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精品文档血液检查Examination of Blood 血液：不断地流动于人体的循环系统中，直接或间接参与全身各个组织器官的新陈代谢、功能调节及维持人体内、外环境间的平衡，完成各项生理功能活动。血液的组成Composition of Blood有形成份：RBC、WBC、PLT无形成份血浆：H2O 1- 92%、蛋白、酶、维生素、激素、电解质、胆红素、葡萄糖、尿素、肌酐、血脂、抗体、血液一般检查General Examination of Blood(血常规)血液有形成份的组成参考值、临床意义何谓MCV、RDW红细胞形态观察Erythrocyte count (RBC) 红细胞计数Hemoglobin determination (Hb) 血红蛋白测定Leukocyte count (WBC) 白细胞计数Differential leukocyte count白细胞分类Platelet count ( PLT) 血小板计数 特点:红、白细胞都比成人高，红细胞呈“生理性巨幼红细胞贫血”的表现，白细胞呈感染的表现（粒细胞增高并左移）红细胞计数 Erythrocyte Count方法:显微镜计数法；全自动血细胞分析仪计数法操作:用等渗稀释液将血液作 200 倍稀释，滴入血细胞计数板中静止 1-2 min，于高倍镜下计数 5 个中方格红细胞总数，经换算即得每升血液中血红细胞数。公式:RBC/L= 5个中方格总数510200106报告格式: .1012/L 3.811012 /L参 考 值（男）4.05.51012/L（女）3.55.01012/L（新生儿）6.07.01012/L各种红细胞的形态平均红细胞容积(MCV):MCV=红细胞比容/红细胞数红细胞数参考值:80-100 FL红细胞容积分布宽度 (RDW):RDW=S.D./ 平均红细胞体积平均红细胞体积参考值:11.5-14.5%RDW 的统计学实质是红细胞大小的变异系数 CV临床意义：（ 增加 ）相对性增高：各种原因导致的血浆容量减少，使红细胞相对增多。剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、多汗、多尿。绝对性增高：由于缺氧而致红细胞代偿性增多，红细胞增多的程度与缺氧程度成正比生理性：胎儿、新生儿、高原地区居民、剧烈体力劳动、情绪激动时，红细胞可一过性增多病理性：严重慢性心、肺疾患，如阻塞性肺气肿、肺源性心脏病、紫绀型先天性心脏病，真性红细胞增多症临床意义：（ 减少 ）生理性：妊娠中、后期，血容量增加约 25 %，引起血液稀释；6个月2岁的儿童由于生长发育迅速,血容量急剧增加而致造血原料相对不足；老年人造血功能明显减低致红细胞减少；月经期暂时引起下降。病理性：各种类型贫血：如缺铁性贫血、巨幼红细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血、继发性贫血等。 网织红细胞计数及正常参考值：网织红细胞是晚幼红细胞脱核后，在完全成熟之前的过渡型红细胞。由于胞浆中尚存核糖体、核糖核酸等嗜碱物质，用煌焦油兰等染料进行活体染色后，胞浆中可见蓝绿或蓝色的网状结构，故名网织红细胞。成人：0.5%-1.5%新生儿（3月）：2%-6%网织红细胞计数的意义增多：骨髓增生旺盛。常见于溶血性贫血，尤其是急性溶血性贫血（可达20%以上）、急性大失血贫血治疗有效。如缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血，经相应治疗后1-2日即开始，1周左右达最高峰减少：骨髓增生低下，如再生障碍性贫血、溶血性贫血有再生障碍危象时血红蛋白测定方法：氰化高铁血红蛋白法全自动血细胞分析仪原理：除Hbs外，多种血红蛋白（Hb）均可被高铁氢化钾氧化成高铁血红蛋白（Hi），再与CN- 结合生成稳定的棕红色氧化高铁血红蛋白（HiCN），在540nm处有一吸收峰贫血Anemia是一种症状，是指人体单位体积循环血中，红细胞计数、血红蛋白含量和红细胞比积低于正常参考值即称为贫血 RBC:主要功能：携带O2、运输CO2膜组成：膜糖、膜脂、膜蛋白膜结构：不对称性、流动性、骨架膜功能：物质运输、抗原性、变形性、免疫功能Hb:是红细胞中的运输蛋白，主要功能是吸收肺部大量CO2并输送到身体各组织Hct:是指抗凝全血经离心沉淀后，测得下沉的红细胞在全血中所占容积的百分比值 各系统的表现：全身软弱无力、疲乏困倦、皮肤粘膜苍白呼吸及循环系统： 心悸、气短、心率加快、呼吸加重等，严重者发生心力衰竭消化系统：食欲不振、腹胀、恶心、呕吐、消 化不良、腹泻或便秘等泌尿生殖系统： 尿可出现少量蛋白，肾功能轻度减低，甚至发生尿少、尿闭和急性肾功能衰竭神经系统： 头痛、头晕、畏寒、反应迟钝、耳鸣、眼花贫血的病因与发病机制分类红细胞生成减少：骨髓造血功能障碍、红细胞生成素产生缺陷、造血物质缺乏或失利用红细胞破坏增多：红细胞内在异常：膜缺陷、酶缺陷、珠蛋白链生成异常、阵发性睡眠性血红蛋白尿红细胞外在异常：免疫性、机械性、化学与物理、感染、单核吞噬细胞系统功能亢进红细胞丢失过多：急性、慢性失血贫 血 分 类贫血发病病因分类缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血溶血性贫血、血红蛋白病红细胞膜缺陷致溶贫自身免疫性溶贫阵发性睡眠性血红蛋白病红细胞形态分类类 型 MCV（f l） MCH (pg) 大细胞型 100 32正 常 80 94 26 32单纯小细胞 80 26小细胞低色素 80 26红细胞骨髓增生特点分类骨髓增生活跃性贫血：缺铁性、溶血性、失血后贫血骨髓增生不良性贫血：原发性及继发性再生障碍性贫血巨幼红细胞性贫血：营养性巨幼红细胞性、恶性贫血贫血的诊断了解贫血程度、类型、病因询问病史、体格检查、实验室诊断贫血的检验诊断血红蛋白含量Hb轻度:成年男性120g/L;成年女性110g/L中度:90g/L重度:10.0109/L；急性心肌梗死后12d，常见WBC明显增高；急性溶血亦见WBC增多，增多成分以中性分叶核粒细胞为主。急性大出血:如脾脏破裂或宫外孕输卵管破裂后，WBC迅速增多常达20.0109/L。这可能是应激状态、或内出血一过性缺氧。急性中毒:如安眠药、滴滴畏中毒， WBC可高达20109/L以上，代谢性酸中毒。如糖尿病、酮体症、酸中毒及慢性肾炎尿毒症时，也常见WBC增多，均以中性粒细胞为主。白血病及恶性肿瘤:急、慢性白血病、肝癌、胃癌等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成素，并能吸引骨髓储备池WBC释放。白细胞减少某些革兰氏阴性杆菌感染如伤寒、副伤寒杆菌感染时，白细胞总数可低至2.0109/L；病毒感染。某些血液病如再生障碍性贫血；巨幼红细胞性贫血；恶性网状细胞病 （恶组）；急性非白血性白血病。脾功能亢进破坏过多、脾素抑制骨髓生成;慢性理化损伤;电离辐射，如X线、放射性核素等；服氯霉素。自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮。 白细胞分类计数与临床意义中性粒细胞（neutrophil）：游走、吞噬 50 70%嗜酸性粒细胞（eosinophil）：致敏反应0.5 5%嗜碱性粒细胞（basophil）：释放组织胺、肝素0 1%单核细胞（monocyte）：吞噬、清除死亡细胞及异物3 8%淋巴细胞（lymphocyte）：参与体液、细胞免疫20 40% 中性粒细胞Neutrophil 生理特性：渗出性、变形性、趋化性、吞噬性骨髓 血液分裂池 成熟池 储备池 边缘池循环池 4-5d 1-3d 2-3d原粒早幼粒中幼粒/晚幼粒杆状核/杆状核分叶核/分叶核细胞核左移：周围血中杆状核粒细胞增多甚至出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞时均称为核左移杆状核粒细胞增多：6%：轻度左移；10%：中度左移；25%：重度左移或称为类白血病反应类白血病反应 ：患儿男， 2.5岁，日本籍，于10天前因受冷而发热，自测体温38（腋下），无畏寒、头痛、呕吐、腹泻，就诊于当地医院，血常规 WBC 28.9109/L，阿莫西林0.125g 3/日治疗，无明显好转，4天后患儿面、背及双上肢皮肤反复出现散在红色丘疹，停药否无区别。1999年7月5日急诊住我院。实验室检查，血象：Hb110g/L, WBC 23109/L,血小板 121109/L，幼稚型异常淋巴 56%，成熟淋巴 21%，嗜酸性粒细胞2%，中性粒细胞 21%，骨髓穿刺二次，骨髓细胞分类象同血涂片象。细胞核右移：正常人周围血中性粒细胞以三叶核者为主，若五叶者超过5% 时为核右移，此时常伴有白细胞总数减少。一过性地出现核右移是正常现象。如在疾病进行期突然出现核右移的变化，则表示预后不良临床意义生理性增高:见于妊娠期、分娩时、新生儿期;剧烈运动、热水浴;严寒、高温;午后高于清晨;饮食后高于饮食前等病理性增高:急性感染;严重组织损伤;急性大出血;急性中毒;白血病及恶性肿瘤病例：患者朱全妹，女性，47岁，因砖墙砸伤腰骶臀部致左下肢活动受限伴腰骶臀部皮肤发紫5天于20011204由急诊收治入院。1创伤性失血性休克 2腰骶部、髂后部、右臀后部皮肤严重挫擦伤伴皮下积血 3骨盆严重骨折 4会阴部、肛门严重挫裂伤血常规检查结果：Hb：92g/L RBC：3.01012/L PLT：271109/L WBC：32.7109/L：中幼粒细胞： 2% ;晚幼粒细胞：5% 杆状核粒细胞：35% ;多核粒细胞：45% ;淋巴细胞：9% 单核细胞： 4% 中性粒细胞减少:某些革兰氏阴性杆菌感染;某些血液病;脾功能亢进;慢性理化损伤;自身免疫性疾病淋巴细胞Lymphocyte 病理性增多见于：病毒性感染;某些慢性感染;各类淋巴细胞性白血病淋巴细胞减少见于:接触放射线;应用肾上腺皮质激素及肾移植术后、AIDS单核细胞Monocyte单核细胞病理性增多见于：心内膜炎、疟疾、黑热病;急性感染的恢复期;活动性肺结核及粟粒性结核;慢性单核细胞白血病嗜酸性粒细胞Eosinophil增高见于：过敏性疾病;寄生虫病;皮肤病;慢性嗜酸性白血病及淋巴瘤血小板计数platelet是由骨髓中成熟巨核细胞生成;在止血过程中起着重要的作用计数方法:显微镜计数法;全自动血细胞分析仪法参考值100300109/L临床意义血小板增多 400109/L;见于血小板增多症、慢性粒细胞增多症、真性红细胞增多症、骨髓纤维化、脾切除等。血小板减少 100109/L;见于血小板减少紫癜(ITP)、再生障碍性贫血、急性白血病、X射线照射。病例 患者：女32岁 已婚 ，有一8岁女儿，无业主述：经常头痛、疲乏、失眠。右肋骨下疼痛,胸骨疼痛。患者长期服用减肥药，无间断血液检验结果：WBC：15.4109/L RBC：5.531012/LNC: 85.2% Hb: 150g/L LC: 11.6% PLT： 1321 109/LMO: 1.8% RDW: 17.8 %EOS: 0.9% BAS: 0.5%全自动血细胞分析仪多项参数测定仪器组成:1.主机 2 终端机 3 打印机工作原理阅读报告:1.18、23 项参数中英文报告2.图解3. 警告标志4. 含义报告库尔特原理：孔径阻抗细胞计数原理白细胞自动化分类二项式分类 粒细胞和非粒细胞三项式分类 淋巴中性粒细胞和中间细胞五项式分类 嗜中嗜碱嗜酸淋巴单核细胞红 细 胞 直 方 图缺铁性贫血铁粒幼细胞性贫血轻型 - 血红蛋白生成障碍性贫血巨幼细胞性贫血叶酸治疗后第三章Examination of Abnormality in Hemostasis and Coagulation Mechanisms of abnormality in hemostasis and coagulation一、出血与止血Haemorrhage and Hemostasis二、凝血与抗凝Coagulation and Anticoagulation三、纤维蛋白溶解与抗纤维蛋白溶解Fibrinolysis and Antifibrinolysis四、出血性疾病实验诊断、临床意义 Laboratory Diagnosis and Clinical Significance of the Haemorrhage Disease第一节The Basic Theoretcis一、出血与止血Haemorrhage and Hemostasis止血的三个基本条件:（1）血管结构与功能正常:完整性、弹性、收缩，释放因子，激活血小板、凝血系统（2）血小板功能与量的正常:黏附、凝集、活化、提供界面 等（3）凝血系统的正常:14个因子，(HMW, Kininogen, kallikrein K)二、血液凝固机理The mechanism of coagulation凝血机理血小板基本结构与功能三、抗凝血系统The System of Anticoagulation1细胞抗凝2.体液抗凝四 纤维蛋白溶解机制Fibrinolysis System and MechanismFDP1、抗凝血酶作用2、结合纤维蛋白单体进而抑制纤维蛋白的聚合3、抑制血小板的粘附和聚集功能4、抑制a 活化FSummaryl止血：血管收缩 血小板激活 凝血系统活化局部血粘度升高l血小板：黏附 聚集 释放 促凝物质 l提供磷脂界面l凝血系统:一条共同途径 两条凝血道路三个凝血阶段 四组（14个）凝血因子l抗凝:细胞抗凝 体液抗凝l纤溶:纤溶酶 FDP第二节 出血性疾病实验诊断临床意义Laboratory Diagnosis and ClinicalSignificance of the Haemorrhage Disease出血、血栓性疾病的检查Examination of Haemorrhage and Thrombosis DiseasesImportant Factors:血管Blood vessel血小板Platelet凝血因子 Coagulate Factors纤溶Fibronalysis System一、血管壁检测毛细血管抵抗试验( CRT，90-100mmHg M5 F10)血管壁结构和/功能缺陷：遗传性出血性毛细血管扩张症、过敏性/单纯性/其它血管性紫癜血小板量和/质异常：原发性/继发性血小板减少症、血小板增多症、先天性/获得性血小板功能缺陷血管性血友病 （v WD)vWF：Ag测定(94.1%32.5%)减低：vWD增高：血栓性疾病 心梗 心绞痛 脑血管病 糖尿病 妊高征 肾小球病6-keto-PGF1a减低：同上 肿瘤转移 周围血管血栓形成 TTPThrombomoduline antigen TM:AgEndothelin-1, ET-1二、血小板数量和功能1、血小板计数 （platelet count, PCT)2、血小板粘附功能（platelet adhesiveness test PAdT)3、血小板聚集功能（platelet aggregation test PAgT)4、血块退缩试验（clot retraction test,CRT)5、血小板相关免疫球蛋白测定6、血小板第三因子测定1.Platelet count参考值:100300x109/L临床意义:减少400x109/L原发性:骨髓增生性疾病：CML 真性红细胞增多症原发性血小板增多症 骨髓纤维化早期 反应性增多:急性感染 急性溶血 某些癌症2. Platelet adhesion test PAdT (黏附率%)原理增高:血栓前状态/血栓性疾病：心梗 心绞痛 糖尿病 脑血管病 妊高征 肾小球肾炎 动脉粥样硬化 肺栓塞 深静脉血栓形成 避孕药减低:vWD 巨大血小板综合征 血小板无力症 尿毒症 AL 肝硬化 MDS 低/无纤维蛋白血症 异常蛋白血症3. Platelet Aggregation Test (PAgT)方法:利用切变力或诱导剂诱导血小板聚集，检测自发性血小板聚集和循环血小板聚集。常用的血小板聚集诱导剂ADP:引起血小板外形改变，GPIIb/IIIa上纤维蛋白原受体暴露，结合纤维蛋白原聚集。血小板表面有三种ADP受体。Col:引起血小板活化、粘附、颗粒释放、聚集。低剂量聚集由释放引起。对ASA敏感。受体有GPIa/IIa、GPVI。胶原粘附需vWF和GPIb。AA:激活血小板，促释放而聚集，通过环氧化酶形成TXA2，对ASA敏感。 Adr:通过TXA2形成而活化磷脂酶c,故可被ASA抑制。不完全抑制GPIIb/IIIa活化和与纤维蛋白原结合。其他诱导剂:凝血酶、TXA2类似物、 PAF、5-HT 以及A23187等。 另外:抗原抗体复合物、纤溶酶、蛋白溶酶、某些病毒、细菌及其产物、血管紧张素、某些肿瘤细胞和颗粒材料也可引起血小板聚集成为诱发血栓形成的病理机制。诱导剂种类选择与血小板先天性/获得性缺陷遗传性或获得性缺陷 ADP Adr Ris血小板无力症（GT） 无反应 无反应 正常巨大血小板综合症(BSS) 正常 正常 无反应血管性血友病 (vWD) 正常 正常 无反应诱导剂种类和浓度选择与抗血小板药物监测抗血小板药物ASAAA 、Col 、ADP抵克力得ADP自发性血小板聚集（SPA）在急性心梗预后判断中的意义方法:全血或PRP在不加诱导剂条件下于370C1000rpm连续搅拌20min。判断:重度 10min内聚集率 20%轻度 20min内聚集率 20%阴性 20min内聚集率95% CD62P CD633%凝血酶活化血小板:糖尿病伴微血管病变、高血压病、冠心病、高脂血症、脑血栓形成短暂性脑缺血发作、脑动脉硬化 CD42a CD42b CD62p CD63 血小板相关疾病巨血小板:综合征（BSS）血小板巨大 CD42a CD42b CD61血小板无力症:（GT）CD41 CD61CD42aCD42b / 血小板群异三、凝血系统检查1、凝血时间内源途径（cloting time,CT)2.部分凝血活酶时间内源途径（active partial thromboplastin,APTT)3.血浆凝血酶原时间测定外源途径（plasmaprothrombin time, PT)4、纤维蛋白原测定（fibrinogen test)5、凝血酶时间测定共同途径（thrombin time )6.复钙交叉试验(cross recalcification test, CRT ) 四. 抗凝血物质检测血浆抗凝血酶活性测定;血浆抗凝血酶抗原测定;血浆蛋白C测定;血浆蛋白S测定等五.纤溶活性与降解产物检测血浆组织型纤溶酶激活物测定;血浆纤溶酶原活性测定;血浆纤溶酶原活化抑制物测定;血浆纤溶酶抗纤溶酶复合物测定;血浆D二聚体检测;血浆纤维蛋白相关肽检测;第三节 一级筛选试试验1、出血时间（bleeding time BT）测定。原理：血流停止时间主要受血小板及毛细血管的影响。方法：出血时间测定器法参考值：6.9 +/- 2.1min 2、凝血时间（Coagulation time,CT）测定原理：血液接触带阴电荷表面（如玻璃、白陶土）激活XIIa，最后使fibrinogen转化为Fibrin.（检查内源性途径）。方法：试管法，3只内径相同的小试管（内径8cm）抽血液入针筒时计时。每管注入血液1ml,37水箱，4分钟后每30s观察一次，血液不动为止（管），以二管凝血时间为准，第三管可做为血块收缩用。参考值：412min3. 血小板计数4、血块凝缩试验（CRT） 原理:血液凝固 血小板收缩酶 血块收缩、血清析出血块凝缩影响因素:) 血小板量和质) FI 浓度3）FXIII的水平4）红血球的比积方法：静脉采用1ml，置于内径8mm，干试管内，加塞静止37水浴箱中, 于1/2h、1h及24h分别观察血块凝 缩情况正常于1/21h开始，24h凝缩完全。结果判断（1）完全凝缩:血块与管壁分离，血清析出1/21/3 （2）部分凝缩:血块大部分凝缩，血清析出1/3 （3） 凝缩不良:血块略有凝缩，少量血清析出（4） 不凝缩:血块维持原样，无血清析出5毛细血管脆性试验（Capillary resistance test）一级筛选试验临床意义及应用参考范围 实验名称 可能原因1出血器法4.8-9 BT 血管2试管法412min CT 凝血因子3100300109/L PC 血小板4完全收缩/24h CRT 抗凝物质510个出血点以内 Capillary Resist Test6比服药前延长2以内 Aspirin耐量必要时测血小板粘附试验或聚集试验 第四节 二级筛选试试验1、凝血酶原时间测定（Prothrombin time, PT）原理：血浆组织凝血活酶（III）+ 钙 凝血时间 外源途径方法：Quik氏法（现已用仪器取代）。每次做正常对照。参考值：1214s或大于正常对照3s以上为异常;PTR 1.0+/- 0.5;INRISI 1.0+/- 0.12、部分凝血活酶时间（Active partial thromboplastin time, APTT)。原理：血浆脑磷脂白陶土激活XIIXIIa此试验主要测定内源系统第一阶段有无凝血障碍。参考值：35s45s，患者结果较正常对照延长10s有意义 3、凝血酶时间共同途径（thrombin time, TT）原理：受检血浆标准凝血酶 血浆凝固方法：患者血浆 正常血浆 凝血酶试剂 0.1ml 0.1ml 0.1ml37水箱 观察凝固时间参考值：与正常对照相差3s以内为正常，若超过正常对照3s以上为延长。4、血浆纤维蛋白原测定原理：血浆纤维蛋白原与氯化钙作用生成纤维蛋白。方法：仪器法 (定氮法)参考值：2- 4g/L 5、复钙交叉试验 (已有凝血障碍)凝血因子缺失 vs抗凝物质存在;待测血浆加正常血浆(1/51/10);纠正结果第五节 纤溶活性检查试验1.3P试验(plasma protamine paracoagulation test)2.优球蛋白溶解试验(euglobulin lysis time, ELT ) 3.血浆纤维蛋白降解产物测定(fibrin degradation products, FDP)4.D-二聚体测定 (D-dimer, DD) 1.血浆鱼精蛋白副凝试验（Plasma protamine paracoagulation Test, 3P)原理：纤维蛋白单体和纤维蛋白的降解产物（FDP）结合成的可溶性复合物，在鱼精蛋白的作用下解离，使纤维蛋白单体聚合沉淀呈 现可见的颗粒、纤维蛋白丝或胶冻胶冻胶冻状。方法：病人血浆0.5ml1鱼精蛋白0.05ml摇匀置37水浴箱15min后，观察结果。临床意义：正常3P试验阴性。DIC确诊试验之一 2. 优球蛋白溶解试验原理：优球蛋白 溶解在等渗盐水中纤维蛋白 Ca2（或凝血酶）纤溶酶原纤溶酶凝固溶解血浆活化素方法：加钙法 加凝血酶法临床意义：正常溶解时间大于120分钟; 90分钟有意义。DIC晚期90分钟 ，DIC确诊试验之一。3. 血浆纤维蛋白降解产物测定Latex method:参考值：小于 5 mg/L4. D-dimer determinationLatex method:参考值：小于 200ug/L二级筛选试验应用、临床意义KPTT延长主要为XI、IX、VIII因子减少，各型血友病筛选试验, 凝血酶、纤维蛋白原、XII、PF3减少也有影响。PT延长主要见于I、II、VII、V、X因子减少，如肝病、DIC等。TT延长主要见于抗凝血酶物质存在，DIC时延长。纤维蛋白原测定减少，主要见于肝病、DIC、先天性纤维蛋白减少症。3P阳性说明FDP，有纤溶现象。优溶90min说明纤溶亢进。第六节 血液流变学检测Blood viscosityPlasma viscosityErythrocyte deformabilityErythrocyte electrophoresis timeDIC(Disseminated Intravas