等。然而，上述检测方法均存在一定的局限性，如对孕妇的年龄、体重、孕周等有严格要求；而且这些技术均需在羊水或绒毛膜取样后进行，操作复杂且有一定的创伤性。在孕中期和孕晚期，这些方法均存在一定的流产风险，给孕妇和胎儿带来了不必要的心理负担。因此，越来越多的学者致力于寻找新的无创产前检测技术。一项由澳大利亚昆士兰大学附属医院（简称：昆士兰大学医院）开展的大型前瞻性研究显示：无创 DNA 产前检测技术（NIPT）可作为有效的高风险孕妇产前诊断方法。参考文献 1王霄霜,张少芬,郑燕銮等.无创产前筛查和血清产前筛查对胎儿染色体异常检出效率的比较J.汕头大学医学院学报,2023,36(02):95-99.2王玲,王珺,高玲霞等.无创DNA检测对高龄孕妇胎儿染色体非整倍体疾病及染色体拷贝数变异筛查中的临床价值J.中国实验诊断学,2023,27(06):666-669.3邓莉,孔鹏.唐氏筛查联合无创DNA对胎儿染色体异常的临床筛查价值J.当代临床医刊,2023,36(03):27-28.4查斌斌,冯燕.无创产前基因检测对胎儿性染色体异常的筛查效果分析J.系统医学,2023,8(08):47-50.