微生物学病原学与诊断.pptx

第八章 病原学诊断与防治 危晓莉危晓莉标本的采集和运送标本的采集和运送避免杂菌污染运送注意保存不同期不同标本用抗菌素以前采集病变明显部位标本必须新鲜第一节第一节 细菌学诊断细菌学诊断病原菌的检查程序病原菌的检查程序药物敏感试验直接涂片镜检分离培养生化试验血清学试验动物试验确确诊诊初步诊断初步诊断分子生物学技术其他检测技术培养特征形态特征病原菌抗原的检测原理原理血清学诊断血清学诊断 双份血清标本，恢复期血清中抗体效价比急性期血清中抗体效价升高4倍者方有意义种类种类 用已知的细菌或其特异性抗原检检测测患患者者体体液液中中有有无无相相应应特特异异性性抗抗体体和和其其效效价价的的动动态态变变化化，可作为某些传染病的辅助诊断。标本标本凝集试验：沉淀试验：补体结合试验：中和试验：肥达试验、外斐试验、显微镜凝集试验等梅毒VDRL等抗“O”试验等Q热柯克斯体抗体检测等L型细菌的诊断型细菌的诊断 诱因诱因：破坏细胞壁的物质 症状症状：慢性为主，症状不典型 培养培养：高渗培养基（油煎蛋样菌落）镜检镜检：多型性快速诊断快速诊断1、自动化检测系统2、免疫学方法3、核酸的检测（PCR）第二节第二节 病毒学诊断病毒学诊断1、标本采集与送检：标本采集与送检：用于分离培养的标本：用于分离培养的标本：血清学诊断的标本：血清学诊断的标本：采取急性期、防止病毒灭活双份血清2、常规分离与鉴定、常规分离与鉴定动物接种动物接种鸡胚接种鸡胚接种组织培养组织培养器官培养移植培养 细胞培养 原代细胞培养二倍体细胞培养传代细胞培养三三大大培培养养方方法法病毒在细胞内增殖的指标病毒在细胞内增殖的指标1、CPE2、红细胞吸附、红细胞吸附正常细胞正常细胞病变细胞病变细胞病毒数量和感染性病毒数量和感染性测定测定1、蚀斑试验、蚀斑试验2、ID50 或或 TCID50 病病毒毒感感染染鸡鸡胚胚动动物物或或细细胞胞后后，引引起起50%发发生死亡或病变的最小量生死亡或病变的最小量 病病毒毒感感染染单单层层细细胞胞后后，产产生生的的局局限限性性病病灶灶，称称蚀蚀斑斑，蚀蚀斑斑是是由由一一个个感感染染性性病病毒毒体体复复制制使使局局部部单单层层细细胞胞脱脱落落形形成成的的，称称蚀蚀斑斑形形成成单单位位，病病毒毒悬悬液液中中的的感感染染性性病病毒毒量量以以每每毫毫升升的的蚀蚀斑斑形形成成单位来表示。单位来表示。病毒的血清学诊断病毒的血清学诊断中和试验中和试验补体结合试验补体结合试验血凝抑制试验血凝抑制试验免疫扩散等免疫扩散等病毒的快速诊断病毒的快速诊断光镜光镜-包涵体电镜电镜免疫荧光免疫荧光ELISA分子生物学技术分子生物学技术杂交Southern blotPCRNorthern blotbiochip第三节第三节 真菌学诊断真菌学诊断标本标本 浅部感染真菌取毛发等标本浅部感染真菌取毛发等标本 深部感染真菌取痰、血液、脑脊液等深部感染真菌取痰、血液、脑脊液等直接镜检直接镜检：标本（皮屑、毛发）标本（皮屑、毛发）10%KOH假丝酵母菌假丝酵母菌-取材涂片，革兰染色取材涂片，革兰染色隐球菌隐球菌-脑脊液离心，沉淀涂片，墨汁负染脑脊液离心，沉淀涂片，墨汁负染 结结果果判判断断：阴性不能排除感染。组织中分隔分枝的菌丝为曲霉;粗大、不分隔或不分枝的菌丝为毛霉。皮肤癣菌菌丝肥大粗长为处于活跃状态。酵母型和二相型真菌在组织内常为孢子。分离培养分离培养 Sabouraud 培养基快速诊断快速诊断 血清学诊断 核酸的诊断 毒素的检测新生隐球菌脑脊液涂片第四节 特异性预防和治疗 将疫苗或类毒素接种于人体，使机体获得免疫力的一种防治微生物感染的措施。人工主动免疫人工主动免疫主要生物制品死疫苗活疫苗类毒素亚单位疫苗DNA重组疫苗核酸疫苗合成肽疫苗特异性预防特异性预防比较区别点区别点区别点区别点死疫苗死疫苗死疫苗死疫苗活疫苗活疫苗活疫苗活疫苗制剂特点制剂特点制剂特点制剂特点死，强毒株死，强毒株死，强毒株死，强毒株活减毒株活减毒株活减毒株活减毒株接种剂量与特点接种剂量与特点接种剂量与特点接种剂量与特点量较大，量较大，量较大，量较大，2323次次次次量较小，量较小，量较小，量较小，1 1次次次次保存及有效期保存及有效期保存及有效期保存及有效期易保存，约易保存，约易保存，约易保存，约1 1年年年年不易保存，不易保存，不易保存，不易保存，44数周数周数周数周免疫效果免疫效果免疫效果免疫效果较低，较低，较低，较低，维持数月维持数月维持数月维持数月22年年年年较高，较高，较高，较高，维持维持维持维持3535年甚至更长年甚至更长年甚至更长年甚至更长人工被动免疫人工被动免疫 注射含有特异性抗体的免疫血清或纯化免疫球蛋白抗体，或细胞因子等免疫制剂，使机体获得特异性免疫力抗毒素细胞免疫制剂（IFNIL CSFLAKTILCTL）主要生物制品抗菌血清胎盘球蛋白丙种球蛋白区别要点区别要点区别要点区别要点人工主动免疫人工主动免疫人工主动免疫人工主动免疫人工被动免疫人工被动免疫人工被动免疫人工被动免疫免疫物质免疫物质免疫物质免疫物质抗原抗原抗原抗原抗体或细胞因子等抗体或细胞因子等抗体或细胞因子等抗体或细胞因子等免疫出现时间免疫出现时间免疫出现时间免疫出现时间满，满，满，满，2424周周周周快，立即快，立即快，立即快，立即免疫维持时间免疫维持时间免疫维持时间免疫维持时间长，数年长，数年长，数年长，数年 数月数月数月数月短，短，短，短，2323周周周周主要用途主要用途主要用途主要用途预防预防预防预防治疗或紧急预防治疗或紧急预防治疗或紧急预防治疗或紧急预防病原生物感染的治疗病原生物感染的治疗一、细菌感染的治疗一、细菌感染的治疗 抗菌药物的种类：抗菌药物的作用机制：抗病毒药物抗病毒药物金刚烷胺金刚烷胺-抑制病毒脱壳抑制病毒脱壳-预防感冒预防感冒 RNA或或DNA类似物类似物-治疗疱疹性脑炎等疱疹病毒感染治疗疱疹性脑炎等疱疹病毒感染阿糖腺苷类、阿糖腺苷类、无环鸟苷、无环鸟苷、二羟丙氨甲基鸟嘌呤二羟丙氨甲基鸟嘌呤迭氮酰氨胸苷迭氮酰氨胸苷抑制人类抑制人类HIV逆转录作用逆转录作用治疗治疗AIDS二、病毒感染的治疗二、病毒感染的治疗干扰素干扰素干扰素诱生剂干扰素诱生剂中草药中草药三、三、真菌感染的防治真菌感染的防治卫生、干燥、消毒（福尔马林）卫生、干燥、消毒（福尔马林）避免直接或间接与患者接触避免直接或间接与患者接触局部感染治疗：局部感染治疗：5%硫磺软膏、咪康唑霜、克霉唑硫磺软膏、咪康唑霜、克霉唑软膏或软膏或0.5%碘伏碘伏 系统感染治疗：二性霉素系统感染治疗：二性霉素B、制霉菌素、咪康唑制霉菌素、咪康唑、酮康唑酮康唑、氟康唑和伊曲康唑氟康唑和伊曲康唑