再生干预对大鼠极量肝切除预后的作用及其机理分析上课讲义.docx

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中文摘要

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部分肝切除术是多数肝脏占位性病变的首选治疗手段，但对于较大体积的肝 脏肿瘤、侵犯多叶／段肿瘤、肝门部胆管癌等，如需行根治性切除则需切除较大 体积肝脏，术后易发生急性肝功能衰竭、小肝综合征等，严重影响生存率，成 为大范围肝切除术的瓶颈。明确肝脏切除的极限量，研究极量肝切除情况下机 体的病理生理改变，寻找可靠的预后检测指标，制定预防及治疗肝衰的方案， 具有重要的临床意义。本课题通过建立大鼠极量肝切除动物模型，研究极量肝 切除情况下机体的病理生理改变，探寻预后影响因素；在此基础上尝试抑制肝 Kupffer细胞和细胞增殖信号通路中MER／ERK分子，观察极量肝切除术后肝再生 反应及肝功能恢复情况。 目的：(1)建立大鼠极量肝切除模型，为后续实施 干预创造条件。(2)观察极量肝切除情况下机体的病理生理改变。(3)探究再 生干预在极量肝切除术后辅助治疗中的应用价值。 方法：(1)使用Wistar大 鼠建立70％、85％、90％肝切除模型。(2)术后第2天、第7天处死动物，检测血 中胆红素、转氨酶、碱性磷酸酶、白蛋白、Y-GT、TNF-Q、TGF-B、HGF、IL-6 水平的变化，取肝脏组织进行HE染色、PCNA免疫组织化学染色，比较不同肝脏 切除量下肝功能恢复及肝再生反应状态。(3)术后1小时分别给予GdCl。选择性 抑制肝Kupffer细胞， NS398抑制MER／ERK细胞增殖信号通路，以及两者联合 使用，观察85％肝切除术后生存率及其肝组织结构、功能的改变。 结果：(1) 随肝切除量的增加，术后ALT／AST等提示肝功能破坏的生化指标显著上升，白 蛋白水平降低，TNF-Q、IL-6水平提高，TGF-B、HGF水平降低，显微结构见 肝血窦扩张更为明显，变性坏死程度更为显著，PCNA阳性率依次提高。(2)85％ 肝切除术后给予GdCl。早期PCNA阳性率最高(p转氨酶、胆红素指标显著 高于对照组(p<0．05)；术后晚期PCNA接近无表达，转氨酶等指标高于对照组 (pO．05)，转氨酶及胆红素指标低 于对照组(p<0．01)，HE染色见处于分裂相细胞少，无明显肝血窦扩张或细胞空

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泡变性；术后晚期PCNA阳性率处于各组最高水平(p<0．01)，TNF-Q水平最高 (p<0．01)，转氨酶指标低于对照组(p<0．01)，肝脏小叶结构良好，无明显变 性坏死，总体生存率与对照组一致。(4)联合用药组早期血清酶水平及组织学 肝再生表现均介于分别用药组之间，但生存率最低。 结论：随肝脏切除量增 加，尽管肝脏再生速度提高，肝脏结构和功能受损加重，再生过程延长，不利 于动物生存：8596肝切除术是大鼠肝切除术的安全上限；再生过程途径干预结果 提示，术后早期短暂抑制肝细胞增殖，可使再生峰延后，对极量肝切除术后大 鼠的预后有利。

关键词；肝切除肝衰竭 肝再生Kupffer细胞 MER／ERK

Abstract

Abstract

Partial hepatectomy(PH)is still of choice in the treatment of many occupying liver diseases．However，tas to huge tumor，carcinomas invading more than one lobe，hilar cholangiocarcinoma， for which radical liver resection is usually needed，there would be a great loss of 1iver mass
wi th a hi gh ri sk of Smal 1一For—Si ze—Syndrome or even acute l i ver fai lure bringing a bad effect on postoperative survival．This becomes one of the key problems in massive or extended hepatectomy．Finding the margin of safe resection volume， clarifying the pathophysi0109ical changes， and figuring out cl inic and laboratory indexes with prognostic impact are urgent missions，together with designating better ways to prevent and treat postoperative liver failure．Objective：(1)To establish the rat model of extended hepatectomy；(2)To observe systemical ly the patho- physi0109ical changes after hepatectomy of different volumes．(3)To investigate the possible effect of regenerative intervention on liver function and animal survival under the circumstance of extended hepatectomy．Methods：(1)Male Wi star rats were used to perform 70％，85％ and 90％PH and determine the maximal 1iver resection volume with 100％ survival at 7d postoperatively．(2)Animals were sacrificed at 2d or 7d after the operation．Serum bilirubin，ALT／AST，ALP，ALB，Y—GT，TNF- Q，TGF—B，HGF and IL一6 were tested，and liver tissues were processed for
HE staining and PCNA immunohistochemical examination．(3)In rats with

85％Pit，GdCl3 and NS398 were admini strated through tai 1 vein to selectively inhibit the Kupffer cells and MEK／ERK signal ing pathway， respectively．Survival and the changes of liver structure and function were observed． Results：(1)As the loss of liver mass increased．serum levels of the ALT／AST，bilirubin，TNF—Q and IL一6 rose．In addition，the liver sinusoids expanded remarkably．Live cell degeneration and necrosis

Abstract

were seen throughout the whole tissue section．The ratio of PCNA positive cel ls was higher in either 85％or 90％PH group than that in 70％PH group． (2)In 2d after 85％PH，serum ALT／AST and TNF～a were higher in the GdCl3 group．Meanwhile，PCNA positive cells accompanying vacuolar alterations and necrosis were seen with much more numbers in this group．During late postoperative stage(7d)，PCNA positive cells were rarely seen and ALT／AST were still higher than the contr01．Pathological examination showed more vacuolar degenerations and inflammatory exudation．The total survival was remarkably lower than the control group．(3)In the NS398 administration group，the regenerative rate is much lower accompanying the lower levels of ALT／AST，bilirubin，TNF—Q and PCNA positive ratio． At later stage，PCNA positive ratio and TNF～Q was the highest in all groups．The structure of hepatic lobules seemed to be more complete than any other test group and the survival rate was the same as the contr01． (4)Both serum indexes and histological manifestation in the GdCl3 and NS398 combination group seemed to be in the middle between other two test
groups except with the lowest survival rate．Conclusions：There is a greater damage of both structure and function as the volume of liver loss increases．In rats，at least 85％PH is a safe margin for extended hepatectomy．Temporary inhibition of the liver regeneration during the early postoperatiVe stage seems to exert a positive effect on better outcome in extended hepatectomy．

Key words：Hepatectomy：Liver fai lure：Liver regeneration：Kupffer cell：

MEK／ERK

英文缩略语表

英文缩略语表

V¨I

引言

引言

部分肝切除术(partial hepatectomy)是目前临床治疗肝细胞癌、胆管细 胞癌、肝门部胆管结石等多种肝胆疾病的首选治疗手段。2010年美国NCCN肝胆 肿瘤指南(National Comprehensive Cancer Network Clinical Practice Guidenlines in Oncology，Hepatobiliary Cancers，2010)提出，对于肝 细胞癌患者，Child Pudgh分级A、B级，无门脉高压，肿瘤位置适宜，有足量 肝储备，残肝量适宜者均应行切除或射频消融治疗。而对于肝细胞癌患者，足 量肝功能储备、单发占位无血管侵犯、足量残肝体积(无肝硬化者20％以上，有 Chi ld—Pudgh A级者30—40％，保证正常的血供和胆道引流条件)的情况下， 行部分肝切除术是具有治愈性意义的，对于多发肿瘤和／或侵犯主要血管者，部 分肝切除术的治疗效果存在争议，但仍可考虑施行[1]。
解剖性肝切除(anatomic resection)与非解剖性切除(non—anatomic resection)在治疗效果上存在争议。一般认为，解剖性肝切除较后者有优势。 Hasegawa、Makuuchi等人对210例单发肝细胞癌患者进行解剖性与非解剖性肝 切除术的比较，证实对于单发HCC，解剖性肝切除较非解剖性肝切除具有更好的 生存获益[2]。Zhou，Y等人对1985年至2009年发表在PubMed、Medl ine database、Cochrane database、Embase database、Science Citation的文 献数据进行荟萃分析，得出结论，认为对于HCC，解剖性肝切除术较非解剖性肝 切除术有更好的生存率并能更好地预防局部复发[3]。然而，Tanaka等人对125 位单发HCC患者的研究发现解剖性肝切除和非解剖性肝切除手术方式的不同并 未对总体生存率产生影响，他们提出保证足够的肝功能储备对于单发HCC有更 大意义[4]。结合上述观点，肝细胞肝癌的手术方式与肝功能指标之间孰轻孰重 仍存在着争议，而这也正说明二者对于疾病的治疗都有重大的影响。
需行部分肝切除术的肝脏疾病种类繁多，并不局限于HCC，在其他占位性病 变的治疗中也存在着术式选择、肝功能储备、残肝体积等问题。同时，随着临 床诊断手段的发展、患者对生存期与生存的要求、外科学发展的要求，巨大占 位性病变、肝门部占位、肝门胆管癌、侵犯多叶／段占位性病变等以前较少或无

引言

法进行手术的疾病已经成为当前肝胆外科领域的主要问题之一。对于上述疾病， 如需进行根治性手术(radical surgery)，常需采取同种异体原位肝移植术 (homologous orthotopic liver transplantation，HOLT)[5—7]、活体肝移 植术(1iving donor liver transplantation，LDLT)[8-9]以及大范围肝切除 术(massire hepatectomy)[10-11]，并可辅以PVE、放疗等辅助治疗手段[12-16]。 然而，肝移植术由于存在脏器来源问题、经济问题、技术水平等原因目前尚不 可能广泛普及以及成为标准治疗手段，活体肝移植术则存在更多风险，故而在 一定时期内仍需以大范围肝切除术作为首选治疗手段。
对于大范围肝切除术，目前国内国际尚无明确定义，但一般认为临床半肝切 除术以上规模的手术切除量即为大范围肝切除术，常见术式包括左半肝切除术、 扩大左半肝切除术、扩大左半肝加左尾叶切除术、左三肝切除术、右半肝切除 术、扩大右半肝切除术、扩大右半肝加右尾叶切除术、右三肝切除术以及各种 联合脏器切除术等。而进行大范围肝切除术即存在根治性切除与残肝体积、肝 功能储备之间的矛盾。随手术切除量的提高、术中对G1ission系统、肝静脉系 统的处理以及黄疸、肝炎、肝纤维化、肝硬化、血栓、癌栓等情况的改变，大 范围肝切除术后发生术后肝功能衰竭(postoperative hepatic failure)[17] 以及小肝综合征(Small-For—Size—Syndrome，SFSS)[18]的风险较小体积肝切 除为高。
关于肝功能衰竭，中华医学会感染病血分会肝衰竭与人工肝学组和中华医学 会肝病学分会中性肝病与人工肝学组曾与2006年提出我国的《肝衰竭诊疗指 南》，将肝衰竭分为：急性肝衰竭、亚急性肝衰竭、慢加急性肝衰竭、慢性肝衰 竭四类，并以病程、临床表现、肝脏基础疾病特征为其定义[19]。但对于术后 肝衰竭，国际国内尚无统一的诊断及处理方案。美国肝病研究学会(the American Association for the Study of Liver Diseases，AASLD)曾给出急性肝功能 衰竭(acute 1iver failure，ALF)的处理方案，但其仅根据患者临床表现及 生化检测指标进行相应处理措施，对于术后肝衰竭并无明确针对性，且由于术 后特殊病理生理学以及解剖学改变，此方案的诊断及治疗价值更打折扣[20]。 2005年，Silvio Balzan等人回顾了其所在中心1998年至2002年间775例部 分肝切除手术病例，得出结论：术后第5天，凝血酶原时间(prothrombin time， PT)<50％且血清胆红素(serum bilirubin，SB)>50mol／L能够简便、早期、准确 地预测5096以上的肝切除术后肝衰死亡，此方案又被称为“50-50标准’’(“50—50

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引言

Criteria’’)[21]，对临床工作有一定的指导意义。 小肝综合征是术后急性肝衰竭的一种，常发生于活体肝移植术后，多由于受
体供肝体积不足、供体残肝体积不足等原因引起，其发病的主要机制为门静脉 高灌注以及肝静脉流出道梗阻所引起的高灌注压力对肝窦内皮和肝细胞损伤， 以及残肝功能不足造成。其病理表现为肝血窦扩张充血，内皮细胞损伤。临床 可表现为凝血功能障碍、消化道出血、持续性黄疸、难治性腹水、败血症、肝 性脑病、肾功能损伤、呼吸功能损伤等[22]。
极量肝切除(extended hepatectomy)即指人体所能耐受的最大肝脏切除手 术。而这一极限的具体数值是多少，极量肝切除术后机体的病理生理改变，在 不同病理生理条件下这一极限是否发生改变，极量肝切除术后是否发生的肝功 能衰竭的影响因素和预测指标，通过医疗干预能否预防、降低、逆转术后肝衰 竭的发生、通过医疗干预能否扩大极量肝切除的手术适应症。特为对以上问题 进行研究，我们建立了极量肝切除的大鼠动物模型，对极量切除条件下机体的 病理生理改变进行分析，并尝试不同再生干预对其生存情况的影响。

3

第一部分Wistar大鼠极量肝切除动物模型的建立

第一部分 W i star大鼠极量肝切除动物模型的建立

摘要

目的建立Wistar大鼠极量肝切除模型。 方法(1)使用Wistar大鼠建 立70％、85％、90％肝切除模型。(2)检测血中胆红素、转氨酶、碱性磷酸酶白 蛋白、Y-GT、TNF-Q、TGF-6、HGF、IL-6水平的变化，取肝脏组织进行HE染 色、PCNA免疫组织化学染色，比较不同肝脏切除量下肝功能恢复及肝再生反应 状态。 结果 (1)70％肝切除模型存活率100％，85％肝切除模型存活率100％， 90％肝切除模型存活率约20％；(2)随肝切除量的增加，生化指标反映出术后急 性期肝细胞的受损更严重，病理结果显示肝血窦扩张更为明显空泡变性及坏死 更多见，但再生反应较强。术后晚期PCNA阳性率随切除量增加而提高，组织破 坏程度亦随之提高，总体生存率低。

1 材料与方法

1．1材料
1．1．1 实验动物

Wistar大鼠 成年雄性Wistar大鼠，体重2509左右，购自军事医学 科学院动物中心，自然光照，自由进食水
1．1．2主要试剂
转氨酶检测试剂盒 Roche
Y—GT检测试剂盒 Roche

白蛋白检测试剂盒 Roche
胆红素检测试剂盒 Roche
碱性磷酸酶检测试剂盒 Roche
胆红素检测试剂盒 日本和光纯药工业株式会社

1．2主要仪器
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第一部分Wistar大鼠极量肝切除动物模型的建立

CX21光学显微镜 OLYMPUS
BX51数码显微镜 OLYMPUS

Image Pro—Plus图像处理系统 Media Cybernetics
TDL-40B常温低速离心机 安亭科学仪器厂
CS-VI型摊片烤片机 宏业医疗器械有限公司

RM2016组织切片机 LEICA
EGll50C冷台 LEICA
E61150H组织包埋机 LEICA
TS-12F生物组织自动脱水机 宏业医疗器械有限公司 GS．SS．22—3手术显微镜 上海医疗器械公司医用光学仪器厂 BCD-185FM冰箱 广东美的电器股份有限公司
DDHZ-300恒温振荡器 上海新诺仪器设备有限公司 HIUSYN—V电热水箱 北京医疗器械有限公司
Mi ngTai手术无影灯 上海日花医疗器械有限公司
A650照相机 日本佳能株式会社 日立7600一110生化自动分析仪 日立HITACHI株式会社

1．3方法
1．3．1实验分组 实验动物随机分为7组，分组如下： NOR组 假手术对照组
70％PH(2)组 70％肝切除术后2天取材组
70％PH(7)组 70％肝切除术后7天取材组
85％PH(2)组85％肝切除术后2天取材组

85％PH(7)组85％肝切除术后7天取材组
90％PH(2)组 90％肝切除术后2天取材组
90％PH(7)组 90％肝切除术后7天取材组

1．3．2手术及取材
术前准备及麻醉： 术前12h禁食，可自由进水，术前称重，按lmg／lOOg 体重剂量给予硫酸阿托品左侧股部肌肉注射以行气道保护。乙醚间断吸入式麻 醉。

S

第一部分Wistar人鼠极量盱f切除动物模型的建立

NOR组 取腹壁正中切口，游离肝周韧带，开腹时间45min，关腹， 术毕1h后经尾静脉注射生理盐水0．2m]。
70％PH(2)组 取腹壁正中切口，游离肝周韧带，以显微外科镊在右叶肝门 及左外叶肝门之间横向分离G1i SSion系统背侧的结缔组织，结扎并离断该部分 G1i SSion结构以阻断进入肝左外叶及中叶的血流，共同结扎左外叶及中叶的肝 静脉阻断流出道，切除肝脏中叶及左外叶，关腹，术毕】h后经尾静脉注射生理
盐水0．2m]。术后第二天以10％水合氯醛按0．3ml／1009腹腔注射麻醉后取材，
下腔静脉穿刺取血，取肝脏及脾脏，处死动物(取材方式下同)。
70％PH(7)组 手术过程同70％PH(2)组，于术后第7天取材并统计

生存率。

图1．1 Wi star大鼠肝脏各叶 幽1．2 Wi star大鼠肝|、J血管结构
85％PH(2)组 切除中叶及左外叶，在尾状叶茎部结扎并切除上、下尾状叶， 以结扎法切除右下叶，仅保留右上叶及腔静脉周肝组织。其余操作同70％Ptt(2) 组。
85％PH(7)组 手术过程同85％PH2)组，于术后第7天取材并统计

生存率。

90％PH(2)组 切除中叶及左外叶，分离并离断右叶月_1：门的分支，以结扎法 切除右下叶，以6-Oprolene线缝扎右上叶肝静脉后切除右上叶，仅保留上、下 尾状叶。其余同70％PH(2)组。
90％PH(7)组 手术过程同90％,Ptt(2)组，于术后第7天取材并统计生

存率。

第一部分Wistar人鼠极量月1切除动物模型的建立

图1．3阻断左外叶、中叶和右叶血供后各肝叶缺血情况
1．3．3大体指标收集 术前体重、切除肝重、存活时间、生存率、取材时肝重等指标
1．3．4转氨酶的检测
使用酶法利用日立7600-1 10全自动生化分析仪测定转氨酶含量。

原理：1)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase，AI．T)含量测 定原理：Q一酮戊二酸(0一ketoglutarate)和L一丙氨酸(L—alanine)在ALT 作用下形成L一谷氨酸(L—glutamate)和丙酮酸(pyruvate)。丙酮酸、还原型 辅酶I(NADH)、H+在乳酸脱氢酶f]actate dehydrogenase，LDH)作用下形成 L一乳酸和NAD+。根据NADH吸光度下降计算出ALT含量。
2)、门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransf’erase，AST)含量 测定原理：0一酮戊二酸和1．一门冬氨酸在AST作用下形成L一谷氨酸和草酰乙酸 (oxa]oacetate)。草酰乙酸、还原型辅酶I(NADH)、H’在节果酸脱氢酶(malate dehydrogenase，MDH)作用下形成L一苹果酸和NAD’。根据NADH吸光度下降计算
出AST含量。 1．3．5胆红素的检测
使用钒酸氧化法测定胆红素。原理：在pH值为3左右时，胆红素与钒酸反 应，胆红素被氧化为胆绿素，使胆红素特有的黄色减少，根根据吸光度i订后差 异测定胆红素含量。
1．3．6碱性磷酸酶的测定

磷酸埘硝基苯酯(p—ni tropheny]phosphate)与水在碱性磷酸酶(a】ka]j rio

第一部分Wistar大鼠极量肝切除动物模型的建立

phosphatase，ALP)作用下形成磷酸(phosphate)和对硝基苯酚 (p-nitrophen01)。根据对硝基苯酚的吸光度计算ALP含量。 1．3．7白蛋白的检测
1．3．8 Y-GT的检测

1．3．9 TNF-Q、TGF一0、IL一6、HGF的测定 由尚柏生物医疗公司使用 ELISA方法检测
1．3．10石蜡切片制作 (1)取材lxlxO．5cm (2)自来水冲洗 2---4h
(3)蒸馏水浸泡 5---20min 沥干上组织脱水机 (4)脱水步骤
A、70％乙醇 2—5h
B、90％乙醇 过夜
C、95％乙醇I 1．5h

D、95％乙醇工I 1．5h
E、95％乙醇III 1．5h
F、100％乙醇I 1．5h

G、100％乙醇II 1．5h

(5)透明
H、二甲苯I 1h
I、二甲苯II 1h

(6)浸蜡

J、石蜡I lh
K、石蜡II 1h
L、石蜡III lh (7)从组织脱水机中取出浸蜡完毕的组织，放入包埋机中包埋 (8)包埋后的蜡块放于冷台冷冻30min后取下蜡块 (9)切片，片厚5um
1．3．1l HE染色

(1)脱蜡至水：
二甲苯I lOmin

8

第一部分Wistar大鼠极量肝切除动物模型的建立

二甲苯II lOmin

无水乙醇I 5min
无水乙醇II 5min

95％乙醇I 4min

95％乙醇II 4min

85％乙醇 3min (2)蒸馏水充分清洗2min (3)将切片置苏木素染液中染色3’5min (4)拿出放入盐酸酒精中分化3’5s (5)自来水返蓝lOmin
(6)蒸馏水洗后，入伊红染液中染色30、60s，取出后放入85％酒精中涮洗

30s。

(7)脱水透明：

95％乙醇I 3min

95％乙醇II 3min

无水乙醇I 4min

无水乙醇II 4min
二甲苯I 5min
二甲苯II 5min
(8)中性树胶封片 1．3．12免疫组化PCNA染色
(1) 脱蜡至水：
二甲苯I 8min
二甲苯II 8min

二甲苯III 8min
无水乙醇I 5min
无水乙醇II 5min

95％乙醇I 4min

95％乙醇II 4min

85％乙醇 3min
(2) 蒸馏水充分清洗

9

第一部分Wistar大鼠极量肝切除动物模型的建立

(3) 抗原修复：柠檬酸缓冲液(PH 6．O)200ml加热至95℃，切片放 入修复液中保持15min。室温放置5-10min，使切片自然冷却
(4) 蒸馏水或PBS充分清洗
(5) 3％双氧水室温孵育lOmin，清除内源性过氧化物酶活性 (6)PBS充分清洗，3min×4 (7)滴加即用型羊封闭血清100—150 p l，封闭10—15min (8)滴加一抗，操作过程中防止组织片干燥，4"C孵育过夜 (9)PBS缓冲液(PH7．4)清洗4minX4 (10)滴加二抗，操作过程防止干燥，37℃孵育60min (11)PBS缓冲液(PH7．4)清洗2minx4 (12)DAB显色，镜下控制染色程度(1-15min)
(13) 自来水洗，苏木素衬染5一lOmin，水洗。 (14)1％盐酸酒精分化，热水返蓝。 (15)脱水透明：
90％乙醇 2mln

95％乙醇I 2min

95％乙醇II 2min

无水乙醇I 3min
无水乙醇II 3min
二甲苯I 4min

二甲苯II 4min

(16)中性树胶封片 1．3．13数据统计
实验数据以SPSS 1 7．0统计分析软件进行统计分析。数据结果以(mean
_SD)格式表示，对数值数据显著性差异进行均值比较、单因素卡方检验(单 因素ANOVA检验)，组间数据以LSD—t检验进行两两比较。

第一部分Wistar人鼠极量Jj十切除动物模型的建立

2 实验结果及分析

2．1单纯手术在不同切除量下存活率的区别 单纯手术统计生存率的四组实验(NOR组、70％PH(7)组、85％PH(7)组、90％P11(7)
组)中，对照组、70％肝切除术组、85％肝切除术组术后均能长期存活，而90％ 肝切除术组术后48h开始出现死亡，以术后第3、4天为死亡高峰，结合前期实 验数据(未给出)，90％肝切除术后7天存活率约为20％。图1．1给出不同切除量 下，大鼠存活状态的具体数据。

不同切除最对大鼠存活的影响

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～
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烬
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时间r天)
-—●一7PS 6 ，6 6 6 6
--11--8 PS 6 6 6 6．6 6
9PS 6。6 6 3 2 2 2

图i．4不同切除量对人鼠存活的影响

随肝脏切除量的提高，残余肝体积减小，对实验动物生存的影响逐渐增大。 在所使用的实验条件下，85％肝切除术术后7天内未出现死亡个案，90％肝切除 术术后出现大量死亡个案，提示在当前条件下，Wi star大鼠肝脏切除量安全上 限在85％一90％之I’EjJ。
2．2术后早期肝肌!再生大体情况 在不同肝脏切除量下，术后第二天，使用等效切除量(切除肝重／体重．2509，
等效为体重2509大鼠所切除肝脏重量，下同)、等效残肝量(切除肝重／体重

．2509／切除比率术残肝比率)、等效增重((取材时肝重一估算残肝重)／体重．2509) 来统一化捕述肝脏切除量及雨生情况。术后第二天，70％切除组肝脏增生3．837
±0．】209(均值±标准差，下同)，85％切除组肝脏增生3．008±0．1449，90％切

第一部分Wistar人鼠极量肝切除动物模型的建立

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图1．5术后第2天肝脏增重情况

除组肝脏增生2．11 7±0．4989(单冈素A．NOVA p满足机体对肝脏功能的需要，而其再生速度则可能受至J细胞 因子、灌注压、缺氧等多种因素的影响。

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图】．6术后第2天肝脏再生比率

2．3术后晚期肝脏再生大体情况

第一部分Wistar人鼠极量肝切除动物模型的建立

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图1．7术后第7天肝脏再生情况 图1．8术后第7大肝脏再生比率

术后第7天，肝脏增生过程趋近结束，各组最终肝脏增重量各不相同，

70％PH(7)组7．350±1．0969，85％PH(7)组8．779±0．7039，90％PH(7)组7．642±
0．3929(单因素ANOVA p=O．016)。增牛比率也具有显著性差异70％PH(7)组283．3

±72．1％，85％PH(7)组653．2±53．1％，90％P1{(7)组917．9±81．0％(单因素ANOVA

p
p=O．277)。可见，行部分肝切除术后，尽管再生速率，再生比率各有不同，但 最终肝脏体积基本近似。

2．4随肝切除量增加，肝功能指标的改变

2．4．1 白蛋白

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图1．9术后第2大血清白生r]水平

血清白蛋白由肝脏合成，其水-11反』、蔓肝脏一般功能状态，指示肝脏合成功能

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第一部分Wistar人鼠极量肝切除动物模巧!的建立

的一般情况。术后第2天取材时，检测血清白蛋白水平，NOR组(假手术组)32．467