不同技术在ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用分析.pdf

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 收稿日期：2023 年 12 月 21 日 作者简介：金娜（1994），女，江西景德镇人，本科，主管检验技师，研究方向为新生儿溶血病交叉配血适用方法学研究。-201-不同技术在 ABO 新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用分析 金 娜（通讯作者）孙海芳 张华萍 罗胜君 义乌市妇幼保健院输血科，浙江 金华 322000 摘要：摘要：目的 分析 4 种检测方法在 ABO 新生儿溶血病输血前检验中的价值。方法 收集院内 ABO 新生儿溶血病患儿58 例血样，以盐水法、抗人球蛋白法、微柱凝胶法、凝聚胺法进行交叉配血，统计 4 种方法的检测准确率，以及对于 IgG 类抗 A、抗 B 漏检率。结果 检测结果显示，58 例患儿不规则抗体检测结果均为阴性，抗人球蛋白法、微柱凝胶法的检测准确率高于盐水法、凝聚胺法，4 组检验措施的交叉配血不合率差异有统计意义（P0.05）；抗人球蛋白法、微柱凝胶法对于 IgG 类抗 A、抗 B 的漏检率低于盐水法、凝聚胺法，差异有统计意义（P0.05）。结论 对 ABO 新生儿溶血病患儿进行交叉配血时，采用抗人球蛋白法、微柱凝胶法则具有较高的稳定性和灵敏度，可提高 IgG 抗体（A、B）效价低患儿的检测阳性率，降低输血风险，值得推广。关键词：关键词：盐水法；抗人球蛋白法；微柱凝胶法；凝聚胺法；ABO 溶血；新生儿溶血病；交叉配血 中图分类号：中图分类号：R722 ABO 新生儿溶血病，是新生儿溶血病中较为常见的一种，表现为母婴之间 ABO 血型不同，新生儿出现溶血反应，增加黄疸及胆红素相关疾病的发生率，威胁生命安全，输血、换血是主要的治疗方法，但由于其血型与母体不符（母体 O 型，新生儿 A、B 型），治疗前需交叉配血检验确定血型是否吻合1-2。盐水法、抗人球蛋白法、微柱凝胶法、凝聚胺法均可用于交叉配血，但新生儿发育程度低，其抗原发育程度较差，相关抗体可能还未产生或极少，如陈盈盈等3在研究中指出 IgG 抗体效价过低（超出最低检测值）时，凝聚胺法出现漏检，导致检测结果呈假阴性，增加交叉配血风险。因此，提高 ABO 新生儿溶血病患儿的 IgG 类抗 A、抗 B 检测阳性率具有必要性，笔者开展本次研究，对比 4 种检测措施的结果，旨在确定最适合的交叉配血检测方法，提高 ABO 新生儿溶血病患儿的输血安全水平，报道如下：1 资料与方法 1.1 一般资料 收集 2022 年 1 月至 2023 年 1 月院内 ABO 新生儿溶血病患儿 58 例，男 28 例，女 30 例，血型 A 26 例，B 32例，年龄1-6d，平均3.111.04d，体重2.5-3.5kg，平均 3.140.75kg，本次研究经院内伦理委员会审核批准。纳入标准：娩出时合并黄疸（且呈加重趋势）；合并贫血、溶血症状；无输血史，血红蛋白呈下降趋势；母婴血型系统抗体不同；家属签署知情同意书4-5。排除标准：合并其他先天性疾病（先心病等）、免疫系统疾病者；合并其他血液病、输血禁忌症；合并传染性疾病（HIV、乙肝等）；家族精神病史者；资料脱落者4-5。1.2 检测方法 研究对患儿均取 2ml 血样离心，将分离出的红细胞以盐水洗涤 6 次，将其配置为 0.8%红细胞悬液并行血型检测、血浆游离 IgG 抗体检测、红细胞放散液 IgG抗体检测，直接抗人球蛋白试验结果显示58例患儿中，2 例为弱阳性。4 种交叉配血试验 盐水法，取患儿、献血者静脉血 3ml，均离心后静置，取红细胞调制为 4%的盐水悬液，在交叉将二者血浆、悬液置入同一试管（患儿样本血浆+供者红细胞盐水悬液、供者血浆+患儿红细胞盐水悬液），混合后再次离心（3000rpm*15s），若红细胞凝聚则失败；凝聚胺法，交叉配置同上，两组试管交叉混合患儿、供血者的血浆和红细胞悬液后，加入低离子介质并室温孵育（1min），在加入凝聚胺试剂混合后离中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生-202-心（3000rpm*15s），静置后取底部 0.1ml 液体待测，若未凝聚便需要重做，加入重悬液混合直至凝聚现象结束，判定成功；抗人球蛋白法，交叉配置同上，两组试管交叉混合患儿、供血者的血浆和红细胞悬液后，37水浴1h，离心去上清，加入盐水洗涤 3 次，离心取上清，加入抗人球蛋白试剂，在白色背景下观察，红细胞全部沉底为阴性，若试管上有红细胞，则根据配血卡判断凝聚位置，并观察凝聚数量，根据凝聚强度判断患儿与供血者配血是否符合；微柱凝胶法，交叉配血红细胞浓度为 0.8%，使用微柱凝胶抗人球蛋白检测卡，加样两孔，加样红细胞种类和血浆种类同盐水法，37孵育 15min，使用专用离心机离心 5min（900rpm*2min+1500rpm*3min），观察并记录结果4-7。本次研究所有操作步骤均按照相关规定，由同一组检测工作人员实施，研究所用仪器（微柱凝胶全自动血型分析仪，白洋血交叉离心机，孵育器等均为科室自有）。1.3 观察指标 以直抗人球蛋白检测法镜下观测结果为准，统计 4种方法的检测准确率（主、次侧阳性）；并分别计算ABO 血型系统 IgG 类抗 A、抗 B 漏检率。1.4 统计学方法 采用 SPSS 24.0 软件进行统计学分析，计数资料以例(%)表示，采用 2检验；以（sx）表示，采用 t 检验；以 P0.05 为差异有统计学意义。2 结果 2.1 不同检测方法交叉配血准确率比较 检测结果显示，58 例患儿不规则抗体检测结果均为阴性，盐水法、凝聚胺法检测结果均为阴性，抗人球蛋白法、微柱凝胶法分别为 25 例和 21 例阴性，4组交叉配血不合率比较差异有统计意义（P0.05），详见表 1：2.2 不同检测方法对交叉配血中抗 A、抗 B 漏检率比较 检测结果显示，抗人球蛋白法、微柱凝胶法对于IgG 类抗 A、抗 B 的漏检率低于盐水法、凝聚胺法，差异有统计意义（P0.05），详见表 2：3 讨论 ABO 新生儿溶血病目前是孕妇产前检测的重要项目，董树岭等5在研究中采用多因素 Logistic 回归分析，指出母亲分娩次数是 ABO 新生儿溶血病的独立危险因素，而随着我国生育政策的开放，二胎乃至多胎新生儿不断增加，新生儿罹患 ABO 新生儿溶血病的概率也在逐渐增加，由于 ABO 新生儿溶血病对于新生儿、胎儿均有极强的危险性，可能引发和加重胆红素相关疾病，威胁近期生命和远期生长发育，因此产前、产后快速确定 ABO 新生儿溶血病具有必要性6-8。表 1 不同检测方法交叉配血准确率比较n（%）项目 例数 主侧阳性 次侧阳性 阳性合计 假阴性 盐水法 58 0（0.00）0（0.00）0（0.00）2（3.45）凝聚胺法 58 0（0.00）0（0.00）0（0.00）2（3.45）抗人球蛋白法 58 14（24.14）*#19（32.76）*#33（56.90）*#0（0.00）微柱凝胶法 58 12（20.9）*#25（43.10）*#37（63.79）*#0（0.00）2-29.628 56.317 100.902 4.070 P-0.001 0.001 0.001 0.254 注：与盐水法比，*P0.05；与凝聚胺法比，#P0.05；与抗人球蛋白法比，P0.05。表 2 不同检测方法对交叉配血中抗 A、抗 B 漏检率比较n（%）项目 例数 IgG 类抗 A 漏检 IgG 类抗 B 漏检 合计 盐水法 58 17（29.31）15（25.86）32（55.17）凝聚胺法 58 10（17.24）9（15.52）19（32.76）抗人球蛋白法 58 3（5.17）*#1（1.72）*#4（6.90）*#微柱凝胶法 58 2（3.45）*#1（1.72）*#3（5.17）*#2-21.170 24.084 53.322 P-0.001 0.001 0.001 注：与盐水法比，*P0.05；与凝聚胺法比，#P0.05；与抗人球蛋白法比，P0.05。中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生-203-本次研究中采用的 4 种检测方法均为当前交叉配血常用方法，其中盐水法是基础的血型鉴定方式，其操作便利，检测仪器也无需过高标准，所以在临床中常常得到大范围的应用。低离子聚凝胺技术则是通过添加入低离子介质和聚凝胺试剂，中和血液唾液酸负电荷，达到加速凝聚的目的，在配合重悬液观察红细胞凝聚情况，鉴别红细胞的不完全抗体，能使假阳性率降到最低，进而保障输血的安全性7-9。但在本次研究中，盐水法和聚凝胺法的检测效果并不理想，研究结果显示，抗人球蛋白法（IgG+C3d）检测出 33 例患儿呈阳性或弱阳性，微柱凝胶法则检测 37 例，检测准确率显著高于盐水法和聚凝胺法，该结果与彭钰茹等9学者的研究结果一致，其研究中对 486 例患儿的检测结果中，凝聚胺法（主侧阳性 0.62%、次侧阳性 1.03%）、微柱凝胶法（主侧阳性 2.47%、次侧阳性 4.12%），均有显著差异，肯定了微柱凝胶法的检测效果。分析认为，盐水法、凝聚胺法的缺陷可能与抗体浓度有关，红细胞抗原与相应抗体结合是一个可逆的过程，取决于抗原抗体的结合强度，由于新生儿在娩出前后已发生，体内无红细胞相关抗体或浓度水平较低，且两项检测方法的检测时间较短，导致假阴性结果出现10-11，这也导致直抗检测显示 56 例患儿为阴性，直接试验是检测新生儿红细胞是否存在 IgG 类抗体致敏性，由于新生儿红细胞抗原发育不完全，其红细胞所带抗原部位数目只有成人红细胞数目的 25%-50%，因此也与 IgG+C3d 卡式法存在显著差异，还需要开展游离抗体试验、抗体释放试验，以确定患儿血清中 IgG类抗体存在情况12-13。微柱凝胶技术的敏感性、特异度较高，无需较多标本即可获得准确结果，检验过程中将稀释液配置为凝胶，随后执行微管灌注，并给予离心操作，从而促进微柱内凝胶颗粒的分子筛保留凝集的红细胞，进而获得凝集反应结果，加上其操作可重复，结果较为稳定，无需利用显微镜即可直接得到结果，若发现凝胶上层分散提示为阳性，反之凝胶底部则提示阴性，因此证实微柱凝胶技术的疗效，与凝聚胺技术相比，微柱凝胶技术检验结果的准确性明显提升14-15。但微柱凝胶技术仍存在一定不足，例如检查时问相对较长，可能无法为急诊配血提供帮助，同时无法鉴别红细胞中不完全抗体，还需要临床作进一步的研究分析。综上所述，盐水法、低离子聚凝胺法对 ABO 新生儿溶血病患儿的交叉配血检测结果并不理想，漏诊率较高，抗人球蛋白法、微柱凝胶法则具有较高的稳定性和灵敏度，有效检测出 IgG 抗体（A、B）效价过低时的交叉配血结果，识别输血风险，值得推广。参考文献 1康利宝,霍彩虹.微柱凝胶技术在 ABO 新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用效果观察J.贵州医药,2021,45(2):292-293.2 刘 念.微 柱 凝 胶 技 术 在 ABO 新 生 儿 溶 血 病 患 儿 输 血 前 检 验 中 的 应 用 研 究 J.医 学 食 疗 与 健康,2021,19(9):156-157.3陈盈盈,尹明伟,马继华,等.凝聚胺法交叉配血漏检 IgG 抗-A 个案报道 1 例J.国际检验医学杂志,2018,39(11):1404-1405.4张士 跃.微柱凝胶 技术在 ABO 新生 儿溶血病患 儿输血前 检验中的 应用 分析 J.检验医学 与临床,2020,17(1):126-128.5董树岭,刘欣,谢莹,等.1040 例 ABO 新生儿溶血病检测结果及其影响因素分析J.中国输血杂志,2023,36(7):605-609.6唐萍,蒋川,曾理,等.微柱凝胶免疫分析技术检测孕妇 IgG 抗体亚型在评估新生儿溶血症中的应用J.中国计划生育学杂志,2023,31(1):64-68.7唐娜,佘亚辉,陈珲,等.O 型血孕妇 IgG 抗 A(B)抗体效价与新生儿溶血病和高胆红素血症关系及预测价值J.中国计划生育学杂志,2023,31(6):1460-1464.8杨蕊,张平平,李彤彤,等.新生儿 MN 合并 ABO 血型不合溶血病 1 例J.中华新生儿科杂志(中英文),2023,38(6):368-369.中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生-204-9彭钰茹,熊杰,张瑚敏.交叉配血中抗人球蛋白微柱凝胶法 凝聚胺法的配血结果及差异比较研究J.标记免疫分析与临床,2020,27(6):1040-1043,1069.10李怡,任晓桃,郭静.ABO 血型不合新生儿溶血病与血液检测指标关系及其诊断价值J.中国计划生育学杂志,2022,30(8):1888-1892.11梁振国,范贞,庞新丰,等.IgG 抗体效价及亚型对母婴 ABO 血型不合新生儿溶血病的诊断价值J.检验医学与临床,2022,19(2):175-178.12宋建,杨婷,周小芳,等.新生儿体内IgG型血型抗体效价与新生儿溶血病严重程度的相关性分析J.中国实验血液学杂志,2022,30(2):547-551.13李亚.742 例血型不合新生儿溶血病检测结果相关性分析J.中国卫生检验杂志,2021,31(12):1474-1476.14孙月娥,何烁晴,吴永美.微柱凝胶卡式法检测新生儿 ABO 溶血三项的临床应用J.分子诊断与治疗杂志,2023,15(1):107-110,119.15薛松,徐诗雅,孙会丽.血清学指标及溶血三项试验对新生儿溶血病早期诊断的价值J.分子诊断与治疗杂志,2022,14(2):312-316.基金项目：义乌市科技计划项目（义科202129 号 21-3-121）。