尿液分析和临床显微镜检查的质量控制流程.doc

尿液分析检查的质量控制流程
尿液分析（Urinalysis）是尿液（Urina）和分析（Analysis）二词的组合。中华检验医学大辞典对尿液分析明确定义：“用目测、理学、化学（应强调定性，定量）、显微镜及其他仪器（各种尿分析仪，渗透压计等)对尿液标本进行分析".
1.尿液分析的准确程度将直接影响到临床诊断，提高尿液分析检查的质量是关系到临床检查的重要环节.
2.质量控制的目的是实验室确保为临床医生提供客观，可靠信息去诊疗病人。
3。质量控制是质量管理的一个组成部分，是致力于使质量特征符合质量要求所采取的一切措施，以确保生产出来的产品满足要求的过程。要保证尿液分析检查质量，一定要建立一套完整的，适合于尿液分析管理措施，实行分析前、分析中、分析后全程的质量控制.
一、分析前的质量控制
(一)标本的采集与处理
尿液标本的采集：尿液标本的采集要求新鲜.住院病人尿常规检测最好留取清晨第一次中段尿；门诊或急诊病人可随时留取，但在标本容器上必须注明留取时间.
1。尿液标本的收集：尿液标本的收集容器要清洁。使用清洁一次性有盖尿标本的容器,改变目前敞开无盖的尿杯。容器上应贴有病人姓名、验联号（或条码）及注明标本留取时间的标签。
2。尿液标本的送检：尿液标本留取后应及时送检。一般尿液标本留取至少为30ml，应在2h内检查完毕，以免细菌繁殖及有形成分破坏，据文献报到，尿液标本留取置25℃，2h后会出现如下改变:
l 外观出现尿色变深，透明度变混或尿气味带有氨味；
l 化学成分出现葡萄糖，胆红素、尿胆原、维生素C 下降，亚硝酸盐升高，pH与蛋白质升高或下降；
l 镜检出现RBC、WBC管型下降，结晶或细菌升高.
3。尿液标本的保存：尿液标本如不能及时送检或分析,必须冷藏或防腐保存。冷藏可抑制细菌的生长繁殖，维持尿液pH恒定，使尿中有形成分基本不变，但4℃条件下冷藏不得超过8h,有时冷藏会导致盐类析出产生沉淀，影响沉渣检查.化学防腐①甲苯：通常用于化学成分的保存;②甲醛：用于尿沉渣检验标本的保存.
4。尿液标本接收：实验室应建立严格的标本接收制度,工作人员在接收标本时,必须检查：
• 标本内容器是否符合要求
• 标记内容与医生所填写化验单是否一致
留尿到接收标本时间是否过长
标本是否被污染
近期是否给服用对尿液分析有影响的药物和其它物质
• 尿量不少于30ml：特殊病例不能达到此要求时（如小儿、烧伤，肾衰无尿期等)应在报告单上注明收到尿量及检查方法。
尿液标本的接收要求：凡留尿超过2h(未采取相应的保存措施），未注明留尿时间或尿量不够的标本应拒收.检验科收到合格的标本后应签收,在送验单上注明留尿时间、送检时间.须说明近期是否给服用对尿液分析有影响的药物和其它物质。
（二)使用仪器、器材、试剂的规范要求
原则：
Ø 选用国家有关部门批准上市的仪器和试剂;
Ø 检验用仪器和计量器具均需经校准后方能使用，且可溯源;
Ø 选用的试纸条、校准条尽可能与仪器配套；
Ø 有条件时，要对所选用的仪器和试剂进行评价。
1、收集标本的容器
收集和运送尿液的容器应由不与尿液成份发生反应的惰性材料制成，应具备以下条件：
v 洁净、防漏、防渗，一次性使用
v 容积应〉50ml
v 园形开口的直径〉4cm
v 具有较宽的底部
v 尽可能使用具有安全、易于开启的密封装置.
2、 显微镜
在尿分析实验室，应使用具有下列特点的高质量显微镜：
v 双目镜筒
v 内置光源
v 机械载物台,使玻片易于平稳移动
v 基本的物镜组（10X和40X)及目镜组
（10X/12。5X）
v 如使用多台显微镜时，应用相同的物镜或目镜。
3、自动化设备
尿液分析使用的自动化设备主要有自动尿液分析仪、自动尿沉渣分析仪或尿沉渣工作站等,这些仪器必须经权威机构认可。
4、计算机处理系统
有条件的单位，可用带计算机成像系统的显微镜、标准化的沉渣检测系统和相关辅助软件来自动处理结果。但检查方法和尿沉渣结果报告方法必须标准化。
5、干化学试纸条
所用的干化学试纸条必须优质稳定，要具备生产合格证并经主管部门评价。试纸条一定要有失效期，必须在有效期内使用。
（三）试纸条的性能评价
1、对比试验
　　将新选用的试纸条与仪器配套的试纸条做对比试验，符合率达到要求才能使用。
将两系统的测定结果以表格形式汇总,完全一致的为对角线上的例数，判断符合的指标为对角线上下、左右各一档的范围,在此范围内的数据与总测定数之比为符合率.
例:下表为30例样本两台尿液分析仪的检测结果的比对
尿
液
分
析
仪
2
尿液分析仪1

–
±
+
2+
3+
4+
合计
–
10

10
±
1
2

3
+

4
1

5
2+

1
5

6
3+

1
3
1
5
4+

1
1
合计
11
2
5
7
3
2
30
• 本例的完全符合率为：
• 本例的符合率为：
2、重复性
可选用 + 或 ++ 浓度的质控液连续测定10条试纸带,只允许有一条有差异才算合格。
3、稳定性为保证尿试纸条的稳定性，要求必须在有效期内使用,存放也必须按说明书要求存放.
4、敏感性与特导性
尿试纸条中每个项目的试验敏感性与特导性是很重要的，在应用过程中应注意以下特点:
蛋白质膜块只对白蛋白敏感，对球蛋白不敏感，对本周氏蛋白不反应。
葡萄糖膜块只对葡萄糖产生反应，对乳糖、半乳糖、果糖及蔗糖不反应.
酮体膜块对乙酰乙酸最敏感，丙酮次之对β一羟丁酸不反应.
潜血膜块不仅对完整和破损RBC均有反应，而且对游离Hb也反应。
白细胞膜块仅对中性粒细胞有反应，而对淋巴细胞无反应。
胆红素及尿胆原膜块灵敏度比Harrison手工法低得多。
比重膜块只能反映尿中阳离子多少与比重计结果不一；对婴儿等低比重尿则不敏感。
根据以上特点，必须区分试带结果的涵义与传统手工法的不同.临床根据病情应用传统手工法进行确证。
二、 分析中的质量控制
是指样本在分析过程中的质量管理。
（一）统一尿液分析检查方法，规范操作其内容包括：项目名称、适用仪器、检测原理、样本要求、种类、保存、预处理、样本量、试剂及配套品、校准、质量控制，操作程序、参考值范围、方法特性等。
1。配备仪器标准操作手册（SOP）(随机附带的原文(复印件)及仪器检定，自检，校验等相关文件，记录,证书等）。
2.建立仪器操作卡（用于指导操作人员开、关机,主要操作步骤和维护）.
3 。规范检查方法
3.1外观/物理分析
Ø 颜色
正常尿液应为黄色和琥珀色。病理尿色应围绕红色、黄色、绿色、棕色、乳白色报告.
Ø 浊度（透明度）
正常混匀尿应透明。其浊度可用透明、雾状、云雾状、浑浊报告。
Ø 气味
必要时应报告。
Ø 比重(SG）
建议用折射仪法作为参考方法。(当尿液含X光线反差介质、葡萄糖、蛋白时可使结果增高，应予校正。Pro 1G/dl时SG增高0。003，Glu1G/dl SG增高0。004）。
3。2 化学分析
湿化学分析至少应包括糖和蛋白两项。尿糖可用葡萄糖氧化酶法,条件较差者也可用班氏法:尿蛋白可用磺基水杨酸法或加热加酸法。
干化学分析是一种简单快速,对尿半定量的检测方法。由于生产尿分析仪和使用的试剂带厂商繁多，各厂对量级标准不一致，造成医院间、医院内测定结果差异很大.为此，在使用干化学法分析时应注意下列问题：
Ø 标本必须新鲜,要求在采样后2小时内完成。
Ø 使用仪器与试剂带应配套，若使用不同厂商生产的试剂带，必须经严格对照,确定无显著 性差异时方可代用。
Ø 所用试剂带必须优质稳定，要具备 “三证”要求：
Ø 试剂条贮放于原装容器内,短暂暴露于直射光和室内温度都会使试剂条产生错误的结果.
Ø 参照厂商规定,要避免、防潮、干燥，并在 一定温度条件下妥善保存.
Ø 使用时一次只取出所需要的试剂带，并立即盖紧，多余的试剂带不可再放回容器中。
Ø 不要合并各容器内的试剂带。
Ø 不可触摸试剂带上的化学检测块.
Ø 干扰干化学法的理化、药物因素很多，常导致假阳性，假阴性结果出现，造成误诊及漏诊，因此，对干化学结果，要结合临床资料进行分析
尿十项试剂带常见产生假阳性、假阴性的原因
项目
假阳性
假阴性
酸碱度（PH）
与食物及放置时间有关
同左
比重（SG)

随尿量及尿液含固体物质浓度、食物、药物性质及尿液放置时间有关。
同左，碱性尿

蛋白质（PRO）

尿液PH变化可影响实验结果、药物喹宁、喹宁丁、嘧啶等强碱尿（PH＝9.0）、季胺盐类
尿液PH值变化可致，高盐浓度，本一周氏蛋白，球蛋白，粘蛋白，青霉素
葡萄糖（GLU）

尿液污染了葡萄糖、H2O2、漂白粉、氧化型清洁剂

维生素C>500mg/L，乙酰乙酸〉400mg/L,5-羟吲哚乙酸，尿黑酸，阿司匹林，左旋多巴，酮体,高比重,低PH时。
酮体（KET）

苯丙酮和酚酞复合物含－SH基物质（巯甲丙脯酸）,BSP、L－DOPA,头孢类抗菌素,高度着色尿
细菌污染,尿放置时间长.

胆红素（BIL）

大量氯丙嗪治疗，尿中含盐酸偶氮吡啶，色素尿,尿蓝母，硫酸吲哚酚
阳光照射，尿中含维生素C≥（250mg/L）,亚硝酸盐，陈旧尿。
尿胆原（URO）

胆色素原，吲哚,胆红素，吩噻嗪,药物色素,非那吡啶,对氨苯磺酸.
阳光照射，偶氮基色素药物，亚硝酸盐,福尔马林。
亚硝酸盐（NIT）

细菌污染,标本放置太久，色素尿，非那吡啶.

尿在膀胱逗留时间短，非利用硝酸盐微生物感染,NIT≤13umol/L，尿中维生素C≥250mg/L,硝基呋喃.
红细胞（BLO）

次氯酸盐、易热酶干扰，细菌过氧化物酶污染，肌红蛋白，氧化型清洁剂。

高浓度维生素C(≥200mg/L）,高蛋白尿,高比重尿，PH〈5.0，卡普托利，福尔马林,样品末混匀，RBC沉淀，试条Hb灵敏度达不到150mg/L.
白细胞(LEU）

福尔马林，呋喃坦啶,大量胆红素，氧化型清洁剂。

尿比重高，头孢霉素IV、庆大霉素，四环素,硼酸，高浓度草酸。

3。3显微镜检查
尿液显微镜检查是尿液有形成份确证的唯一方法
3。3。1 NCCLS对尿沉渣镜检范围提出三点要求。
v 医生提出要求
v 病人的疾病,病情或其他检查要求.

v 尿液分析中有任何一项理化检查不正常。
3。3.2 根据NCCLS Lirerature GP16—A要求，达到以下条件者可认为是标准化操作：
v 尿样最佳选择是第一次晨尿，并在未冷藏情况下2小时内完成检查.
v 尿样本量应标准化,建议统一用10ml。
v 离心时间建议统一为5分钟，以确保同等程度的沉积。
v 离心速度建议相对离心力(RCF）约400G.
v 留置尿沉渣样本为0。2ml (200ul)。
v 用统一述语,报告格式，参考范围对尿有形成份以单位体积定量报告。建议用XX细胞（或管型）/ul的报告方式。(有利于临床医师对患者进行动态观察)。
在报告结果前,必须重审所有结果（包括生化结果）是否与镜检结果一致,不符合的结果应再次检测。
3。3。3 尿沉渣的检查内容应包括：
v 细胞：红细胞、白细胞、吞噬细胞、上皮细 胞（包括肾小管上皮细胞、移行上皮细胞、鳞状上皮细胞)、异型细胞等。
v 管型：透明管型、细胞管型、颗粒管型、蜡样管型、脂肪管型、混合管型、宽形管型等。
v 结晶：磷酸盐、草酸钙、尿酸结晶和药物结晶等。
v 微生物：细菌、寄生虫（或虫卵)、真菌、精子、粘液等.
v 其他：临床医生特殊要求的其他成份。
（二)室内质控（IQC）
通过室内的质控，可评价检测结果是否可靠,报告单可否发出及排除质量环节中所有导致不满意的原因。
1、质控物
（1）自行制备方法一：
收集正常人新鲜尿高压灭菌 取上清液→加入各分析成份及防腐剂 → 预试合格后分装于10ml棕色安瓶→贮放4℃冰箱备用。(稳定性一年）。
上海检验中心介绍质控物配方
成 份
量
预期值
氯化钠（AR)
10.0g

尿素（AR）
10。0g

肌酐（AR)
0。5g

葡萄糖（AR）
0。8g
+
小牛血清(以白蛋白计）
0.3g
+
溶血液(血红蛋白150g/L)
2.0ul
+
亚硝酸盐溶液（2g/L）
0.5ml
+
丙酮(AR)
2。0ml
+

蒸馏水 加至
1。0L

方法二：（北京中国人民解放军总医院介绍）
浓缩尿质控液的配制
成 份

量

期 望 值

项 目
手工法
仪器法
磷酸氢二钠（AR)
3。0g

GLU

+

300mg/dL

磷酸氢二钾 （AR）
0。75g

BIL

－

neg

氯化钠(AR）
30。0g
KET
+
15mg/dL
尿 素 （AR）
52。5g
SG
1。010
1。010
葡萄糖（AR）
11。8g
ERY
7—12/HPF
250/ul
牛血清白蛋白
09g
PH
7。0
7。0
丙酮
4。5ml
PRO
+
75mg/dL
169g/L血红蛋白液
0。056ml

UBG

norm

肌酐
1。5g
NIT
－
neg
硫柳汞
饱和苦味酸溶液
1.0g
1。0ml
LEU
YLC
7—11/HPF
偶见／HPF
25/ul
偶见／HPF
加醛化固定的RBC、WBC、YLC数
900～1700个/ul

蒸馏水(加至）
150ml

配制后分装安瓶（５ml/Amp)，熔封后贮放4℃冰箱保存。临用前将浓缩质控液按1：20稀释后启用。有效期为6个月.
（2） 商品质控物
Bayer CHEKSTIXTM，BIO-RAD LiguichekTM．
Japan QC 1ε2，上海伊化、长春迪瑞……等
2、质控方法
u 尿液分析仪应选用技术性能优良符合要求的产品；使用时应严格遵守操作规程，使用后对仪器做好全面清理、保养；使用期间定期校正，保证仪器处于最佳状态。
u 做好试剂带的质量管理。
u 每天用高、低值两种质控尿与常规标本进行平行试验,结果做好质控记录并绘制质控管理图记录。
u 当发现质控结果不符时，除核查试剂带外,还应注意质控尿是否过期或混浊，进行综合分析。
u 在一天内最好使用同一份质控品,能用“正常”和“异常”两种质控物进行试验则更好。
u 质控物某一膜块测定结果与“靶值”相差±1个膜块内是允许的，否则为“失控”。
u 质控物的测定结果由“正常"变为“异常"或相反，均为“失控”。
u 配套质控物要求90％的结果完全与予定结果相符,10%的结果只允许相差一个“级差"（如尿蛋白测定， 予期结果为++,则90％的结果应为++，10%的结果可为+或+++）。
u 使用其他质控物的实验室应对其预定结果重新确定.
u 对镜检质控可用自制细胞、管型质控尿或商品尿有形成份质控品每天随机用双盲法镜下计数是一次，观察并记录,与靶值参考范围比较，脱靶失控时即查找原因.
质控记录
日期
仪器厂家
试纸条厂家
试纸条批号
预期
结果
质控范围
测定结果
结果判断
1

++
+~+++
++
在控
2

++
+～+++
++
在控
3

++
+～+++
++
在控
4

++
+~+++
++
在控
5

++
+～+++
+
在控
6

++
+～+++
++
在控
7

++
+～+++
++
在控
8

++
+～+++
++
在控
9

++
+～+++
++
在控
10

++
+～+++
++
在控
11

++
+~+++
++
在控
12

++
+~+++
++
在控
13

++
+～+++
++
在控
14

++
+～+++
++
在控
15

++
+～+++
++
在控
16

++
+~+++
++
在控
17

++
+～+++
++
在控
18

++
+~+++
+++
在控
19

++
+~+++
++
在控
20

++
+～+++
++
在控
与预期结果相符

18（90%）

与预期相差一个级差

2（10％)

室内质量控制图
3、失控处理
第一步 用质控物进行质控
↙↘
在 控 失 控
↓↓
开始进行标本测定检查质控物是否失效、
是否正确储存、是否污染
↓
使用新的质控物重新试验
↙↘
在 控失 控
↓
丢弃旧的质控物继行试验 进行第三步
第三步 配备新的质控物
↙↘
在控 失控
↓↓
丢弃旧的质控物继续试验 进行第四步
第四步 开同一批号的新试剂带，并且用新的质控物
↙↘
在 控失 控
↓↓
丢弃失效的试剂 更换另一批号的新
带进行标本测定 试剂带重新试验
↙↘
在 控失 控↓
对仪器进行检弃掉全部旧试剂带用新批号的试剂带继续试验
修或重新校正
（尿干化学法室间质控流程图）
（三)室间质量评价(EQA）
1、参加室间质量评价活动
1。1 目的
是利用实验室间比对了解实验室的检测能力和持续能力。
1.2 用途
v 评价实验室是否有能力胜任其所从事的检验工作.
v 认别实验室中存在问题并制定相应补救措施,这些问题可能为技术人员操作不当或仪器来进行有效的校准。
v 识别实验室间的差异.
v 确定新的检验方法的有效性和可比性，并对这些方法进行检测。
v 增加临床医生，病人和政府有关部门的信任感。
1。3 局限性
• 仅为实验室与实验室之间的比对；不能观测检测系统的稳定性；
• 不同尿液分析仪的量级标准不同，导致同一质控物检测结果在不同的尿液分析仪上可比性差；
• EQA次数有限，无法即时发现检测系统存在的问题;
三、分析后的质量控制
1． 审核全部检测结果，确认无误后签名，
发出报告.
2． 复核相互矛盾的结果：
v 了解病人情况；
v 了解上一次检查结果及历史记录；
v 结合其他有关检查结果进行分析；
v 排除产生假阳性，假阴性的原因
3。 做好阳性率、阴性率统计分析.
4。 原始资料（包括数据）的记录与保存。
5. 及时对反馈信息进行处理。
6. 做好仪器使用和保养记录.