生化室作业指导书.doc

ABCD人民医院检验科 程序文件文件编号： 版本/修订号：A/0主题内容关于发布程序文件的声明生效日期：20060808 第 七十三 页 共129 页生化室作业指导书文件编号:ZTGRY-1-SH-0161第1版编制: 审核： 批准： 生效日期：2014年1月1日梓潼县工人医院检验科74 梓潼县工人医院检验科 生化室作业指导书文件编号：ZTGY-1-SH 版本/修订号：1/0主题内容 目 录生效日期：20140101 第 2 页 共83 页目 录序号主 题 内 容 代 号页 号1血清总胆红素测定ZTGY1-SH-0152血清直接胆红素测定ZTGY-1SH-02103血清总蛋白液体双缩脲法测定ZTGY-1-SH-033134血清白蛋白溴甲酚绿法测定ZTGY1-SH-04165血清丙氨酸氨基测定ZTGY1-SH05196血清天门冬氨酸氨基测定ZTGY-1-SH-06237血清碱性磷酸酶测定ZTGY1-SH07278血清淀粉酶测定ZTGY-1-SH08319血清葡萄糖氧化酶法测定ZTGY1SH093510血清尿素氮Urease-GLDH紫外法ZTGY1SH0103911血清肌酐苦味酸法测定ZTGY1-SH114312血清尿酸Uricase法测定ZTGY-1SH124613血清总胆固醇酶试剂法测定ZTGY1SH135014血清甘油三酯酶试剂法测定ZTGY-1SH-145415血清高密度脂蛋白胆固醇测定ZTGY-1SH157616血清低密度脂蛋白胆固醇测定ZTGY1SH-168017血清肌酸激酶（CK） 法测定ZTGY1-SH-178418血清肌酸激酶MB同工酶测定ZTGY-1-SH188819血清乳酸脱氢酶DGKC法测定ZTGY1SH199220血清a羟丁酸脱氢酶测定ZTGY-1SH209921血清g谷氨酰转移酶ZTGY1SH2110622复合校准品ZTGY1SH-2219223美菱冰箱操作维护规程ZTGY-1SH2320325纯水机操作维护规程ZTGY1-SH2420526DS-301生化分析仪操作维护规程ZTGR -3-SH2520927离心机操作维护规程ZTGR 3-SH26222梓潼县工人医院检验科生化室作业指导书文件编号：ZTGY-1-SH 版本/修订号：1/0主题内容生效日期：20140101 生效日期：20140101第 3 页 共83 页 修 订 页序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期123456789101112131415161718192021梓潼县工人医院检验科 生化室作业指导书文件编号：ZTGY-1-SH-01版本/修订号：A/0主题内容 血清总胆红素(T-BIL)测定生效日期：20140101 第 6 页 共83 页血清总胆红素（TBIL)测定1. 实验原理血清中的胆红素分为直接（结合)胆红素和间接（未结合)胆红素。大多数方法是在1883年Ehrlich提出的重氮法胆红素测量法1，一些改良的方法已被用来增进反应。这些改良的方法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物,而间接胆红素需要一种溶剂，如表面活性剂后才能进行反应。英诺华总胆红素试剂是钒酸氧化法，PH接近于3时，在钒酸盐及表面活性剂的作用下，总胆红素被氧化成胆绿素.此时，胆红素特有的黄色减少，通过测定钒酸作用前后的吸光度的差可求得样品中总胆红素的浓度。胆红素 钒酸胆绿素2. 标本：2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。3。 标本存放：1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；-20保存可稳定3个月,如冰冻保存,不可反复冻融！。4. 标本运输：常温条件下避光保存运输。5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。6。 实验材料6。1 试剂：英诺华总胆红素试剂盒( 试剂1： 432ml； 试剂2:8ml）6.1.1 试剂组成试剂1:柠檬酸缓冲液 88mmol/L试剂2：磷酸盐缓冲液 50mmol/L 偏钒酸钠 3mmol/LSID 见瓶签6.1。2 试剂准备：液体试剂，直接使用，无需配制。6。1。3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于28，若无污染,可稳定至失效期。试剂有效期为12个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻.6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。6。1.5 注意事项:此试剂为体外诊断用,不要入口,毒性还末确定；警告！腐蚀剂！不要入口；避免和眼睛,皮肤或衣服接触，如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟，接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。6。2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6。3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：英诺华生化分析仪8。 操作步骤8.1 项目基本参数：参见英诺华DS301生化分析仪项目测定参数。SOP文件。8.2仪器操作步骤：参见英诺华DS-301生化分析仪操作规程。SOP文件。9. 检验结果的判断与分析10。 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控.质控规则参见生化室室内质控操作规程。SOP文件.11. 计算方法：以朗道校准品复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算,以mol/L报告。手工测定计算方法为： A标本总胆红素(mol/L） = 校准液浓度 A标准12。 参考值范围：5.1-19mol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13。 临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合，生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞(肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多,使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高.常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素.直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。14. 操作性能14.1 线性范围：0-300mol/L14。2 精密度：批内精密度CV3，批间精密度R10%.14.3 灵敏度：本试剂的检测限为0mol/L。14。4 病人结果可报告范围：0300mol/L15. 超出范围结果处理：本法线性上限为684mol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定，结果乘以2.16。 病危报警值的处理 当新生儿血清标本测定结果总胆红素340mol/L时,在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报.17. 方法局限性17。1 本法线性上限为300mol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定,结果乘以2。17。2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度0。3g /L，血红蛋白浓度3。00g/L，甘油三酯浓度2.5g/L时无明显干扰。18. 补救措施:当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19。 参考文献 1.李影林.中华医学检验全书M。北京:人民卫生出版社，1996.2.BurtisCA,AshwoodER，editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3rdedM。Philadelphia：W。BSaundersCompany，1999.3。WS/T225-2002，临床化学检验血液标本的收集与处理S.4。叶应妩，王毓三，申子瑜。全国临床检验操作规程M.南京:东南大学出版社,2006。5.CLSI/NCCLSC28-A2,HowtoDefineandDetermineReferenceIntervalsintheClinicalLaboratory,ApprovedGuidelineS.8. 产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号9. 产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，版号V2。020。 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。梓潼县工人医院检验科 生化室作业指导书文件编号：ZTGY-1-SH-02版本/修订号：A/0主题内容 血清直接胆红素(D-BIL)测定生效日期：20140101第 9 页 共83 页血清直接胆红素(D-BIL）测定1。 实验原理PH接近于3时，在钒酸及表面活性剂的作用下,直接胆红素被氧化成胆绿素，此时，胆红素特有的黄色减少，通过检测钒酸作用前后吸光度的差，可求得样品中直接胆红素的浓度。2. 标本:2。1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存.3. 标本存放:1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；20保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。4。 标本运输：常温条件下避光保存运输.5。 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本.6。 实验材料6。1 试剂：英诺华直胆红素试剂盒：试剂1:（ 432ml; 试剂2：8ml）6.1。1 试剂组成试剂1：.1.1 试剂组成试剂1：柠檬酸缓冲液 88mmol/L试剂2:磷酸盐缓冲液 50mmol/L 偏钒酸钠 3mmol/LSID 见瓶签6。1。2 试剂准备:试剂为即用式液体试剂,直接使用，无需配制。6。1。3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28，若无污染,可稳定至失效期。试剂有效期为12个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。6。1.4 变质指示：当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用.6。1.5 注意事项:此试剂为体外诊断用。警告!腐蚀剂！不要入口.避免和眼睛，皮肤或衣服接触。如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护.6。2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6。3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7。 仪器：英诺华DS301生化分析仪8。 操作步骤8。1 项目基本参数：参见英诺华DS-301生化分析仪项目测定参数.SOP文件8。2 仪器操作步骤:参见英诺华DS-301生化分析仪操作规程。SOP文件检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11. 计算方法 以贝克曼复合校准品复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算,以mol/L报告。手工测定计算方法为： Au直接胆红素（mol/L） =-校准液浓度 As12。 参考值范围:1。7-6.8mmol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合，生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞(肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高,形成高胆红素血症.人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素.直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素,因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量.14. 操作性能14。1 线性范围:0320mmol/L14。2 精密度：批内精密度CV3，批间精密度R10。14。3 灵敏度:0mmol/L.14.5 病人结果可报告范围：0320mol/L15 超出范围结果处理 本法线性上限为320mol/L。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1：1稀释，重新测定，结果乘以2。16. 病危报警值的处理 无。17。 方法局限性17。1 本法线性上限为171mmol/L。样品测定值超过上限时，应将样品用0。9氯化钠溶液作1：1稀释，重新测定，结果乘以2。，17。2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度0。3g /L，甘油三酯浓度2.5g/L时无明显干扰.。18。 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修.19. 参考文献：1。李影林。中华医学检验全书M.北京:人民卫生出版社，1996。2。BurtisCA,AshwoodER，editors.TietzTextbookofClinicalChemistry。3rdedM。Philadelphia：W。BSaundersCompany，1999。3。WS/T2252002，临床化学检验血液标本的收集与处理S.4。叶应妩,王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程M。南京:东南大学出版社,2006.5.CLSI/NCCLSC28-A2,HowtoDefineandDetermineReferenceIntervalsintheClinicalLaboratory,ApprovedGuidelineS.8. 产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号9. 产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，版号V2.020。 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。梓潼县工人医院检验科 生化室作业指导书文件编号：ZTGY-1-SH-03版本/修订号：A/0主题内容 血清总蛋白液体测定生效日期20140101 第 12 页 共83 页血清总蛋白 (TP)双缩脲法测定1. 实验原理双缩脲比色终点法.在碱性条件下，蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。显色强度和蛋白浓度成正比。OH-蛋白质 + Cu2+ -紫红色复合物2。 标本采集2。1 病人准备：无特殊要求.最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2。2 类型：血清或血浆。3。 标本存放 2025保存可稳定6天;48保存可稳定4周;20保存至少可稳定1年。4. 标本运输 室温条件下运输5。 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。6。 实验材料:6。1 江苏英诺华总蛋白测定试剂盒 试剂1：470ml6.1。1 试剂组成试剂1（R1):氢氧化钠200 mmol/L酒石酸钾钠64 mmol/L氢氧化钠200 mmol/L碘化钾30 mmol/L硫酸铜12 mmol/L6。1.2 试剂准备：试剂为即用式.6.1。3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于225,若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为12个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时,表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5 注意事项：试剂中含有氢氧化钠,不可入口!如与皮肤及粘膜接触，请立即用大量水冲洗。使用试剂时应采取必要的防护。6。2 校准品：牛血清白蛋白，具体参见生化检验校准品和质控品。SOP文件。6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件.7. 仪器：英诺华DS301生化分析仪8. 操作步骤8。1 项目基本参数:参见英诺华DS301生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见英诺华DS-301生化分析仪操作规程.SOP文件9。 检验结果的判断与分析10。 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程。SOP文件.11. 计算方法：在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/L报告。12。 参考值范围 6083g/L（注：各实验室应有自己的参考范围.）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。13。 临床意义:总蛋白检测对于多种疾病的诊断都有价值.肝脏蛋白合成缺陷、肾功能损伤引起蛋白丢失、肠道吸收不良或营养不良时总蛋白浓度下降。而在慢性炎症疾病、肝硬化和脱水时总蛋白浓度升高。14。 操作性能14。1 线性范围:0150g/L14。2 精密度：批内精密度CV3%，批间精密度R5。14。3 灵敏度：本试剂的检测限为0g/L。14。4 病人结果可报告范围 0150g/L,如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定,结果乘以2。15。 超出范围结果处理：本法线性上限为150g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2.16. 病危报警值的处理 无。17。 方法局限性17.1 本法线性上限为150g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0。9%氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定,结果乘以2。17。2 干扰物质:静脉滴注大量右旋糖酐的病人血清或血浆，使用双缩脲方法的检测结果会明显增高,请选用其它方法（如凯氏定氮法)；当样品中抗坏血酸浓度300mmol/L，胆红素浓度400mmol/L，血红蛋白浓度5。00g/L，甘油三酯浓度10g/L时没有观察到干扰18. 补救措施:当仪器发生故障时,迅速联系仪器厂家进行维修。19. 参考文献：1.李影林.中华医学检验全书M.北京:人民卫生出版社,1996。2。BurtisCA,AshwoodER,editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3rdedM。Philadelphia：W.BSaundersCompany，1999.3。WS/T2252002,临床化学检验血液标本的收集与处理S。4.叶应妩，王毓三，申子瑜。全国临床检验操作规程M.南京：东南大学出版社,2006.5.CLSI/NCCLSC28A2,HowtoDefineandDetermineReferenceIntervalsintheClinicalLaboratory，ApprovedGuidelineS.8. 产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司,无版号9. 产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司，无版号20。 其他:仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。梓潼县工人医院检验科 生化室作业指导书文件编号：ZTGY-1-SH-04版本/修订号：A/0主题内容生效日期20140101 生效日期：20140101 第 15 页 共83 页血清白蛋白（ALB）溴甲酚绿（BCG）法测定1. 实验原理在pH值4.1时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm处有吸收峰，颜色的深度与白蛋白浓度成正比。 pH4。2白蛋白+溴甲酚绿-绿色化合物2. 标本采集2。1 病人准备：无特殊要求.最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2。2 类型：血清、肝素或EDTA血浆。3. 标本存放 留取标本后请尽快分离血清/血浆.在室温条件下(1525）可以稳定一周，在冰箱保存的条件下（28)稳定一个月,20保存至少可以稳定3个月.4。 标本运输 室温条件下运输5. 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。6. 实验材料:6.1 江苏英诺华白蛋白测定试剂盒（440ml）6。1.1 试剂组成琥珀酸缓冲液 50mmol/L溴甲酚绿(BCG) 0。3mmol/L聚氧乙烯月桂醚 1mmol/LSTD 40g/L6.1。2 试剂准备：液体单一试剂,开瓶即用。6。1。3 试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为12个月.试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时,表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5 注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。6。2 校准品：参见生化检验校准品和质控品。SOP文件6。3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7。 仪器：英诺华DS301生化分析仪8. 操作步骤8。1 项目基本参数：参见英诺华DS301生化分析仪项目测定参数。SOP文件8.2仪器操作步骤：参见英诺华DS301生化分析仪操作规程。SOP文件9。 检验结果的判断与分析10。 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图,判断是否在控.质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11。 计算方法：朗道复合校准品复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。手工测定计算方法为:Au白蛋白 (g/L)= 校准液浓度 As 12。 参考值范围 成人 3448g/L儿童(4-14岁） 3854g/L13. 临床意义：白蛋白是血浆中多种物质重要的结合与运输蛋白，并是维持血浆渗透压的主要组分。血清白蛋白可用于众多疾病的诊断。血清白蛋白升高通常见于脱水的。血清白蛋白降低多见于营养不良、肾脏疾病，肝脏疾病，感染性疾病，严重的烧伤和癌症。白蛋白的定量测定有助于对肝脏疾病如肝硬化的诊断与监视。此外,白蛋白量反映了个体的健康与营养状况，因此可用于营养不良的诊断及老年住院患者的预后评估。14。 操作性能14.1 线性范围 060g/L14.2 批内精密度CV3,批间精密度R10。14.4 灵敏度:0.2%.14。5 病人结果可报告范围：269g/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。15. 超出范围结果处理 本法线性上限为60g/L.如样品测定值超过上限时，应将样品用0。9%氯化钠溶液作1：1稀释，重新测定，结果乘以2。16. 病危报警值的处理17. 方法局限性17。1本法线性上限为60g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1：1稀释，重新测定，结果乘以2。17。 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修.18。 参考文献 1。李影林。中华医学检验全书M.北京:人民卫生出版社,1996.2。BurtisCA，AshwoodER，editors。TietzTextbookofClinicalChemistry。3rdedM.Philadelphia:W.BSaundersCompany，1999.3。WS/T225-2002，临床化学检验血液标本的收集与处理S.4。叶应妩,王毓三,申子瑜。全国临床检验操作规程M。南京:东南大学出版社，2006.5.CLSI/NCCLSC28-A2,HowtoDefineandDetermineReferenceIntervalsintheClinicalLaboratory，ApprovedGuidelineS.8. 产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司,无版号9。 产品说明书，江苏英诺华医疗技术有限公司,无版号20. 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。梓潼县工人医院检验科 生化室作业指导书文件编号：ZTGR-3-SH-05版本/修订号：A/0主题内容 血清丙氨酸氨基转移酶测定生效日期：20140101第 18 页 共83 页血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定1. 实验原理国际临床化学学会（IFCC）推荐的紫外连续监测法. ALTLDH（乳酸脱氢酶）L-丙氨酸 + a酮戊二酸 丙酮酸 + L-谷氨酸丙酮酸+ NADH + H+ L-乳酸 + NAD+ + H2O 上述偶联反应中，还原性辅酶（NADH）的氧化速率与标本的ALT活性成正比.NADH在340nm有特异吸收，因而可检测NADH吸光度的下降来计算ALT活力.2。 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。3. 标本存放:3天内的活性损失：28保存:10%；1525保存：17%；标本稳定性：20保存至少可稳定4周。4。 标本运输：常温条件下保存运输.5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。6. 实验材料6。1 试剂英诺华ALT测定试剂盒（ 试剂1: 360ml； 试剂2：45ml ）6。1。1 试剂组成试剂1（R1）：Tris缓冲液 100mmol/LL丙氨酸 500mmol/L乙二胺四乙酸二钠 10mmol/L试剂2（R2)：Tris缓冲液 100mmol/LLDH（乳酸脱氢酶) 300U/L还原型辅酶I二钠盐 10mmol/La-酮戊二酸 100mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6。1。4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用.6.1。5 注意事项：试剂中含防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。6。2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7. 仪器：英诺华DS-301生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见英诺华DS-301生化分析仪项目测定参数。SOP文件8。2 仪器操作步骤：参见英诺华DS301生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10。 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件.11. 计算方法:以校准品ALT校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。12. 参考值范围 4女性 5-35U/L 男性 540U/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义1，2：丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST)旧称谷草转氨酶(GOT).它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给a酮酸的反应.ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测，可用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率用于肝病的鉴别诊断.比率1和严重肝病有关,常见慢性肝病。14. 操作性能14.1 线性范围 0500U/L14。2 精密度：批内精密度CV3，批间精密度R10。14。4 灵敏度：本试剂的检测限为210414。5 病人结果可报告范围 0U/L500U/L 15。 超出范围结果处理 当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1:9稀释，重新测定，结果乘以10。16. 病危报警值的处理 17。 方法局限性17.1当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：9稀释,重新测定，结果乘以10.17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度300mg /L，胆红素浓度400mg/L，血红蛋白浓度4。00g/L,甘油三酯浓度20g/L时没有观察到干扰。18。 补救措施:当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19。 参考文献 1.李影林。中华医学检验全书M.北京：人民卫生出版社，1996.2。BurtisCA,AshwoodER,editors。TietzTextbookofClinicalChemistry。3rdedM.Philadelphia：W.BSaundersCompany，1999。3。WS/T2252002，临床化学检验血液标本的收集与处理S。4.叶应妩，王毓三，申子瑜。全国临床检验操作规程M.南京：东南大学出版社，2006.5。CLSI/NCCLSC28A2，HowtoDefineandDetermineReferenceIntervalsintheClinicalLaboratory,ApprovedGuidelineS.8。 产品说明书，南京神州英诺华医疗科技有限公司，无版号9. 产品说明书,江苏英诺华医疗技术有限公司，无版号20。 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。梓潼县工人医院检验科 生化室作业指导书文件编号：ZTGY-1-SH-06版本/修订号：A/0主题内容 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定生效日期：20140101 第 21 页 共83 页血清天门冬氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定1。 实验原理：国际临床化学学会（IFCC)推荐的紫外连续监测法。L天门冬氨酸+ a酮戊二酸 AST 草酰乙酸+L谷氨酸草酰乙酸+ NADH +H+ MDH苹果酸脱氢酶 L-苹果酸+NAD+2。 标本:2。1 病人准备：12小时禁食。2。2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。3. 标本存放:3天内的活性损失：28保存：8%；1525保存:700U/LLDH（乳酸脱氢酶) 700U/LNADH 0.18mmol/LL-天门冬氨酸 250mmol/L试剂2（R2）：Tris缓冲液